Определение фенолкарбоновых кислот методом капиллярного зонного электрофореза и спектроскопии диффузного отражения после сорбционного концентрирования тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ

На правах рукописи

МЕДВЕДЕВА ОЛЬГА МИХАЙЛОВНА

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЕНОЛКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОГО ЗОННОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА И СПЕКТРОСКОПИИ ДИФФУЗНОГО ОТРАЖЕНИЯ ПОСЛЕ СОРБЦИОННОГО КОНЦЕНТРИРОВАНИЯ

02.00.02. - аналитическая химия

Автореферат

диссертации на соисканиеученой степени кандидата химическихнаук

Москва - 2004

Работа выполнена на кафедре аналитической химии Химического факультета Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова

Научный руководитель:

доктор химических наук, профессор Дмитриенко Станислава Григорьевна

Официальные оппоненты:

доктор химических наук, профессор Дедков Юрий Маркович кандидат химических наук, доцент Гурковская Елена Александровна

Ведущая организация:

Институт геохимии и аналитической химии им. В.И.Вернадского РАН

Защита состоится 23 декабря 2004г в 16 час 15 мин в ауд. 344 на заседании диссертационного совета Д.501.001.88 по химическим наукам при Московском государственном университете им. М.В. Ломоносова по адресу:

119992, Москва, Ленинские горы, МГУ, Химический факультет

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Химического факультета МГУ им М.В .Ломоносова

Автореферат разослан 19 ноября 2004 года

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат химических наук

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. В настоящее время все чаще возникает необходимость высокоселективною и высокочувствительного определения фенолкарбоновых кислот (ФК) - производных бензойной и коричной кислот, в различных объектах. Заметно возросший интерес к этим веществам в первую очередь связан с их высокой антиоксидантной, антимутагенной и антиканцерогенной активностью. Фенолкарбоновые кислоты присутствуют во многих лекарственных растениях, чае, фруктах, как в свободной форме, так и в виде простых или сложных эфиров. Вкусовые характеристики многих напитков растительного происхождения во многом определяются наличием в их составе этих соединений. По содержанию отдельных фенолкарбоновых кислот -маркеров, можно судить о подлинности алкогольной продукции, так как ее фенольный состав индивидуален и зависит как от сорта и места происхождения винограда, так и способа приготовления и хранения вин и коньяков. Кроме того, некоторые фенолкарбоновые кислоты и их эфиры находят широкое применение в пищевой промышленности в качестве сильных и одновременно нетоксичных консервантов. Очень важно определять низкие содержания фенолкарбоновых кислот в водах, так как они служат своеобразными индикаторами распада органического вещества, в частности лигнина.

При определении соединений этого класса в ряде случаев используют высокоэффективную жидкостную хроматографию и капиллярный зонный электрофорез (КЗЭ) *. Для повышения чувствительности определения и удаления мешающих компонентов матрицы в немногочисленных работах применяют жидкостную или твердофазную экстракцию. В последнем случае возникает проблема, заключающаяся в низкой эффективности экстракционного и сорбционного концентрирования этих полярных соединений.

В качестве возможного пути решения проблемы в настоящей работе предложено использовать пенополиуретаны (ППУ) и сверхешитый полистирол (ССПС). Ранее эти сорбенты успешно зарекомендовали себя для сорбционного концентрирования фенолов и других полярных соединений. Сведения о сорбции фенолкарбоновых кислот на ППУ и ССПС в литературе отсутствуют.

Не менее важен поиск новых подходов к определению фенолкарбоновых кислот после их сорбционного выделения. Весьма перспективно в этом плане сочетание группового сорбционного концентрирования с последующим определением индивидуальных соединений в элюате методом КЗЭ. В нашей стране появление работ такого типа в существенной степени инициируется созданием отечественных систем капиллярного электрофореза. Актуальной остается разработка простых, экспрессных и недорогих методов определения отдельных представителей этого класса соединений, основанная на сочетании сорбционного концентрирования с последующим определением кислот непосредственно в фазе сорбента с применением спектроскопии диффузного отражения (СДО).

Цель работы состояла в изучении сорбции фенолкарбоновых кислот и их 4-нитрофенилазопроизводных и разработке методик сорбционного

концентрирования этих соединений для последующего определения в элюате методом КЗЭ или непосредственно в фазе сорбента с применением СДО и цветометрических сканер-технологий. Достижение поставленной цели предусматривало решение следующих задач:

• изучение особенностей сорбции фенолкарбоновых кислот на ППУ, ГШУ, модифицированном триоктиламином (ТОА), и сверхсшитом полистироле в зависимости от условий извлечения и природы сорбируемых соединений, установление взаимосвязи между коэффициентами распределения и гидрофобностью сорбатов;

• оптимизацию условий разделения и определения фенолкарбоновых кислот методом капиллярного зонного электрофореза;

• изучение возможности сочетания группового концентрирования фенолкарбоновых кислот на сверхсшитом полистироле с последующим определением индивидуальных соединений в элюате методом капиллярного зонного электрофореза;

• изучение условий образования 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот и их сорбции на пенополиуретанах, сравнительное изучение спектрофотометрических характеристик этих соединений в водных растворах и фазе пенополиуретана;

• изучение возможности сочетания сорбционного концентрирования 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот с их последующим определением методом спектроскопии диффузного отражения или цветометрических сканер-технологий.

Научная новизна. Предложено использовать пенополиуретаны и сверхсшитый полистирол для сорбционного концентрирования фенолкарбоновых кислот. Систематическое исследование сорбции ФК на этих сорбентах позволило выявить влияние гидрофобности на межфазное распределение этих соединений. Предложены эмпирические уравнения, связывающие коэффициенты распределения ФК с их гидрофобностью (параметром Ханша). Выявлены основные факторы, определяющие закономерности электрофоретического разделения смесей фенолкарбоновых кислот и парабенов - эфиров 4-гидроксибензойной кислоты. Реализовано сочетание сорбционного концентрирования ФК на ССПС с их определением в элюате методом КЗЭ. На основании изучения процессов образования 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот, сорбции их на ППУ и спектральных характеристик сорбатов предложено использовать СДО для индивидуального определения ФК в фазе сорбента. Выявлена и обоснована возможность использования офисного сканера и компьютерных программ цифровой обработки изображений в качестве нового способа числовой оценки интенсивности окраски веществ, сорбированных на ППУ.

Практическая значимость работы. Разработана методика группового динамического концентрирования фенолкарбоновых кислот на микроколонке, заполненной ССПС, с последующим определением индивидуальных кислот в элюате методом КЗЭ.

С применением СДО разработаны сорбционно-фотометрические методики определения салициловой, -4-гидроксибензойной, галловой, ванилиновой и

кофейной кислот. Методики апробированы при анализе модельных водных растворов, алкогольной продукции, речной воды и подкормки для растений. Разработаны тест-методики определения 4-гидроксибензойной и галловой кислот с применением минифотометра «Унифот-Спектр 470».

Положения, выносимые на защиту:

1. Предложение использовать пенополиуретаны и сверхсшитый полистирол для сорбционного концентрирования фенолкарбоновых кислот.

2. Результаты исследования и изученные особенности сорбции фенолкарбоновых кислот на пенополиуретане, пенополиуретане, модифицированном триоктиламином, и сверхсшитом полистироле.

3. Факторы, влияющие на электрофоретическое поведение фенолкарбоновых кислот и парабенов в варианте капиллярного зонного электрофореза.

4. Совокупность данных об условиях образования 4-нитрофенил-азопроизводных фенолкарбоновых кислот и сорбции их на пенополиуретане.

5. Обоснование возможности использования офисного сканера в качестве аналитического прибора, пригодного для измерения цветометрических характеристик окрашенных соединений, сорбированных на пенополиуретане.

6. Методики сорбционного концентрирования и определения фенолкарбоновых кислот методом капиллярного зонного электрофореза, спектроскопии диффузного отражения и цветометрических сканер-технологий.

Апробация работы. Основные результаты доложены на Международной конференции студентов и аспирантов «Ломоносов-2001» (Москва, 2001), Международной научной конференции «Концентрирование в аналитической химии» (Астрахань, 2001), VIII Всероссийском симпозиуме по молекулярной жидкостной хроматографии и капиллярному электрофорезу (Москва, 2001), Всероссийском симпозиуме «Тест-методы химического анализа" (Москва, 2001), Всероссийской конференции «Актуальные проблемы аналитической химии», (Москва, 2002), European Conference on Analytical Chemistry "Euroanalysis-12" (Dortmund, Germany, 2002), Международном симпозиуме «Разделение и концентрирование в аналитической химии» (Краснодар, 2002), Международном форуме «Аналитика и аналитики» (Воронеж, 2003), V Всероссийской конференции с международным участием по анализу объектов окружающий среды «Экоаналитика-2003» (Санкт-Петербург, 2003), Всероссийском симпозиуме «Хроматография и хроматографические приборы» (Москва, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 статей, 12 тезисов докладов.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 4 глав экспериментальной части, выводов и списка литературы (180 наименований). Во введении обоснована актуальность и цель работы, ее новизна и практическая значимость. В обзоре литературы систематизированы сведения о методах концентрирования и определения фенолкарбоновых кислот. Вторая глава посвящена описанию методики эксперимента. В третьей главе приведены результаты изучения сорбции ФК на

различных сорбентах. Четвертая глава посвящена оптимизации условий электрофоретического разделения и определения фенолкарбоновых кислот и парабенов. В пятой главе описаны условия образования 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот, их сорбционное извлечение на ППУ и спектральные характеристики сорбатов. Там же приведены методики определения фенолкарбоновых кислот с применением СДО и цветометрических сканер-технологий.

Работа изложена на 180 страницах машинописного текста, содержит 49 рисунков и 34 таблицы.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Экспериментальная часть

В качестве сорбентов использовали пенополиуретаны на основе простых (530), сложных (35-08) эфиров и их сополимера (ВП), выпускаемых ГПО «Радикал» (г. Киев, Украина). Кроме того, использовали ППУ 5-30, модифицированный триоктиламином (ТОА), и сверхсшитый полистирол MN-200 (удельная поверхность 800-1000 м2/г, степень сшивки 100%, размер частиц 75-125 мкм). ППУ использовали в виде таблеток (высота 5-10 мм, диаметр - 16 мм, масса ~0,025 г), которые выбивали металлическим пробойником из промышленного листа полимера. Для очистки от примесей таблетки ППУ встряхивали с ацетоном, после чего высушивали до воздушно-сухого состояния. Модифицирование ППУ ТОА проводили по следующей схеме: таблетки ППУ замачивали в 5 % растворе ТОА в ацетоне, выдерживали в течение 60 мин, избыток растворителя удаляли сдавливанием между листами фильтровальной бумаги. Таблетки хранили в защищенном от света месте.

Объектами исследования служили ФК бензойного и коричного ряда и некоторые их эфиры (х.ч.). В табл. 1 представлены их структурные формулы и некоторые физико-химические характеристики. Значения параметров гидрофобности и констант кислотной диссоциации рассчитывали с помощью программ ACD/logP и ACD/pKa (ACD/Labs, Toronto, Canada).

Тетрафторборат 4-нитрофенилдиазония синтезировали по стандартной методике. Использовали бромид цетилтриметиламмония (ч.д.а.), карбонат натрия (ч.), соляную кислоту, гидроксид тетрабутиламмония (ч.), дигидрофосфат натрия (х.ч.), гидроксид натрия (ч.д.а.), тетраборат натрия (ч.д.а.), триоктиламин (ч.д.а.), ацетонитрил (о.с.ч.), ацетон (х.ч.).

Спектры поглощения и оптические плотности растворов регистрировали на спектрофотометре «UV-2201» (Shimadzu, Япония), значения рН контролировали на иономере «Эксперт 001» (ООО «Эконикс-Эксперт», г. Москва).

Электрофоретическое разделение ФК проводили с использованием системы капиллярного электрофореза «Капель-105» (НПФ АЛ «Люмэкс», г. Санкт-Петербург). Использовали немодифицированный кварцевый капилляр общей (эффективной) длиной 60 (50) см и внутренним диаметром 75 мкм. Сбор и обработку данных проводили с помощью IBM PC с программным обеспечением «Мультихром» (ЗАО «Амперсенд», г. Москва)»).

Таблица 1. Фенолкарбоновые кислоты и их эфиры, щученные в работе

Кислота Струиурная формула мм 1«Р рК, рК2(рК3, РК4)

Бензойная СООН О 122,1 1,9±0Д 4,2+0,1 —

Салициловая (2-Гидроксибензойная) СООН ¿г 138,1 2,1 ±0,3 3,0+0,1 13,7±0,1

Ацетилсалициловая СООН Д.«***, 180,1 1Д±0,2 3,5±0,1 —

4-Гидроксибензойная СООН ч 138,1 1,4±0,2 4,6±0,1 9,2±0,1

Метилпарабен 152,1 1,9±0,2 8,3±0,2 —

Пропилпарабен 180,1 2,9±0,2 8,2+0,2 —■

Изопропилпарабен о сн, 180,1 2,7±0,2 8,4±0,2 —

Бутилпарабен 194,1 3,5±0,2 8,2±0,2 —

(5-Резорциловая (2,4-Дигидроксибензойная) СООН он 154,1 1,6±0,3 3,3±0,1 9,1±0,2, (14,4+0,1)

Протокатеховая (3,4-Д игидроксибензойная) СООН он 154,1 1,2±0,3 4,5±0,1 9,1±0,2, (12,9±0,1)

Галловая (3,4,5- Тригидроксибензойная) соон но^^ои 170,1 0,9±0,3 4,3±0,1 8,9±0,2, (12,3±0,2, 14,4±0,2)

Ванилиновая (З-Метокси-4-гидроксибензойная) СООН ОН 168,1 1,3±0,3 4,5±0,1 9,3+0,2

Сиреневая (3,5-Диметокси-4- гидроксибензойная) СООН МвО^^ОМ. он 198,1 1,1±0,3 4,3+0,1 9,3±0,2

Коричная (Г 148,1 2,4+0,3 3,8±0,2 —

о-Кумаровая (2-Гидроксикоричная) ¿Г" 164,1 2,4±0,5 3,9±0,2 10,7±0,4

Кофейная (3,4-Дигидроксикоричная) СН«СН-СООН & он 180,1 1,4±0,4 4,0±0,4 9,9±0,1, (12,8±0,3)

Феруловая (З-Метокси-4- гидроксикоричная) сн-сн-соон он 195,1 1,6±0,4 4,0±0,4 10,2±0,3

Сорбцию соединений на ППУ проводили в статическом режиме. Сорбцию соединений на ССПС проводили в статическом и динамическом (на микроколонке 20x3,5мм, заполненной 0,027 г ССПС) режимах. Равновесные концентрации исследуемых соединений определяли фотометрически. Значения степеней извлечения (R,%) рассчитывали по уравнению:

где Со - концентрация определяемого соединения в водном растворе перед сорбцией, С - концентрация в растворе после сорбции. Значения коэффициентов распределения (D) рассчитывали по уравнению:

где V- объем анализируемого раствора (мл), т - масса сорбента (г).

Диффузное отражение измеряли на колориметре «Спектротон» (ОКБА НПО «Химавтоматика», г. Чирчик) и минифотометре «Унифот-Спектр 470» (ИОНХ, г.Москва, разработчик к.х.н. Ю.Л. Шишкин).

Сканирование цветовых шкал осуществляли с использованием сканера Hewlett Packard ScanJet 4400 С, совместимого с компьютером на базе процессора Intel (128.0Mb, операционная система Windows). Цветовые шкалы помещали в сканер и сканировали в цветовом режиме RGB 24 бит с разрешением 300 dpi. Цветоделение изображений шкал и определение яркостей R, G, В каналов выполняли в графическом редакторе Adobe Photoshop 7.0. Математическую обработку результатов осуществляли в редакторе Origin 6.0.

Сорбция фенолкарбоновых кислот на пенополиуретанах и сверхешитом полистироле

Изучена сорбция ФК на ППУ, ППУ, модифицированном ТОА, и ССПС в зависимости от времени контакта фаз, рН и состава раствора, природы и концентрации извлекаемых соединений.

Сравнение сорбционного поведения ФК указывает на то, что сорбция кислот на этих сорбентах имеет много общего. Прежде всего, следует отметить, что кислоты на всех сорбентах сорбируются в молекулярной форме. Степень извлечения ФК максимальна при рН < рК) - 2, то есть там, где их собственная диссоциация полностью подавляется. Сопоставление степеней извлечения и коэффициентов распределения показывает, что на сорбцию фенолкарбоновых кислот ППУ существенное влияние оказывает их гидрофобность. Лучше всего извлекаются наиболее гидрофобные соединения - 2-гидроксикоричная, салициловая и коричная кислоты.

Более того, наблюдаются линейные корреляции между логарифмом коэффициента распределения и параметром гидрофобности ФК:

• кислоты бензойного [»i;w:lgD = 0,912xlgP + 0,771 (R2 = 0,93)

• кислоты коричного ряли:1^0 = 0,564xlgP + 1,651 (R2 = 0,99)

Изучена сорбция ФК из 0,1 М НС1 на ППУ с различным строением

полимерного звена. Как видно из табл. 2, для большинства соединений сорбция зависит от полимерной основы ППУ и возрастает при переходе от ППУ на основе сложных эфиров (35-08) и ППУ на основе смеси простых и сложных

8

эфиров (ВП) и далее к ППУ на основе простых эфиров (5-30). Такое различие в сорбционном поведении примерно одинаковых по гидрофобности ППУ указывает на то, что наряду с гидрофобными взаимодействиями при сорбции ФК реализуются специфические - с образованием водородных связей. Известно, что простые эфирные группы более склонны к образованию водородных связей, чем сложноэфирные.

Таблица 2. Коэффициенты распределения (lgD) ФКнаППУиССПС (Сфк^хЮ^М, Снег 0,1 М, t = 30мин,У=25мл, ттту=0,05г, п=3, Р=0,95)

Кислота ППУ 5-30 ППУ ВП ППУ 35-08 ППУ 5-30, модиф. ТОА ППУ 5-30, модиф. ТОА (+5MLÍC1) ССПС*

Бензойная 2,1±0,3 2,0+0,1 1,9±0,1 2,5±0,4 3,0±0,1 3,3±0,1

Салициловая 2,6±0Д 2,5±0,1 2,4±0,2 3,3±0,2 3,7±0,2 3,8±0,2

Ацетилсалициловая 1,9±0,5 1,7±0,2 1,4±0,1 2,2±0,2 2,8±0,2 2,6+0,1

4-Гидроксибензойная 2,1±0,3 1,9±0,2 1,7±0,2 2,8±0,3 3,2±0,2 3,5±0,1

2,4- Дигидроксибензойная 2,2±0,3 2,0±0,1 1,5±0,1 3,2+0,1 3,5±0,3 3,1±0,1

Галловая 1,4±0,5 1,4±0,2 0,9±0,1 2,2+0,1 2,9±0,3 2,8±0,2

Ванилиновая 2,1±0,3 1,8±0,2 1,8±0,2 2,6±0,2 3,1±0,5 3,2±0,1

Сиреневая 1,9±0Д 1,9±0,1 1,7±0,2 2,1±0,2 2,8±0,2 3,3+0,2

Коричная 2,7±0,2 2,5±0,1 2,5±0,1 3,0±0,1 3,3±0,3 3,8±0,1

2-Гидроксикоричная 3,0±0,2 2,8±0,1 2,5±0,1 3,6±0,2 3,9±0,5 3,8+0,1

Кофейная 2,5±0,4 1,9±0,1 1,8±0,1 2,7±0,6 2,9±0,3 3,1 ±0,2

Феруловая 2,5±0,2 2,4±0,1 2,3±0,1 3,0±0,3 3,6±0,3 3,6±0,2

•t = 20 мин, m= 0,02 г, V = 10 мл

С целью улучшения сорбционных свойств ППУ предложено модифицировать их ТОА. ТОА выступает прежде всего в качестве пластификатора, облегчающего доступ ФК к активным центрам сорбента. При переходе от немодифицированного пенополиуретана к ППУ, модифицированному ТОА, наблюдается сокращение времени, необходимого для установления сорбционного равновесия и увеличение степеней извлечения, а также расширяется интервал рН, отвечающий максимальному извлечению ФК на 1-2 единицы. Как и в случае немодифицированного ППУ, наблюдаются линейные корреляции между логарифмом коэффициента распределения и параметром гидрофобности ФК:

• кислоты бензойного ряда :lgD = 0,570xlgP +2,053 (R2 = 0,91)

• кислоты коричного ряда:1£0 = 0,982х1§Р+ 1,317 (R2 = 0,97) Гидрофобные взаимодействия играют важную роль и при сорбции ФК на

ССПС. Наклон и расположение изотерм сорбции (рис. 1) коррелирует с приведенными параметрами гидрофобности.

Максимальным сродством к ССПС среди изученных сорбентов обладают наиболее гидрофобные 2-гидроксикоричная, коричная и салициловая кислоты.

а, мкмоль/г

600 4

Рис.1. Изотермы сорбции галловой (1), 2,4-

дигидроксибензойной (2), 4-гидроксибензойной (3) и салициловой (4) кислот на

400

2 сверхсшигом полистироле

Сна = 0,1 М, V»=10 мл, Шссис

0,02 г, t = 20 мин

200

о

0,00

0,20

0,40

0,60

С„мМ

Еще одним фактором, оказывающим влияние на сорбцию является введение в водную фазу солей-высаливателей. Степень извлечения ФК возрастает в присутствии 0,5 М сульфата натрия и 5 М хлорида лития, причем использование LiCl оказалось более эффективным.

Проведено сравнение эффективности ППУ, ППУ, модифицированного ТОА и ССПС по отношению к ФК (габл.2). Сопоставление igD указывает на то, что наибольшей сорбционной способностью по отношению к ФК обладает ССПС. Сорбция всех изученных кислот возрастает в ряду: ППУ < ППУ, модифицированный ТОА < ССПС. Различие в сорбционных свойствах ППУ и ССПС становится значительно меньше, если сорбцию проводить в присутствии высаливателя (5 М LiCl).

Более эффективным и технологичным методом концентрирования является динамическое сорбционное концентрирование или твердофазная экстракция, которое обычно проводят на небольшой микроколонке. При этом важно так оптимизировать размеры колонки, чтобы обеспечить, с одной стороны количественное извлечение анализируемых компонентов, а с другой — десорбцию сорбентов минимальным объемом элюента. Для минимизации объема элюента оказалось целесообразным использование микроколонки 20хЗ,5мм, заполненной 0,027 г ССПС, скорость пропускания растворов ФК через колонку при этом составила 3 мл/мин. На примере 4-гидроксибензойной кислоты было показано, что объем до проскока (5% уровень проскока) составляет 30 мл. Следовательно, количественное извлечение ФК, сорбирующихся на ССПС, с теми же или большими коэффициентами распределения может быть достигнуто из водных растворов объемом не превышающем 30 мл. При этом ФК сорбируются на 95-99% за исключением кофейной и галловой, степень извлечения которых составила 60 и 70 % соответственно. Сорбированные в динамических условиях ФК количественно десорбируются с микроколонки 0,5мл ацетонитрила при осуществлении десорбции в противотоке.

Таким образом, проведенные исследования показали, что для группового сорбционного концентрирования ФК можно использовать ППУ, модифицированный ТОА, и ССПС. Для решения практических задач, связанных с определением ФК методом КЗЭ, более удобным сорбентом, на наш взгляд,

может оказаться ССПС, так как на этом сорбенте возможно проводить сорбцию в динамическом режиме. В рамках данной работы ССПС предложен для разработки комбинированной методики определения ФК, основанной на групповом концентрировании этих соединений с помощью ССПС в динамических условиях, десорбции и их последующем определении методом КЗЭ.

Разделение и определение фенолкарбоновых кислот и парабенов методом капиллярного зонного электрофореза

Оптимизация условий разделения фенолкарбоновых кислот.

Способность определяемых ФК в нейтральных и щелочных растворах существовать в виде органических анионов позволяет использовать для их разделения классическую схему анализа с детектором у катода, принятую в КЗЭ. В этом случае разделение анионов происходит на основании различий их электрофоретической подвижности в присутствии достаточно сильного электроосмотического потока (ЭОП) (скорость ЭОП пропорциональна рН буферного раствора), в результате чего «медленные» анионы мигрируют против своей электрической природы к катоду.

Для выбора оптимальных условий разделения варьировали рН и концентрацию буферного раствора, условия ввода пробы, величину рабочего напряжения, а также концентрацию ацетонитрила в буферном растворе.

Из сравнения величин рКа изученных соединений (табл.1) видно, что в интервале рН 6 - 7 они полностью диссоциированы по карбоксильной группе и существуют только в форме однозарядных анионов. В среде фосфатного буферного раствора изучено влияние рН на время миграции ФК. Для всех изученных соединений значения времен миграции незначительно изменяются в интервале рН 6,0 - 6,5, увеличиваются при рН < 6,0 и уменьшаются при рН > 6,5. При рН 6 исследовано влияние концентрации буферного раствора на время миграции восьми кислот. При увеличении концентрации фосфатного буферного раствора наблюдается незначительное улучшение разрешения пиков, но при этом увеличивается общее время анализа.

Ввод пробы осуществляли пневматическим способом, при котором объем пробы можно регулировать изменением времени ввода. Время пневматического ввода варьировали от 10 до 30 с при давлении 30 мБар. Зависимость площади пиков от времени ввода отклоняется от линейной при значениях > 15 с, что связано с объемной перегрузкой системы разделения.

Варьирование рабочего напряжения показало, что время анализа восьмикомпонентной смеси уменьшается с 19 до 7 мин при увеличении напряжения от +10 до +25 кВ. Ток при этом напряжении достигает 78 мкА, что вполне допустимо для системы с воздушным охлаждением капилляра.

Поскольку в качестве элюента после динамического сорбционного концентрирования использовали ацетонитрил, было изучено влияние добавок этого растворителя в фосфатный буферный раствор. При увеличении концентрации ацетонитрила в буферном растворе разрешение улучшается, но наблюдается увеличение обшего времени анализа.

В выбранных оптимальных условиях (буферный раствор: 10 мМ ЫагНРО«, рН 6,05 ± 0,05, напряжение: +25 кВ, ввод пробы: 30 мБар х 15 с) проведено разделение 10-компонентной смеси ФК. Полученная электрофореграмма представлена на рис. 2.

Проведенные исследования позволили предложить два варианта определения ФК без и с предварительным сорбционным концентрированием в микроколонке, заполненной ССПС (табл. 3). Видно, что в выбранных условиях концентрирования пределы обнаружения ФК снижаются на порядок и составляют пх 10'2мкг/мл.

Правильность и воспроизводимость определения ФК проверяли методом «введено-найдено» в модельных растворах, результаты представлены в табл. 4. Методику определения ФК без концентрирования апробировали при определении галловой кислоты в танине и дубителях (табл. 5). Методика определения ФК с предварительным концентрированием на ССПС применена для анализа образца вина, в котором были идентифицированы и определены феруловая, сиреневая, ванилиновая и протокатеховая кислоты (табл. 5).

Оптимизация условий разделения парабенов. Парабены - эфиры 4-гидроксибензойной кислоты - в последние годы все чаще используют в качестве эффективных консервантов косметической продукции и лекарственных препаратов. Разделение парабенов методом КЗЭ проводили в среде боратного буферного раствора.

Исследовано влияние концентрации и рН буферного раствора, времени ввода пробы и величины рабочего напряжения на параметры разделения модельной смеси метил-, пропил-, изопропил- и бутилпарабена. Показано, что удовлетворительное разделение компонентов смеси происходит при рН 9,2. При использовании боратного буферного раствора с концентрацией 20 мМ наблюдается достаточное разрешение пиков за приемлемое время анализа. Зависимость площади пиков парабенов от времени ввода пробы сохраняется линейной в диапазоне 5-15 сек. Время анализа четырехкомпонентной смеси уменьшается с 18 до 8 мин при увеличении рабочего напряжения от +10 до +25 кВ.

В выбранных оптимальных условиях (буферный раствор: 20 мМ рН

9,18 ± 0,05, напряжение: +25 кВ, ввод пробы: 30 мБар х 15 с) проведено разделение четырехкомпонентной смеси, включающей метил-, пропил-, изопропил- и бутилпарабен (время анализа - 8 мин), а также семикомпонентной смеси, содержащей наряду с парабенами такие консерванты, как бензойную, салициловую, и 4-гидроксибензойную кислоты (время анализа-10 мин, рис.3).

Правильность и воспроизводимость определения парабенов проверяли методом «введено-найдено» в модельных растворах, результаты представлены в табл. 4.

Методика определения парабенов была применена при анализе двух образцов косметической продукции, в которой был идентифицирован и определен метилпарабен (табл. 5).

Рис. 2. Электрофореграмма смеси феруловой (1), сиреневой (2), галловой (3), 3,4-дигидроксибензойной (4), 2,4-дигидроксибензойной (5), коричной (6), 4-гидроксибензойной (7), бензойной (8), салициловой (9) и кофейной(Ю) кислот Капилляр кварцевый, Ь=50 см, с1=75 мкм, и= +25 кВ, 214 нм, 22С°, время ввода 15 с, Р=30 мБар, С№,нро,=10 мМ, рН буфера 6,0, СФК =20 мкг/мл.

пропилпарабена (3), метилпарабена (4), бензойной (5), 4-гидроксибснзойной (6) и салициловой (7) кислот

Капилляр: кварцевый, Ь=50 см, <1=75 мкм; и=+25 кВ, 214 нм, 22С°, время ввода 15 с, Р=30 мБар, Сма2п,о,=20 мМ; рН буфера 9,2, С =20 мкг/мл

Таблица 3. Характеристики методик определения фенолкарбоновых кислот и парабенов методом КЗЭ без (I) и с предварительным концентрированием (II) на микроколонке, заполненной ССПС

Кислота Время миграции, мин Уравнение градуировочного графика (Я2) Стт, мкг/мл

I II I II

Феруловая 4,98 У=1,928х (0,996) У=11,915х (0,990) 0,2 0,03

Сиреневая 5,08 У=1,064х (0,995) У=18Д93х (0,964) 0,3 0,02

Галловая 5,19 У=1,166х (0,995) У=20,988х (0,911) 0,3 0,02

Ванилиновая 5,19 У=1,391х (0,992) У=4,348х (0,929) 0,3 0,07

3,4-Дигидроксибензойная 5,28 У=0,605х (0,994) У=14,058х (0,982) 0,5 0,02

2,4-Дигидроксибензойная 5,30 У=1,295х (0,997) У=9,508х (0,895) 0,2 0,03

Коричная 5,42 У=1,132х (0,996) У=18,507х (0,974) 0,3 0,02

4-Гидроксибензойная 5,55 У=0,363х (0,955) У=17,593х (0,901) 0,8 0,03

Бензойная 6,05 У=0,963х (0,997) У=19,984х (0,911) 0,3 0,02

Салициловая 6,30 У=1,086х (0,996) У=32,293х (0,893) 0,3 0,02

Кофейная 14,20 У=0,304х (0,849) У=3,014х (0,899) 1,0 0,10

Метилпарабен 6,68 У=0,310х (0,976) - 1 -

Пропилпарабен 6,78 У=0,292х (0,969) - 1 -

Изопропилпарабен 6,83 У=0,686х (0,966) - 0,5 -

Бутилпарабен 7,39 У=0,566х (0,963) - 0,6

Таблица 4. Проверка правильности определения фенолкарбоновых кислот и парабенов методом «введено - найдено» (п=3, Р=0,95)

Объект Кислота Введено, Найдено, sr

мкг/мл мкг/мл

Модельный раствор 1 Феруловая 20 21±1 0,05

(без Сиреневая 20 21±1 0,05

концентрирования) Ванилиновая 20 2 Ш 0,05

Модельный раствор 2 Феруловая 0,5 0,47±0,05 0,09

(с Сиреневая 0,5 0,50+0,04 0,07

концентрированием) Ванилиновая 0,5 0,54±0,05 0,08

Модельный раствор 3 Метилпарабен 50 51±2 0,05

Пропилпарабен 50 52+2 0,05

Изопропилпарабен 50 50±1 0,05

Бутилпарабен 50 51+1 0,05

Таблица 5. Результаты определения фенолкарбоновых кислот и парабенов методом капиллярного зонного электрофореза в реальных объектах (п=3, Р=0,95)

Объект анализа Вещество Найдено, % (*-мкг/мл) sr

Танниц Галловая 1,45 ±0,04 0,04

Дубитель 1 Галловая 0,075 ± 0,04 0,05

Дубитель 2 Галловая 0,0042 ± 0,0005 0,05

Дубитель 3 Галловая 0,16 ±0,01 0,06

Дубитель 4 Галловая 0,18 ±0,01 0,05

Вино «Домашнее» Феруловая Сиреневая Ванилиновая Протокатеховая 0,14 ±0,02* 7,05 ± 0,05* 0,48 ±0,01* 10,15 ±0,02* 0,05 0,01 0,02 0,01

Лосьон L'Oreal Метилпарабен 9,8 ±0,6* 0,07

Лосьон MIA Метилпарабен 0,55 ±0,04* 0,07

Сорбция азопроизводных фенолкарбоновых кислот на ППУ и их определение методом спектроскопии диффузного отражения и с применением сканер-технологий

Сорбция азопроизводных фенолкарбоновых кислот на ППУ.

Предварительное переведение фенолов, ароматических аминов и других органических соединений в производные с целью повышения их гидрофобности и усиления хромофорных свойств - достаточно известный прием в аналитической химии органических соединений. В ряде случаев это позволяет увеличить эффективность концентрирования, а также существенно повысить чувствительность их определения.

Образование азосоединений представляет собой одну из основных реакций, применяемых при фотометрическом определении многочисленных органических соединений с активной метиленовой группой, таких, например, как фенолы. Переведение фенолов в азопроизводные - общеизвестный прием при их фотометрическом определении. Между тем, реакция азосочетания с фенолкарбоновыми кислотами практически не изучена.

В качестве диазосоставляющей в реакции азосочетания использовали тетрафторборат 4-нитрофенилдиазония (НФД). Выбор реагента обусловлен его устойчивостью в твердом виде и водных растворах, высокой скоростью протекания реакции азосочетания и интенсивной окраской образующихся азосоединений в водном растворе

Установлено, что в реакцию азосочетания вступают все изученные ФК (табл. 6), с образованием окрашенных преимущественно в желтый и реже в красный цвет азопроизводных. Изучена сорбция 4-нитрофенилазопроизводных ФК в зависимости от времени контакта фаз, концентрации НФД и рН среды. Максимальная сорбция на ППУ наблюдается в интервале концентраций НФД ЗхЮ^М - 1,5х10"3 М, Na2C03 0,1 - 0,2 М, сорбционное равновесие устанавливается в течение 30 мин. Для повышения селективности определения ФК предложено сорбировать их азопроизводные не только из щелочных, но и из кислых растворов (0,01 М НС1). Сопоставление степеней извлечения (табл. 6) показывает, что 4-нитрофенилазопроизводные ФК сорбируются из кислых сред более эффективно, чем из щелочных, что, по-видимому, связано с протонированием карбоксильных групп и переходом азосоединений ФК в молекулярную форму. Изотермы сорбции 4-нитрофенилазопроизводных ФК относятся к классу изотерм Ленгмюра. Предельная сорбция азопроизводных увеличивается в ряду кислот: галловая (27, 48) < 3,4-дигидроксибензойная (43, 56) < 4-гидроксибензойная (53, 166) < салициловая (68, 168) (в скобках указаны значения предельной сорбции ФК, сорбированных из 0,2 М соответственно, мкмоль/г). На примере 4-гидроксибензойной кислоты изучено влияние бромида цетилтриметиламмония (ЦТМА) на сорбцию 4-нитрофенилазопроизводного этой кислоты. Показано, что введение в сорбционную систему катионного ПАВ приводит к увеличению сорбции.

Проведен сравнительный анализ спектров поглощения 4-нитрофенилазопроизводных ФК и диффузного отражения их сорбатов на ППУ. Показано, что спектры поглощения азопроизводных ФК в 0,01М растворе НС1 для большинства изученных соединений гипсохромно смещены по сравнению с 0,2 М раствором №гСОз на 10-140 нм (табл. 6). Установлено, что не наблюдается радикальных изменений в спектральных характеристиках азопроизводных ФК, сорбированных из 0,01 М НС1. Спектры диффузного отражения для этих соединений смещены относительно спектров поглощения не более чем на 30 нм. Напротив, изменения в спектральных характеристиках становятся более заметными при сорбции из 0,2 М Na2CO3 В ряде случаев эти изменения проявляются в появлении новых полос, как, например, в спектре сиреневой кислоты, либо в значительном батохромном смещении полосы, как в случае 2-гидроксикоричной (ДХ.=50 нм) и 4-гидроксибензойной кислот (ДА.= 120 нм).

Таблица 6. Максимумы поглощения, диффузного отражения и степени извлечения 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот сорбированных на ППУ

(СФК= 10° М, Сцфд=5х10"'М, V = 25 мл, тппу~ 0,03 г, п=3, Р=0,95)

Кислота 0,2М№2С03 0,01МНС1

^■шах, фот. ^птах, сдо ^-тпах, фот. ^тах, сдо Я, %

Салициловая 410 400 63±1 350 380 99±1

4-Гидроксиксибензойная 420 540 51±1 370 380 97±1

2,4-Дигидроксибензойная 450 460 26±2 420 450 99±1

3,4-Дигидроксибензойная 410 400 33±5 410 380 80±4

Галловая 410 400 26±5 420 400 52±5

Ванилиновая 510 540 52±9 400 430 99±3

Сиреневая 410 420,620 34±1 350 380 86±6

2-Гидроксикоричная 510 560 91±2 370 380 93±1

Кофейная 420 400 20±5 350 380 73±1

Феруловая 450 400,550 55±2 350 380 81±2

Сорбционно-фогометрическое и тест-определение. В настоящей работе на примере салициловой, 4-гидроксибензойной, галловой, ванилиновой и кофейной кислот оценена возможность аналитического применения азосоединений фенолкарбоновых кислот в сорбционно-фотометрическом анализе с применением ГИТУ. Сорбционно-фотометрическое определение ФК включает стадии получения азосоединений в растворе, их сорбционное концентрирование на пенополиуретанах и последующее определение непосредственно в фазе сорбента с применением спектроскопии диффузного отражения или визуального наблюдения.

Метрологические характеристики разработанных методик приведены в табл. 7. Селективность методик оценена на примере 4-щдроксибензойной и галловой кислот. Определению 4-гидроксибензойной кислоты не мешают по крайней мере, 1000-кратные количества 1л+, №\ К+, БО/', 803г", К03',СГ, 500-кратные -С(12+, Си2+, М82+, И", ЯСК", Са2+, 200-кратные - Н2Р04-,№2+, Со2+, Ре34, Ре2+, Вг, 100-кратные - галловой, салициловой кислот, 50-кратные - N11/, А13+, 1ч'02' 10-кштные - Ъ\ \ Мп2+. Сг(Ш). Сг(У1), 1". Определению галловой кислоты не мешают по крайней мере, 500-кратные количества изопентановой, октановой кислот - 500, 250-кратное - бензойной кислоты; 100-кратное - салициловой кислоты; 10-кратное - гликолевой, винной, иировиноградной, глутаровой, фумаровой, лимонной, янтарной, яблочной кислот, 5-кратное - фенола, фенилуксусной кислоты.

Правильность и воспроизводимость определения ФК подтверждена методом "введено-найдено" в модельных образцах на основе водопроводной воды (табл. 8).

Методики применены для определения галловой кислоты в алкогольной продукции, 4-гидроксибензойной кислоты в речной воде и подкормке для растений (табл.9).

Таблица 7 Метрологические характеристики определения фенолкарбоновых кислот с применением спектроскопии диффузного отражения

Кислота Условия определения Диапазон определяемых содержаний, мкг/мл с мкг/мл

Салициловая Снфд=5х10"4М, Сыа2СО1=0,2М, 60 мин 3-10 1

4-Гидроксибензойная Снфд=5х104М, Сиа;ГО,=0,2М, Сщма=1,5хЮ-4М, 30 мин 0,1-2 0,03

Галловая Снфд=5х104М, СНсг0,01М, 30 мин 0,2-6 0,05

Кофейная 0,3-4 0,1

Ванилиновая 0,15-4 0,09

Таблица 8 Проверка правильности определения 4-гидроксибензойной и галловой кислот методом «введено - найдено» при разных способах регистрации аналитического сигнала (п = 3, Р = 0,95)

Определяемый компонент Введено, мкг/мл «Спектротон» «Унифот-Спектр 470» Сканер

Найдено, мкг/мл Найдено, мкг/мл Найдено, мкг/мл

4-Гидрокси- бензойная кислота 0,2 0,22±0,02 0,03 0,22±0,02 0,07 0,21 ±0,04 0,08

Галловая кислота 1,5 1,4±0,2 0,05 1,5±0,1 0,08 1,3±0,2 0,06

Таблица 9 Результаты определения 4-гидроксибензойной и галловой кислот в различных объектах (п = 3, Р = 0,95)

Определяемый компонент Образец Спектроскопия диффузного отражения Ион-эксклюзионная хроматография

Найдено, мкг/мл С-%) Найдено, мкг/мл 5Г

4-Гидроксибензойная кислота Подкормка для растений 6±2* 0,14 - -

Вода из р Клязьма 2,4±0,5 0,11 2,0±0,4 0,10

Галловая кислота Вино «Херес» 43±3 0,03 44+5 0,06

Вино «Кокур» 77±5 0,03 - -

Коньяк «Московский» 18±2 0,07 18±2 0,05

Коньяк «Белый Аист» 38±2 0,04 42±2 0,02

Изучена возможность применения минифотометра «Унифот - Спектр 470» для определения 4-гидроксибензойной и галловой кислот. «Унифот - Спектр 470» предназначен для измерения световых потоков, отраженных от твердых поверхностей, на длинах волн 430,470,525, 590,615 и 660 нм. Метрологические характеристики определения 4-гидроксибензойной и галловой кислот с применением минифотометра приведены в табл. 10, а в табл. 8 приведены результаты проверки правильности методом «введено-найдено».

Таблица 10. Метрологические характеристики определения 4-гидроксибензойной и галловой кислот с применением минифотометра «Унифот-Спектр 470» (п = 3, Р = 0,95)

Определение фенолкарбоновых кислот с использованием офисного сканера и компьютерных программ обработки изображений. Предложено использовать офисный сканер и компьютерные программы цифровой обработки изображений для численной оценки интенсивности окраски веществ, сорбированных на пенополиуретане. Способ основан на сканировании окрашенных пенополиуретановых образцов с помощью сканера, обработке цветных изображений в графическом редакторе Adobe Photoshop и построении градуировочных зависимостей в координатах светлота одного из выбранных каналов (R, G или В) - концентрация определяемого компонента с использованием программы Origin. Выбраны оптимальные условия сканирования: цветовой режим RGB 24 бит, разрешение 300 dpi, сканирование на белом фоне. На примере салициловой, 4-гидроксибензойной, галловой и кофейной кислот изучены зависимости светлоты R, G и В канатов от концентрации кислоты. Показано, что для каждой кислоты можно выделить как наименее, так и наиболее яркие каналы, которые изменяются с увеличением концентрации. Для окрашенных в желтый цвет 4-нитрофенилазопроизводных салициловой, галловой и кофейной кислот, имеющих максимумы поглощения (отражения) в синей области спектра, наименее ярким оказался синий (В) канал, а наиболее ярким - красный (R). Напротив, для окрашенных в бордовый цвет 4-нитрофенилазопроизводных 4-гидроксибензойной кислоты наименее яркий канал - зеленый (G). Установлено, что с увеличением концентрации 4-нитрофенилазопроизводного ФК, сопровождающегося увеличением интенсивности окраски таблетки, наблюдается уменьшение светлоты R, G, В каналов цветного изображения, вызванное уменьшением доли белого в цвете образца. Найдено, что градуировочные зависимости описываются убывающей экспонентой 1-го порядка: Y=Yo+Axexp(-C/t), где Yo, A, t - параметры регрессионного уравнения, описывающие расположение и форму кривой, Y -светлота, изменяющаяся в интервале от 0 до 255, С - концентрация определяемого компонента, мкг/мл. Эта зависимость может использоваться в качестве градуировочной (табл. 11).

Таблица 11. Цветовые каналы, параметры градуировочной зависимости в координатах светлота канала - концентрация определяемого компонента (мкг/мл) и метрологические характеристики определения фенолкарбоновых кислот с помощью сканера

Кислота Цветовой канал Параметры градуировочной зависимости Я2 Диапазон определяемых содержаний, мкг/мл Сщнь мкг/мл

У0 А 1

Салициловая В 88 70 5 0,989 2-10 0,7

4-Гвдрокси-бензойная в 34 ИЗ 0,2 0,991 0,03-0,4 0,01

Галловая В 47 79 1 0,995 0,2-2 0,05

Кофейная В 30 94 1,3 0,998 0,15-3 0,05

Для оценки предела обнаружения экспоненциальные зависимости в координатах светлота канала - концентрация переводили в линейные: 1п(Д/У-Уо) = 1/1x0. Правильность и воспроизводимость результатов определения некоторых из изученных компонентов подтверждена методом "введено-найдено" (табл.8). Показано, что с помощью офисного сканера и компьютерных технологий можно определять ФК с такой же чувствительностью, как и с помощью спектроскопии диффузного отражения (табл. 7,11).

Выводы

1. Исследована сорбция фенолкарбоновых кислот бензойного и коричного ряда на пенополиуретане, пенополиуретане, модифицированном триоктиламином, и сверхсшитом полистироле. Даны объяснения особенностей сорбции фенолкарбоновых кислот в зависимости от природы сорбента, кислотности раствора, природы и концентрации соединений. Предложены уравнения, связывающие коэффициенты распределения фенолкарбоновых кислот на ППУ с их гидрофобностью (параметром Ханша). Показано, что пенополиуретан, модифицированный триоктиламином, и сверхсшитый полистирол можно использовать для группового концентрирования фенолкарбоновых кислот.

2. Исследовано влияние концентрации и рН буферного раствора, времени ввода пробы и величины рабочего напряжения на параметры разделения фенолкарбоновых кислот и парабенов методом капиллярного зонного электрофореза с использованием системы капиллярного электрофореза «Капель-105» производства фирмы «Люмэкс». Выбраны оптимальные условия разделения. Проведено разделение 10-компонентной смеси, включающей бензойную, салициловую, 4-гидроксибензойную, 2,4-дигидроксибензойную, 3,4-дигцдроксибензойную, галловую, сиреневую, коричную, кофейную и феруловую кислоты (время анализа -15 мин), и 7-компонентной смеси, содержащей наряду с метил-, пропил-, изопропил- и бутилпарабеном такие консерванты, как бензойную, 4-гидроксибензойную и салициловую кислоты (время анализа -10 мин).

3. Разработана методика группового динамического концентрирования фенолкарбоновых кислот на микроколонке, заполненной сверхсшитым полистиролом, с последующим определением индивидуальных соединений в элюате методом капиллярного зонного электрофореза с пределами обнаружения Пх10гмкг/мл. Методика применена для определения фенолкарбоновых кислот в образце вина.

4. Изучена реакция азосочетания фенолкарбоновых кислот с тетрафторборатом 4-нитрофенилдиазония. С целью повышения селективности определения предложено сорбировать на пенополиуретане 4-нитрофенилазопроизводные фенолкарбоновых кислот из кислых сред (0,01 М НС1). С применением спектроскопии диффузного отражения исследованы особенности спектральных характеристик 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот, сорбированных на пенополиуретане, по сравнению с их водными растворами в зависимости от концентрации сорбата и условий сорбции.

5. Обоснована принципиальная возможность применения реакции азосочетания для разработки сорбционно-фотометрической и тест-методик определения салициловой, 4-гидроксибензойной, галловой, кофейной и ванилиновой кислот с пределами обнаружения 1, 0,03,0,05,0,1,0,09 мкг/мл соответственно.

6. Предложен новый способ оценки интенсивности окраски таблеток пенополиуретана с сорбированными 4-нитрофспилазопроизводными фенолкарбоновых кислот, который основан на применении офисного сканера и компьютерных программ обработки изображений. Установлено, что сканер-технологии пригодны для измерения цветовых характеристик (R, G, В) пористых полиуретановых образцов. Градуировочная зависимость в координатах светлота - концентрация фенолкарбоновой кислоты описывается убывающей экспонентой первого порядка. Показано, что с помощью сканера и компьютерных программ обработки изображения можно определять салициловую, 4-гидроксибензойную, галловую и кофейную кислоту с такой же чувствительностью, как и с помощью спектроскопии диффузного отражения.

Автор выражает искреннюю благодарность фирме Люмэкс (г. Санкт-

Петербург) за возможность использования оборудования этой фирмы и к.х.н.

А.А Иванову за предоставленные образцы.

Основное содержание диссертации изложено в следующих работах:

1. Медведева О.М., Мышак Е.Н., Дмитриенко С.Г., Иванов А.А., Шпигун О.Л. Сорбция ароматических карбоновых кислот на пенополиуретанах. // Вести. Моск. ун-та. Серия 2. Химия. 2002. Т. 43. № 1. С. 25 - 27.

2. Dmitrienko S.G., Medvedeva O.M., Ivanov А A, Shpigun O.A., Zolotov Yu.A. Determination of gallic acid with 4-Nitrophenyldiazonium tetrafluoroborate by diffuse reflectance spectroscopy on polyurethane foam. // Anal. Chim. Acta. 2002. V. 469. P. 295-301.

3. Дмитриенко С.Г., Пяткова Л.Н., Свиридова О.А. Медведева О.М. Разработка тест-средств на основе пенополиуретанов. // Партнеры и конкуренты. 2002. № 1. С. 19-23.

4. Шишкин Ю.Л., Дмитриенко С.Г., Медведева О.М., Бадакова С.А., Пяткова Л.Н. Применение сканера и компьютерных программ цифровой обработки изображений для количественного определения сорбированных веществ. // Журн. аналит. химии. 2004. т. 59. №2. С. 119 -124.

5. Куракина B.C., Медведева О.М., Дмитриенко С.Г., Шпигун О.А. Определение парабенов в косметической продукции методом капиллярного зонного электрофореза. // Веста. Моск. ун-та. Серия 2. Химия. 2004. Т. 45. №2. С. 124-130.

6. Медведева О.М., Куракина B.C., Дмитриенко С.Г., Тихомирова Т.Н., Шпигун О.А. Разделение и определение фенолкарбоновых кислот методом капиллярного зонного электрофореза с предварительным динамическим концентрированием на сверхсшитом полистироле. // Журн. аналит. химии. 2004. т. 59. №7. С. 752-759.

7. Медведева О.М. Особенности сорбции ароматических карбоновых кислот на пенополиуретанах. Тез. докладов международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам «Ломоносов-2001». Москва. 10.04-13.04.2001. С. 21.

8. Медведева О.М., Дуйсебаева Т.Б, Заякина Л.В. Сорбционно-фотометрическое определение гидроксибензойных кислот с применением пенополиуретанов. Тез. докладов международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам «Ломоносов-2001». Москва. 10.04 -13.04.2001. С. 310.

9. Медведева О.М., Дмитриенко С.Г., Дуйсебаева Т.Б, Шпигун О.А. Сорбционное концентрирование оксикарбоновых кислот на пенополиуретанах с целью последующего определения методом спектроскопии диффузного отражения. Тез. докл. Международной научной конференции «Концентрирование в аналитической химии». Астрахань, 26.11-29.11.2001. С. 14.

10. Медведева О.М., Дмитриенко С.Г., Иванов А.А., Шпигун О.А. Сорбция ароматических карбоновых кислот на пенополиуретанах. Тезисы VIII Всероссийского симпозиума по молекулярной жидкостной хроматографии и капиллярному электрофорезу, Москва, 10.09 -15.09.2001. С. 95.

П. Медведева О.М., Дмитриенко С.Г., Иванов А.А., Шпигун О.А. Тест-средства на основе пенополиуретанов для определения и-оксибензойной и галловой кислот. Тезисы докладов Всероссийского симпозиума «Тест-методы химического анализа», Москва, 28.11 -30.11.2001. С. 11.

12. Шишкин Ю.Л., Пяткова Л.Н., Медведева О.М., Бадакова С.А., Дмитриенко С.Г., Золотое Ю.А. Использование портативного фотометра-рефлектометра «Унифот» в тест-методах анализа с применением пенополиуретанов. Тезисы докладов Всероссийской конференции «Актуальные проблемы аналитической химии», Москва, 11.03 -15.03.2002. Т. 1. С. 56.

13. Шишкин Ю.Л., Пяткова Л.Н., Медведева О.М., Дмитриенко С.Г. Цветометрические сканер технологии для определения веществ, сорбированных на пенополиуретанах. Тезисы докладов Всероссийской конференции «Актуальные проблемы аналитической химии», Москва, 11.03 -15.03.2002. Т. 2. С. 72.

14. Medvedeva О., Dmitrienko S., Seliverstova I., Ivanov A., Shpigun 0., Zolotov Yu. Determination of phenolic acids using diffuse reflectance spectroscopy and ion-exclusion chromatography. Proceedings of European Conference on Analytical Chemistry «Euroanalysis-12». Dortmund, Germany. 8.09-13.09.2002. P. 481.

15. Дмитриенко С.Г., Пяткова Л.Н., Медведева О.М., Золотое Ю.А. Концентрирование органических веществ на пенополиуретанах: закономерности и примеры аналитического использования. Тезисы докладов международного симпозиума «Разделение и концентрирование в аналитической химии». Краснодар, 06.10-11.10.2002. С. 7.

16. Медведева О.М., Куракина B.C., Дмитриенко С.Г., Шпигун ОА., Золотов Ю.А. Определение фенолкарбоновых кислот методом капиллярного электрофореза после концентрирования на пенополиуретанах. Тезисы докладов международного форума «Аналитика и аналитики». Воронеж, 02.06-06.06.2003. С. 481.

17. Медведева О.М., Дмитриенко С.Г., Тихомирова Т.И., Куракина B.C., Шпигун О.А. Концентрирование фенолкарбоновых кислот на сверхсшитом полистироле из водных сред с последующим определением методом капиллярного зонного электрофореза. Тезисы V Всероссийской конференции по анализу объектов окружающей среды «Экоаналитика-2003» с международным участием. Санкт-Петербург, 06.10-10.10.2003. С. 242.

18. Медведева О.М., Куракина B.C., Дмитриенко С.Г., Шпигун О.А. Разделение и определение парабенов методом капиллярного зонного электрофореза. Тезисы докладов всероссийского симпозиума «Хроматография и хроматографические приборы» Москва, 15.03-19.03.2004. С. 207.

> . i ж " - .1 в

Принято к исполнению 17/11/2004 Заказ № 465

Исполнено 18/11/2004 Тираж: 100 экз.

0 0 0 «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 Москва, Балаклавский пр-т, 20-2-93 (095) 747-64-70 (095)318-40-68 www.autoreferat.ru

ВВЕДЕНИЕ

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Глава 1. Методы концентрирования и определения фенолкарбоновых 8 кислот

1.1. Методы концентрирования фенолкарбоновых кислот

1.1.1. Жидкостная экстракция

1.1.2. Сорбционное концентрирование

1.2. Методы определения фенолкарбоновых кислот

1.2.1. Хроматографические методы

1.2.2. Капиллярный электрофорез

1.2.3. Электрохимические методы

1.2.4. Другие методы определения фенолкарбоновых кислот 35 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 2. Объекты исследования, аппаратура и техника эксперимента

2.1. Исходные вещества и реагенты

2.2. Аппаратура и методика эксперимента

Глава 3. Сорбция фенолкарбоновых кислот на пенополиуретанах и 42 сверхсшитом полистироле

3.1. Сорбция на немодифицированных пенополиуретанах

3.2. Сорбция на пенополиуретане, модифицированном 50 триоктиламином

3.3. Сорбция на сверхсшитом полистироле

3.3.1. Сорбция в статических условиях

3.3.2. Сорбция в динамических условиях

3.4. Сравнение сорбционного поведения фенолкарбоновых кислот на 69 пенополиуретане и сверхсшитом полистироле

Глава 4. Разделение и определение фенолкарбоновых кислот и парабенов 71 методом капиллярного зонного электрофореза

4.1. Основы метода капиллярного электрофореза

4.2. Оптимизация условий разделения фенолкарбоновых кислот

4.3.Оптимизация условий разделения парабенов

4.4. Определение фенолкарбоновых кислот после сорбционного 99 концентрирования на ССПС

4.5. Определение парабенов методом капиллярного зонного 105 электрофореза

Глава 5. Сорбция азопроизводных фенолкарбоновых кислот на ППУ и их 109 определение методом спектроскопии диффузного отражения и с применением сканер-технологий

5.1. Получение 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых 110 кислот в водном растворе

5.2. Сорбция 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот 118 на пенополиуретане

5.2.1. Факторы, влияющие на сорбцию

5.2.2. Спектральные характеристики сорбатов

5.3. Практическое применение пенополиуретана для 140 сорбционно-фотометрического и тест-определения фенолкарбоновых кислот

5.3.1. Сорбционно-фотометрическое определение 140 •

5.3.2. Тест-определение

5.3.3. Определение фенолкарбоновых кислот с использованием 152 сканера и компьютерных программ обработки изображений

ВЫВОДЫ

Актуальность работы. В настоящее время все чаще возникает необходимость высокоселективного и высокочувствительного определения фенолкарбоновых кислот (ФК) - производных бензойной и коричной кислот, в различных объектах. Заметно возросший интерес к этим веществам в первую очередь связан с их высокой антиоксидантной, антимутагенной и антиканцерогенной активностью. Фенолкарбоновые кислоты присутствуют во многих лекарственных растениях, чае, фруктах, как в свободной форме, так и в виде простых или сложных эфиров. Вкусовые характеристики многих напитков растительного происхождения во многом определяются наличием в их составе этих соединений. По содержанию отдельных фенолкарбоновых кислот -маркеров, можно судить о подлинности алкогольной продукции, так как ее фенольный состав индивидуален и зависит как от сорта и места происхождения винограда, так и способа приготовления и хранения вин и коньяков. Кроме того, некоторые фенолкарбоновые кислоты и их эфиры находят широкое применение в пищевой промышленности в качестве сильных и одновременно нетоксичных консервантов. Очень важно определять низкие содержания фенолкарбоновых кислот в водах, так как они служат своеобразными индикаторами распада органического вещества, в частности лигнина.

При определении соединений этого класса в ряде случаев используют высокоэффективную жидкостную хроматографию и капиллярный зонный электрофорез (КЗЭ) *. Для повышения чувствительности определения и удаления мешающих компонентов матрицы в немногочисленных работах применяют жидкостную или твердофазную экстракцию. В последнем случае возникает проблема, заключающаяся в низкой эффективности экстракционного и сорбционного концентрирования этих полярных соединений.

В качестве возможного пути решения проблемы в настоящей работе предложено использовать пенополиуретаны (ППУ) и сверхсшитый полистирол (ССПС). Ранее эти сорбенты успешно зарекомендовали себя для сорбционного Научным консультантом диссертационной работы по капиллярному зонному электрофорезу был доктор химических наук, профессор Шпигун Олег Алексеевич концентрирования фенолов и других полярных соединений. Сведения о сорбции фенолкарбоновых кислот на ППУ и ССПС в литературе отсутствуют.

Не менее важен поиск новых подходов к определению фенолкарбоновых кислот после их сорбционного выделения. Весьма перспективно в этом плане сочетание группового сорбционного концентрирования с последующим определением индивидуальных соединений в элюате методом КЗЭ. В нашей стране появление работ такого типа в существенной степени инициируется созданием отечественных систем капиллярного электрофореза. Актуальной остается разработка простых, экспрессных и недорогих методов определения отдельных представителей этого класса соединений, основанная на сочетании сорбционного концентрирования с последующим определением кислот непосредственно в фазе сорбента с применением спектроскопии диффузного отражения (СДО).

Цель работы состояла в изучении сорбции ФК и их 4-нитрофенилазопроизводных и разработке методик сорбционного • концентрирования этих соединений для последующего определения в элюате методом КЗЭ или непосредственно в фазе сорбента с применением СДО и цветометрических сканер-технологий. Достижение поставленной цели предусматривало решение следующих задач:

• изучение особенностей сорбции фенолкарбоновых кислот на ППУ, ППУ, модифицированном триоктиламином (ТОА), и ССПС в зависимости от условий извлечения и природы сорбируемых соединеий, установление взаимосвязи между коэфиициентами распределения и гидрофобностью сорбатов;

• оптимизацию условий разделения и определения фенолкарбоновых кислот методом КЗЭ;

• изучение возможности сочетания группового концентрирования фенолкарбоновых кислот на ССПС с последующим определением индивидуальных соединений в элюате методом КЗЭ;

• изучение условий образования 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот и их сорбции на ППУ, сравнительное изучение спектрофотометрических характеристик этих соединений в водных растворах и фазе ППУ; • изучение возможности сочетания сорбционного концентрирования 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот с последующим определение методом СДО или цветометрических сканер-технологий. Научная новизна. Пенополиуретаны и сверхсшитый полистирол предложено использовать для сорбционного концентрирования ФК. Систематическое исследование сорбции ФК на этих сорбентах позволило выявить влияние гидрофобности на межфазное распределение ФК с их гидрофобностью (параметром Ханша). Выявлены основные факторы, определяющие закономерности электрофоретического разделения смесей ФК и парабенов - эфиров 4-гидроксибензойной кислоты. Реализовано сочетание сорбционного концентрирования ФК на ССПС с их определением в элюате методом КЗЭ. На основании изучения процессов образования 4-нитрофенилазопроизводных ФК, сорбции их на ППУ и спектральных характеристик сорбатов предложено использовать СДО для индивидуального определения ФК в фазе сорбента. Выявлена и обоснована возможность использования офисного сканера и компьютерных программ цифровой обработки изображений в качестве нового способа числовой оценки интенсивности окраски веществ, сорбированных на ППУ и автоматизированной оценки результатов анализа.

Практическая значимость работы. Разработана методика группового динамического концентрирования фенолкарбоновых кислот на микроколонке, заполненной ССПС, с последующим определением индивидуальных кислот в элюате методом КЗЭ.

Разработаны методики определения салициловой, 4-гидроксибензойной, галловой, ванилиновой и кофейной кислот с применением СДО. Методики апробированы при анализе модельных водных растворов, алкогольной продукции, речной воды и подкормке для растений. С применением портативного фотометра-рефлектометра «Унифот-Спектр 470» методики можно реализовать в тест-варианте.

Положения, выносимые на защиту:

1. Предложение использовать ППУ и ССПС для сорбционного концентрирования фенолкарбоновых кислот.

2. Результаты исследования и выявления особенности сорбции фенолкарбоноых кислот на ППУ, ППУ, модифицированном TOA, и ССПС.

3. Факторы, определяющие закономерности электрофоретического поведения фенолкарбоноых кислот и парабенов в варианте капиллярного зонного электрофореза.

4. Совокупность данных об условиях образования 4-нитрофенил-азопроизводных фенолкарбоноых кислот и сорбции их на ППУ.

5. Обоснование возможности использования офисного сканера в качестве аналитического прибора, пригодного для измерения цветометрических характеристик окрашенных соединений, сорбированных на ППУ.

6. Методики сорбционного конценрирования и определения фенолкарбоноых кислот методом КЗЭ, СДО и цветометрических сканер-технологий.

Апробация работы. Основные результаты доложены на Международной конференции студентов и аспирантов "Ломоносов-2001" (Москва, 2001), Международной научной конференции "Концентрирование в аналитической химии" (Астрахань, 2001), VIII Всероссийском симпозиуме по молекулярной жидкостной хроматографии и капиллярному электрофорезу (Москва, 2001), Всероссийском симпозиуме "Тест-методы химического анализа" (Москва, 2001), Всероссийской конференции «Актуальные проблемы аналитической химии», (Москва, 2002), European Conference on Analytical Chemistry "Euroanalysis-12" (Dortmund, Germany, 2002), Международном симпозиуме «Разделение и концентрирование в аналитической химии» (Краснодар, 2002), Международном форуме «Аналитика и аналитики» (Воронеж, 2003), V Всероссийской конференции с международным участием по анализу объектов окружающий среды «Экоаналитика-2003» (Санкт-Петербург, 2003), Всероссийском симпозиуме «Хроматография и хроматографические приборы» (Москва, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 статей, 12 тезисов докладов.

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР Глава 1. Методы концентрирования и определения фенолкарбоновых кислот

Фенолкарбоновые кислоты (ФК) - производные бензойной и коричной кислот - имеют широкое распространение в природе, как в виде простых и сложных эфиров, так и в свободной форме. Известно, что такие фенолкарбоновые кислоты, как галловая, феруловая и кофейная содержатся в различных лекарственных растениях и фармакологических препаратах. Они обладают антибактериальными, противогрибковыми, антиоксидантными свойствами, предотвращают мутации, проявляют свойства антираковых препаратов [1].

Многие напитки растительного происхождения, например чаи [2-4], соки [5-10], вина [11-16], коньяки [17-18], пиво [11, 19-20] содержат в своем составе различные фенолкарбоновые кислоты, которые отвечают за их вкусовые характеристики, цвет и аромат. Кроме того, некоторые ФК используют как вещества-маркеры для определения подлинности алкогольной продукции, т.к. ее фенольный состав индивидуален и зависит как от сорта и места происхождения винограда, так и способа приготовления и хранения вин и коньяков [17,21].

Известно, что, такие ФК как бензойная, и 4-гидроксибензойная кислоты и сложные эфиры 4-гидроксибензойной кислоты - парабены обладают ярко выраженным бактерицидным действием, эффективно тормозят рост микробов, особенно стафилококков, а так же действуют на дрожжевые грибы. Благодаря этим свойствам, и нетоксичности, эти соединения используют для консервирования ряда пищевых продуктов, косметических и лекарственных средств [22].

Отдельные представители ФК (сиреневая, феруловая, 4-гидроксибензойная, ванилиновая) были обнаружены в природных водах в качестве продуктов распада органического вещества, в частности лигнина [23 - 24]. Эти кислоты используются как индикаторы растворенной органической массы из донных отложений в геохимических исследованиях [25]. Кроме того, избыточное содержание производных лигнина в речной воде может указывать на ее загрязнение стоками целлюлозно-бумажных комбинатов [26].

Многие фенолкарбоновые кислоты являются промежуточными продуктами при синтезе красителей, фармацевтических препаратов, фотографических материалов, косметических средств. Так, например, галловую кислоту применяют в качестве дубильного вещества, при производстве красителей и лекарств, как цветообразующую компоненту в термочувствительных копировальных аппаратах, а сложные эфиры этой кислоты используют в пищевой промышленности в качестве антиоксидантов жиров и масел.

Таким образом, проблема определения фенолкарбоновых кислот в различных объектах (растениях и растительных вытяжках, алкогольной продукции, водах, древесине, лекарствах, пищевой и косметической продукции) -чрезвычайно актуальная задача аналитической химии, что подтверждает большое число публикаций, посвященных данной теме. Рассмотрим их более подробно.

В обзоре литературы рассмотрены публикации последних пяти лет с целью объективной оценки ситуации, сложившейся в настоящее время в этом научном направлении. Однако, при анализе литературы по некоторым направлениям охвачен и более длительный период.

Выводы

Исследована сорбция фенолкарбоновых кислот бензойного и коричного ряда на пенополиуретане, пенополиуретане, модифицированном триоктиламином, и сверхсшитом полистироле. Даны объяснения особенностей сорбции фенолкарбоновых кислот в зависимости от природы сорбента, кислотности раствора, природы и концентрации соединений. Предложены уравнения, связывающие коэффициенты распределения фенолкарбоновых кислот на ППУ с их гидрофобностью (параметром Ханша). Показано, что пенополиуретан, модифицированный триоктиламином, и сверхсшитый полистирол можно использовать для группового концентрирования фенолкарбоновых кислот. Исследовано влияние концентрации и рН буферного раствора, времени ввода пробы и величины рабочего напряжения на параметры разделения фенолкарбоновых кислот и парабенов методом капиллярного зонного электрофореза с использованием системы капиллярного электрофореза «Капель-105» производства фирмы «Люмэкс». Выбраны оптимальные условия разделения. Проведено разделение 10-компонентной смеси, включающей бензойную, салициловую, 4-гидроксибензойную, 2,4-дигидроксибензойную, 3,4-дигидроксибензойную, галловую, сиреневую, коричную, кофейную и феруловую кислоты (время анализа -15 мин), и 7-компонентной смеси, содержащей наряду с метил-, пропил-, изопропил- и бутилпарабеном такие консерванты, как бензойную, 4-гидроксибензойную и салициловую кислоты (время анализа - 10 мин).

Разработана методика группового динамического концентрирования фенолкарбоновых кислот на микроколонке, заполненной сверхсшитым полистиролом, с последующим определением индивидуальных соединений в элюате методом капиллярного зонного электрофореза с пределами обнаружения пх10"2мкг/мл. Методика применена для определения фенолкарбоновых кислот в образце вина.

Изучена реакция азосочетания фенолкарбоновых кислот с тетрафторборатом 4-нитрофенилдиазония. С целью повышения селективности определения предложено сорбировать на пенополиуретане 4-нитрофенилазопроизводные фенолкарбоновых кислот из кислых сред (0,01 М НС1). С применением спектроскопии диффузного отражения исследованы особенности спектральных характеристик 4-нитрофенилазопроизводных фенолкарбоновых кислот, сорбированных на пенополиуретане, по сравнению с их водными растворами в зависимости от концентрации сорбата и условий сорбции. Обоснована принципиальная возможность применения реакции азосочетания для разработки сорбционно-фотометрической и тест-методик определения салициловой, 4-гидроксибензойной, галловой, кофейной и ванилиновой кислот с пределами обнаружения 1, 0,03, 0,05, 0,1, 0,09 мкг/мл соответственно. Предложен новый способ оценки интенсивности окраски таблеток пенополиуретана с сорбированными 4-нитрофенилазопроизводными фенолкарбоновых кислот, который основан на применении офисного сканера и компьютерных программ обработки изображений. Установлено, что сканер-технологии пригодны для измерения цветовых характеристик (Я, в, В) пористых полиуретановых образцов. Градуировочная зависимость в координатах светлота - концентрация фенолкарбоновой кислоты описывается убывающей экспонентой первого порядка. Показано, что с помощью сканера и компьютерных программ обработки изображения можно определять салициловую, 4-гидроксибензойную, галловую и кофейную кислоту с такой же чувствительностью, как и с помощью спектроскопии диффузного отражения.

1. Peyrat-Maillard M.N., Bonnely S., Berset C. Determination of the antioxidant activity of phenolic compounds by coulometric detection. // Talanta. 2000. V. 51. P. 709-716.

2. Yoshida H., Ishikawa Т., Hosoai H., et al. Inhibitory effect of tea flavonoids on the ability of cells to oxidize low density lipoprotein. // Biochem. Pharm. 1999. V. 58. P.1695-1703.

3. Casella I.G., Gatta M. Determination of electroactive organic acids by anion-exchange chromatography using a copper modified electrode. // J. Chromatogr. A. 2001. V. 912. P. 223-233.

4. Arce L., Rios A., Valcarcel M. Determination of anti-carcinogenic polyphenols present in green tea using capillary electrophoresis coupled to a flow injection system. // J. Chromatogr. A. 1998. V. 827. P. 113-120.

5. Schieber A., Keller P., Carle R. Determination of phenolic acids and flavonoids of apple and pear by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. A. 2001. V. 910. P. 265-273.

6. Amakura Y., Okada M., Tsuji S., Tonogai Y. Determination of phenolic acids in fruit juices by isocratic column liguid chromatography. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 891. P. 183-188.

7. Shahrzad S., Bitsch I. Determination of some pharmacologically active phenolic acids in juices by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 741. P. 223-231.

8. Bruzzoniti M.C., Mentasti E., Sarzanini C. Divalent pairing ion for ion-interaction chromatography of sulphonates and carboxylates. // J. Chromatogr. A. 1997. V. 770. P. 51-57.

9. Chen H., Zuo Y., Deng Y. Separation and determination of flavonoids and other phenolic compounds in cranberry juice by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. A. 2001. V. 913. P. 387-395.

10. Shui G., Leong L.P. Separation and determination of organic acids and phenolic compounds in fruit juices and drinks by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. A. 2002. V. 977. P. 89-96.

11. Buiarelli F., Cartoni G., Coccioli F., Levetsovitou Z. Determination of phenolic acids in wine by high-performance liquid chromatography with a microbore column. // J. Chromatogr. A. 1995. V. 695. P. 229-235.

12. Castellari M., Sartini E., Fabiani A., Arfelli G., Amati A. Analysis of wine phenolic by high-performance liquid chromatography using a monolithic type column. // J. Chromatogr. A. 2002. V. 973. P. 221-227.

13. Barroso C. G., Torrijos R. C., Perez-Bustamante J.A. HPLC Separation of Benzoic and Hydroxycinnamic Acids in Wines. // Chromatographia. 1983. V. 17. № 5. P. 249-252.

14. Cartoni G., Coccioli F., Jasionowska R. Capillary electrophoretic separation of phenolic acids. //J. Chromatogr. A. 1995. V. 709. P. 209-214.

15. Pazourek J., Gonzalez G., Revilla A.L., Havel J. Separation of polyphenols in Canary Islands wine by capillary zone electrophoresis without preconcentration. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 874. P. 111-119.

16. Шведене H.B., Бельченко H.H., Старушко H.B., Баулин В.Е., Плетнев И.В. Жидкостные мембранные электроды на основе азасоединений для определения органических анионов. // Вестн. Моск. Ун-та. 1998. Т. 39. № 6. С. 383-389.

17. Савчук С.А., Власов В.Н., Апполонова С.А., Арбузов В.Н., Веденин А.Н., Мезинов А.Б., Григорьян Б.Р. Применение хроматографии и спектрометрии для идентификации подлинности спиртных напитков. // Журн. аналит. химии. 2001. Т. 56. №3. С. 246-264.

18. Moane S., Park S., Lunte C.E., Smyth M.R. Detection of phenolic acids in beverages by capillary electrophoresis with electrochemical detection. // Analyst. 1998. V. 123. P. 1931-1936.

19. Sanchez F.G., Dias A.N., Lovillo J., Feria L.S. a-Cyclodextrin as a restricted access mobile phase for reversed-phase liquid chromatography with fluorimetric detection of phenolic compounds. //Anal. Chim. Acta. 1996. V. 328. P. 73-79.

20. Tinttunen S., Lahtonen P. Distinguishing organic wines from normal wines on the basis of concentrations of phenolic compounds and spectral data. // Eur. Food. Res. Technol. 2001. V. 212. P.390-394.

21. Костюковский Я. JI., Меламед Д.Б. Методы определения химических консервантов и антиоксидантов в пищевых продуктах. // Журн. аналит. химии. 1989. Т. 64. № 1.С. 5-44.

22. Lobbes J.M., Fitznar Н.Р., Kattner G. High-performance liquid chromatography of lignin-derived phenols in environmental samples with diode array detection. // Anal. Chem. 1999. V. 71. P. 3008-3012.

23. Deng Y., Fan X., Delgado A., Nolan C., Furton K., Zuo Y., Jones R.D. Separation and determination of aromatic acids in natural water with preconcentration by capillary zone electrophoresis. // J. Chromatogr. A. 1998. V. 817. P. 145-152.

24. Susie M., Alongi D.M. Determination of terrestrial markers in marine environments by gas chromatography-mass-selective detection compared to high-performance liquid chromatography-fluorescence detection. // J. Chromatogr. A. 1997. V. 758. P. 243-254.

25. Volgger D., Zemann A., Bonn G. Determination of phenols, inorganic anions, and carboxylic acids in Kraft black liquors by capillary electrophoresis. // J. High Resolut. Chromatogr. 1998. V. 21. № 1. P. 3-10.

26. Katona Zs. F., Sass P., Molnar-Perl I. Simultaneous determination of sugars, sugar alcohols, acids and amino acids in apricots by gas chromatography-mass spectrometry. // J. Chromatogr. A. 1999. V. 847. P. 97-102.

27. Fiehn O., Kopka J., Trethewey R.N., Willmitzer L. Identification of uncommon plant metabolites based on calculation of elemental compositions using gaschromatography and quadrupole mass spectrometry. // Anal. Chem. 2000. V. 72. P. 3573-3580.

28. Mejanelle P., Bleton J., Goursaud S., Tchapla A. Identification of phenolic acids and inositols in balms and tissues from an Egyptian mummy. // J. Chromatogr. A. 1997. V. 767. P. 177-186.

29. Gioacchini A.M., Roda A., Galletti G.C., Bocchini P., Manetta A.C., Baraldini M. High-performance liquid chromatographic-electrospray mass spectrometric analysis of phenolic acids and aldehydes. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 730. P. 31-37.

30. Escarpa A., Morales M.D., Gonzalez M.C. Analytical performance of commercially available and unavailable phenolic compounds using real samples by highperformance liquid chromatography-diode-array detection. // Anal. Chim. Acta. 2002. V. 460. P. 61-72.

31. Chapuis-Lardy L., Contour-Ansel D., Barnhard-Reversat F. High-performance liquid chromatography of water-soluble phenolics in leaf litter of three Eucalyptus hybrids (Congo). //Plant Sci. 2002. V. 16. P. 217-222.

32. Zuo Y., Chen H., Deng Y. Simulteneous determination of catechins, caffeine and gallic acids in green, Oolong, black and pu-erh teas using HPLC with photodiode array detector. // Talanta. 2002. V. 57. P. 307-316.

33. Bronze M.R., Boas L.F.V., Belchior A.P. Analysis of old brandy and oak extracts by capillary electrophoresis. // J. Chromatogr. A. 1997. V. 768. P. 143-152.

34. Guillen D.A., Barroso C.G., Perez-Bustamante J.A. Selection of column and gradient for the separation of polyphenols in sherry wine by high-performance liquid chromatography incorporating internal standards. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 724. 117-124.

35. Maman O., Mrseille F., Guillet B., Disnar J.-R., Morin P. Separation of phenolic aldehydes, ketones and acids from lignin degradation by capillary zone electrophoresis. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 755. P. 89-97.

36. Shahrzad S., Bitsch I. Determination of gallic acid in human plasma and urine by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. B. 1998. V. 705. P. 8795.

37. Tian G., Zhang T., Yang F., Ito Y. Separation of gallic acid from Cornus officinalis Sieb. et Zucc by high-speed counter-current chromatography. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 886. P. 309-312.

38. Durust N., Bozan B., Ozden S., Durust Y., Baser K.H.C. The quantitative determination of some phenolic acids in Delphinium Formosum by HPLC. // Anal. Lett. 1999. V. 32. № 14. P. 2841-2849.

39. Pomponio R., Gotti R., Hudaib M., Cavrini V. Analysis of phenolic acids by micellar electrokinetic chromatography: application to Echinacea purpurea plant extracts. // J. Chromatogr. A. 2002. V. 945. P. 239-247.

40. Pirola R., Bareggi S.R., De Benedittis. Determination of acetylsalicylic acid and salicylic acid in skin and plasma by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. B. 1998. V. 705. P. 309-315.

41. Chilla C., Guillen D.A., Barroso C.G., Perez-Bustamante J.A. Automated on-line solid-phase extraction-high-performance liquid chromatography -diode array detection of phenolic compounds in sherry wine. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 750. 209-214.

42. Watanabe T., Yamamoto A., Nagai S., Terabe S. Simultaneous analysis of tyrosol, tryptophol and ferulic acid in commercial sake samples by micellar electrokinetic chromatography. //J. Chromatogr. A. 1998. V. 825. P. 102-106.

43. Rodriguez-Delgado M.A., Malovana S., Perez J.P., Borges T., Montelongo F.J.G. Separation of phenolic compounds by high-performance liguid chromatography with absorbance and fluorimetric detection. // J. Chromatogr. A. 2001. V. 912. P. 249-257.

44. Glowniak K., Zgorka G., Kozyra M. Solid-phase extraction and reversed-phase high-performance liquid chromatography of free phenolic acids in some Echinacea species. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 730. P. 25-29.

45. Ziakova A., Brandsteterova E., Blahova E. Matrix solid-phase dispersion for the liquid chromatographic determination of phenolic acids in Melissa officinalis. // J. Chromatogr. A. 2003. V. 983. P. 271-275.

46. Bahre F., Maier H.G. Electrophoretic clean-up of organic acids from coffee for the GC/MS analysis. //Fresenius J. Anal. Chem. 1996. V. 355. P. 190-193.

47. Chu T.-Y., Chang C.-H., Liao Y.-C., Chen Y.-C. Microwave-accelerated derivatization process for the determination of phenolic acids by gas chromatography-mass spectrometry. // Talanta. 2001. V. 54. P. 1163-1171.

48. Perez-Coello M.S., Sanz J., Cabezudo M.D. Gas chromatographic-,ass spectrometric analysis of volatile compounds in oak wood used for aging of wines and spirits. // Chromatographia. 1998. V. 47. № 7-8. P. 427-432.

49. Gimenez R., Villalon M., Lopez H., Navarro M., Cabrera C., Olalla M., Quesada J.J., Lopez M.C. Determination of gallic acid in commercial brandies using high performance liquid chromatography. // Cienc. Tecnol. Aliment. 2000. V. 3. № 1. P. 13-20.

50. Uang Y.-S., Kang F.-L., Hsu K.-Y. Determination of caffeic acid in rabbit plasma by high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. A. 1995. V. 673. P. 43-49.

51. Perez J.L., Bello M.A. Determination of paracetamol in dosage forms by non-suppressed ion chromatography. // Talanta. 1999. V. 48. P. 1199-1202.

52. Chen Z. L., Adams M.A. Simultaneous determination of aliphatic and aromatic acids in plant tissue extracts by ion-exclusion chromatography. // Anal. Chim. Acta. 1999. V. 386. P. 249-256.

53. Ryan D., Robards K., Lavee S. Determination of phenolic compounds in olives by reversed-phase chromatography and mass spectrometry. // J. Chromatogr. A. 1999. V. 832. P. 87-96.

54. Suarez B., Picinelli A., Mangas J.J. Solid-phase extraction and high-performance liquid chromatographic determination of polyphenols in apple musts and ciders. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 727. P. 203-209.

55. Swatsiang P., Tucker G., Robards K., Jardine D. Isolation and identification of phenolic compounds in Citrus sinensis. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 417. P. 231240.

56. Goss. J.D. Improved liquid chromatography of salicylic acid and some related compounds on a phenyl column. // J. Chromatogr. A. 1998. V. 828. P. 267-271.

57. Cappiello A., Famiglini G., Mangani F., Careri M., Lombardi P., Mucchino C. Liquid chromatographic-mass spectrometric determination of phenolic compoundsusing a capillary-scale particle beam interface. // J. Chromatogr. A. 1999. V. 855. P. 515-527.

58. Goto T., Yoshida Y., Kiso M., Nagashima H. Simultaneous analysis of individual catechincs and caffeine in green tea. // J. Chromatogr. A. 1996. V. 749. P. 295-299.

59. Hsieh M.-M., Chang H.-T. Dynamic control for ultra-fast separations of organic acids in capillary zone electrophoresis. A new direction to improve resolution. // J. Chromatogr. A. 1998. V. 817. P. 129-137.

60. Goto Y., Makino K., Kataoka Y., Shuto H., Oishi R. determination of salicylic acid in human serum with capillary zone electrophoresis. // J. Chromatogr. B. 1998. V. 706. P. 329-335.

61. Esaka Y., Goto M., Haraguchi H., Ikeda T., Kano K. Hydrogen-bonding interaction in capillary electrophoresis using polyether matrices. // J. Chromatogr. A. 1995. V. 711. P. 305-311.

62. Liu Y., Pietrzyk D.J. Separation of weak organic acids and bases by capillary zone electrophoresis in a sulfonated-polymer wall-modified open tubular fused-silica capillary. // J. Chromatogr. A. 1998. V. 804. P. 337-348.

63. Hsieh M.-M., Chang H.-T. Dynamic control for the separation of organic acids in capillary electrophoresis. // J. Chromatogr. A. 1998. V. 793. P. 145-152.

64. Tjornelund J., Bazzanella A., Lochmann H., Bachmann K. Coelectroosmotic separations of anions in non-aqueous capillary electrophoresis. // J. Chromatogr. A. 1998. V. 811. P. 211-217.

65. Sadecka J., Polonsky J. Electrophoretic methods in the analysis of beverages. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 880. P. 243-279.

66. Hu Z., Jia L., Zhang Z. Separation of hydroxybenzoic acid isomers by capillary zone electrophoresis. // Anal. Lett. 1996. V. 29. № 14. P. 2573-2586.

67. Boonkerd S., Lauwers M., Detaevernier M.R., Michotte Y. Separation and simultaneous determination of the components in an analgesic tablet formulation by micellar electrokinetic chromatography. // J. Chromatogr. A. 1995. V. 695. P. 97102.

68. Klampfl C.W., Buchberger W., Haddad P.R. Determination of organic acids in food samples by capillary zone electrophoresis. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 881. P. 357-364.

69. Zhao Y., Lunte C.E. pH-Mediated field amplification on-column preconcentration of anions in physiological samples for capillary electrophoresis. // Anal. Chem. 1999. V. 71. P. 3985-3991.

70. Summanen J., Vuorela H., Hiltunen R., Siren H., Riekkola M. Determination of phenolic antioxidants by capillary electrophoresis with ultraviolet detection. // J. Chromatogr. Sci. 1995. V. 33. № 12. P. 704-711. Chem. Abstr. 1995. V.124. № 7312.

71. Шведене H.B., Бельченко H.H., Старушко H.B., Щербакова М.М., Томилова Л.Г., Плетнев И.В. Салицилат-селективные мембранные электроды на основе металлофталоцианинов. //Вестн. Моск. Ун-та. 1999. Т. 40. № 3. С. 160-164.

72. Назарова И.А. Использование гидрофобных производных борной кислоты для Ф связывания и ионометрического определения полигидроксисоединений. Дисс.канд. хим. наук. МГУ. Москва. 2002.

73. Katsu Т., Mori Y. Ion-selective electrode for salicylate assay in blood serum. // Talanta. 1996. V. 43. P. 755-759.

74. Junior L.R., Neto G.O., Fernandes J.R., Kubota L.T. Determination of salicylate in blood serum using an amperometric biosensor based on salicylate hydroxylase immobilized in a polypyrrole-glutaraldehyde matrix. // Talanta. 200. V. 51. P. 547557.

75. Kubota L.T., Fernandes J.C.B., Jr L.R., Neto G.O. Determination of acetylsalicylic acid by FIA-potentiometric system in drugs after on-line hydrolysis. // Talanta. 1999. V. 50. P. 661-667.

76. Hamano Т., Mitsuhashi Y., Aoki N., Semma M., Ito Y. Enzymic method for the spectrophotometric determination of benzoic acid in soy sauce and pickles. // Analyst. 1997. V. 122. P. 259-262.

77. Jimenez-Prieto R., Silva M., Perez-Bendito D. Determination of gallic acid by an oscillating chemical reaction using the analyte pulse perturbation technique. // Anal. Chim. Acta. 1996. V. 321. P. 53-60.

78. Han H.-Y., He Z.-K., Zeng Y.-E. Pulse injection analysis with chemiluminescence detection: determination of cinnamic acid using the Ru(bipy)32+ -KMn04 system. // Anal. Chim. Acta. 1999. V. 402. P. 113-118.

79. Aguilar-Caballos M.P., Gomez-Hens A., Perez-Bendito D. Simultaneous determination of benzoic acid and saccharin in soft drinks by using lanthanide-sensitized luminescence. //Analyst. 1999. V. 124. P. 1079-1084.

80. Esteves da Silva J.C.G., Machado A.S.C. Self-modelling Curve resolution Analysis of synchronous Fluorescence Spectroscopy Data for Characterization of Acid Mixtures and Study of Acid-Case Equilibria. // Analyst. 1995. № 10. V 120. P. 1553-2560.

81. Коренман И.М. Фотометрический анализ. Методы определения органических соединений. М.: Химия, 1970. 339 с.

82. Braun Т., Navratil J.D., Farag А.В. Polyurethane foam sorbents in separation science. Boca Raton: CRS Press., 1985. 220 p.

83. Braun T. Trends in using resilient polyurethane foams as sorbent in analytical chemistry. // Fr. Z. Anal. Chem. 1983. Bd. 314. № 7. S. 652-656.

84. Braun Т., Farag A.B. Polyurethane foams and microspheres in analytical chemistry. // Anal. Chim. Acta. 1978. V. 99. № 1. P. 1-36.

85. Braun Т. Quasi-spherical solid polymer membranes in separation chemistry: polyurethane foams as sorbent. Recent advances. // Fr. Z. Anal. Chem. 1989. Bd. 333. № 7. P. 785-792.

86. Дмитриенко С.Г., Золотов Ю.А. Пенополиуретаны в химическом анализе: сорбция различных веществ и ее аналитическое применение. // Успехи химии. 2002. Т. 71. №2. С. 180-197.

87. Gesser H.D., Chow А., Davis F.C. et al. The extraction and recovery of polychlorinated biphenyls (PCB) using porous polyurethane foam. // Anal. Lett. 1971. V. 4. № 12. P. 883-886.

88. Simon C.G., Bidleman T.F. Sampling airbotne polychlorinated biphenyls with polyurethane foam. Chromatographie approach to determining retention efficiencies. // Anal. Chem. 1979. V. 51. № 8. P. 1110-1113.

89. Musty P.R., Nickless G. The extraction and recovery of chlorinated insecticides and polychlorinated biphenyls from water using porous polyurethane foams. // J. Chromatogr. 1974. V. 100. № 1. P. 83-89.

90. Farag A.B., El-Wakil A.M., El-Shahawi M.S., Mashaly M. Extraction and recovery of some organic insecticides on polyurethane foam columns. // Anal. Sei. 1989. V. 5. №4. P. 415-417.

91. El-Shahawi M.S., Aldhaheri S.M. Preconcentration and separation of acaricides by polyether based polyurethane foam. // Anal. Chim. Acta. 1996. V. 320. № 2-3. P. 277-287.

92. Lutz M., Burestedt E., Emneus J. et al. Effects of different additives on a tyrosinase based carbon paste electrode. // Anal. Chim. Acta. 1995. V. 305. № 1-3. P. 8-17.

93. El-Shahawi M.S., Kiwan A.M., Aldhaheri S.M., Saleh M.H. The retention behavior and separation of some water-soluble organophosphorius insecticides on polyester-based polyurethane foams. // Talanta. 1995. V. 42. № 10. P. 1471-1478.

94. Saxena J., Kozuchowski J., Basu D.K. Monitoring of polynuclear aromatic hydrocarbons in water. I. Extraction and recovery of benzo(a)pyrene with porous polyurethane foam. // Environ. Sei. Technol. 1977. V. 11. P. 682-685.

95. Basu D.K. Saxena J. Monitoring of polynuclear aromatic hydrocarbons in water. I. Extraction and recovery of six representative compounds with polyurethane foam. '//Environ. Sci. Technol. 1978. V. 12. P. 791-794.

96. Basu D.K. Saxena J. Polynuclear aromatic hydrocarbons in selected U.S. drinking water and their raw water sources. // Environ. Sci. Technol. 1978. V. 12. P. 795799.

97. Hawthorne S.B., Krieger M.S., Miller D.J. Supercritical carbon dioxide extraction of polychlorinated biphenyls, polycyclic aromatic hedrocarbons, and n-alkanes from polyurethane foam sorbents. // Anal. Chem. 1989. V. 61. № 7. P. 736-740.

98. Keller C.D., Bidleman T.F. Collection of airborne polycyclic aromatic hydrocarbons and other organic with a glass-fiber filter-polyurethane foam system. //AtmosphericEnviron. 1984. V. 18. №4. P. 837-845.

99. De'raat W.K., Schulting F.L., Burghadt E., De Meijere F.A. Application of polyurethane foam for sampling volatile mutagents from ambient air. // Science Total Environ. 1987. V. 63. P. 175-189.

100. Schumack L., Chow A. Extraction of aromatic organic compounds by polyurethane foam. // Talanta. 1987. V. 34. № 11. P. 957-962.

101. Chow A., Branagh W., Chance J. Sorption of organic dyes by polyurethane foam. // Talanta. 1990. V. 37. № 4. P. 407-412.

102. Fong P., Chow A. Extraction of aromatic acid and phenols by polyurethane foam. // Talanta. 1992. V. 39. № 5. P. 497-503.

103. Дмитриенко С.Г., Косырева O.A., Плетнев И.В., Окина О.И. Сорбция фенолов пенополиуретанами. // Журн. физ. химии. 1992. Т. 66. С. 1421-1428.

104. ИЗ. Rzeszutek К., Chow A. Extraction of phenols using polyurethane membrane. '// Talanta. 1998. V. 46. № 4. P. 507-519.

105. Dmitrienko S.G., Myshak E.N., Pyatkova L.N. An empirical relationship between distribution coefficients of phenols by polyurethane foams and their octanol-water distribution constants and pKa values. // Talanta. 1999. V. 49. P. 309-315.

106. Dmitrienko S.G., Gurariy E. Ya., Nosov R.E., Zolotov YuA. Estimation of the polyurethane foam hydrophobicity. // Anal. Lett. 2001. V. 34. P. 425-438.

107. Дмитриенко С.Г., Логинова Е.В., Мышак Е.Н., Рунов В.К. Сорбция родаминовых красителей пенополиуретанами. // Журн. физ. химии. 1994. Т. 68. № 7. С. 1295-1299.

108. Дмитриенко С.Г., Логинова Е.В., Мышак Е.Н., Рунов В.К. Сорбция акридинового желтого пенополиуретанами. // Журн. физ. химии. 1997. Т. 71. №2. С. 317-325.

109. Dmitrienko S.G., Pyatkova L.N., Myshak E.N., Runov V.K. Sorption of sodium dodesylsulfate and cetyltrimetylammonium bromide on polyurethane foams. // Mendeleev Commun. 1996. C. 137-139.

110. Дмитриенко С.Г., Пяткова Л.Н., Малиновская H.B., Рунов В.К. Сорбция сульфофталеиновых красителей пенополиуретанами. // Журн. физ. химии. 1997. Т. 71. №4. С. 709-716.

111. Dmitrienko S.G., Myshak E.N., Runov V.K., Zolotov Yu.A. Sorption-photometric determination of phenols with polyurethane foams. // Chem. Anal. 1995. V. 40. P. 291-298.

112. Дмитриенко С.Г. Пенополиуретаны в химическом анализе: сорбция различных веществ и ее аналитическое применение. Дис. . д-ра хим. наук. МГУ. Москва. 2001.

113. El-Shahawi. Retention and separation of some organic water pollutants with unloaded and tri-n-octylamine loaded polyester-based polyurethane foams. // Talanta. 1994. V. 41. № 9. P. 1481-1488.

114. Белякова Л.Д., Василевская O.B., Цурюпа М.П., Даванков В.А. Адсорбционные и хроматографические свойства микросферических полимерных сорбентов типа «Стиросорб». // Журн. физической химии. 1996. Т. 70. №8. С. 1476-1482.

115. Даванков В.А., Волынская А.В., Цурюпа М.П. Сорбционные свойства макросетчатых изопористых полимеров стирола типа «Стиросорб». // Высокомол. Соед. Серия Б. 1980. Т. 22. № 10. С. 746-748.

116. Tsyurupa M.P., Maslova L.A., Andreeva A.I., Mrachkovskaya T.A., Davankov V.A. Sorption of organic compounds from aqueous media by hypercrosslinked polysterene sorbents "Styrosorb". // React. Polym. 1995. V. 25. P. 69-78.

117. Streat M., Sweetland L.A., Horner D.J. Removal of pesticides from water using hypercrosslinked polymer phases: part 3 mini-column studies and the effect of fulvic and humic substances. // Process Saf. Environ. Prot. 1998. V. 76. Part B. P. 135-141.

118. Хрящевский A.B., Подловченко M.B., Нестеренко П.Н., Шпигун О.А. Применение сверхшитого микросетчатого полистирола для концентрирования фенолов. // Вестн. МГУ. Сер. 2. Химия. 1998. Т. 39. № 3. С. 196-204.

119. Цурюпа М.П., Ходченко Е.Л., Даванков В.А. Сорбция лецитина на сверхсшитом полистирольном сорбенте. // Коллоид. Журн. 1983. Т. 45. № 5. С. 1016-1024.

120. Хрящевский А.В. Сорбционное концентрирование первичных длинноцепочечных алифатических аминов и фенолов и их определение методом обращенно-фазовой высокоэффективной хроматографии. Дисс. . канд. хим. наук. МГУ. Москва. 1997.

121. Penner N.A., Nesterenko P.N., Ilyin М.М., Tsyurupa M.P., Davankov V.A. Investigation of properties of hypercrosslinked polystyrene as stationary phase for high performance liquid chromatography. // Chromatographia. 1999. V. 50. № 9/10. P.611-623.

122. Streat M., Sweetland L.A. Removal of pesticides from water using hypercrosslinked polymer phases: part 1 physical and chemical characterization of adsorbents. // Process Saf. Environ. Prot. 1998. V. 76. Part В. P. 115-126.

123. Penner N.A., Nesterenko P.N. Anion-exchange ability of neutral hydrophobic hypercrosslinked polystyrene. // Anal. Commun. 1999. V. 36. № 5. P. 199-210.

124. Пеннер H.A., Нестеренко П.Н., Рыбалко M.A. Высокоэффективная жидкостная хроматография комплексов металлов с тетра-4-трет-бутилфталоцианином. // Журн. аналит. химии. 2001. т. 56. № 10. С. 1067-1074.

125. Penner N.A., Nesterenko P.N., Khryashchevskii A.V. et all. A novel stationary phase for the high performance liquid chromatographic separation and determination of phenols. // Mendeleev Commun. 1998. № 1. P. 24-27.

126. Penner N.A., Nesterenko P.N. Simultaneous determination of dihydroxybenzenes, aminophenols and phenylenediamines in hair dyes by high-performance liquid chromatography on hypercross-linked polystyrene. // Analyst. 2000. V. 125. P. 1249-1259.

127. Hjertn S. Free zone electrophoresis. // Chromatogr. Rev. 1967. V. 9. P. 122-141.

128. Vitranen R. Zone electrophoresis in a narrow-bore tube employing potentiometric detection. //Acta politech. Scand. Chem. 1974. V. 123. P. 1-16.

129. Jorgenson J.W., Lukacs K.D. High-resolution separations based on electrophoresis and electroosmosis. //J. Chromatgr. 1981. V. 218. P. 209-214.

130. Issaq H.J. A decade of capillary electrophoresis. // Electrophoresis. 2000. V. 21. P. 1921-1939.

131. Chapman J., Hobbs J. Putting capillary electrophoresis to work. // LC-GC. 1999. V. 17. P. 266-279.

132. Beale S.C. Capillary electrophoresis. // Anal. Chem. 1998. V. 70. P. 279R-300R.

133. Steiner F., Hassel M. Nonaqueous CE: a versatile completion of electrophoretic separation techniques. //Electrophoresis. 2000. V. 21. P. 3994^016.

134. Landers J.P. (Ed.) Handbook of capillary electrophoresis. CRC Press, Boca Raton, 1993,649 р.

135. Система капиллярного электрофореза. Основы метода. Аппаратура. Примеры использования систем капиллярного электрофореза «Капель—103, 104, - 105» / коллектив авторов, составитель Н.В. Комарова. СПб: «Издательство «Петрополис», 2001. 65 с.

136. Духин С.С., Дерягин Б.В. Электрофорез. М.: Наука, 1976. 328 с.

137. Vesterberg О. History of electrophoretic methods. // J. Chromatogr. 1989. V. 480. P 3-19.

138. Беленький Б.Г. Капиллярные электросепарационные методы-новая эра в анализе многокомпонентных проб. // Научное приборостроение. 1992. № 1. С. 3-36.

139. Heiger D. High performance capillary electrophoresis. / Agilent Technologies. 2000. PN 5968-9963E. 135 p.

140. Huang X., Coleman W.F., Zare R.N. Analysis of factors causing peak broadening in capillary electrophoresis. // J. Chromatogr. 1989. V. 480. P. 95-110.

141. Москвин JI.H., Царицына Л.Г. Методы разделения и концентрирования в аналитической химии. JL: Химия, 1991. 256 с.

142. Craston D.H., Saeed М. Analysis of carboxylic and related acids in the environment by capillary electrophoretic techniques. // J. Chromatogr. 1998. V. 827. P. 1-12.

143. Garrison A.W., Schmitt P., Kettrup A. Separation of phenoxy acids herbicides and their enantiomers by HPCE. // J. Chromatogr. 1994. V. 688. P. 317-327.

144. Swedberg S.A. Use of non-ionic and zwitterionic surfactactance to enhance selectivity in high performance capillary electrophoresis. An apparent miccellar electrokinetic capillary chromatography mechanism. // J. Chromatogr. 1990. V. 503. P. 449^152.

145. Terabe S., Otsuka K., Ichikava K., Tsuchiya A., Ando T. Electrokinetic separations with micellar solutions and open-tubular capillaries. // Anal. Chem. 1984. V. 56. P 111-113.

146. Terabe S., Otsuka К., Ano T. Band broadening in electrokinetic chromatography with micellar solutions in open-tubular capillaries. // Anal. Chem. 1989. V. 61. P. 251-260.

147. Terabe S. Electrokinetic chromatography: an interface between electrophoresis and chromatography. //Trends Anal. Chem. 1989. V. 8. P. 129-134.

148. Tivesten A., Folestad S. Separation of precolumn-labelled D- and L-aminoacids by MEKC with UV and fluorescence detection. // J. Chromatogr. 1995. V. 708. P. 323337.

149. Kuhn R., Stoecklin F., Erni F. Chiral separations by host guest complexation with cyclodextrin and crown ether in capillary zone electrophoresis. // Chromatographia. 1992. V. 33. P. 32-36.

150. Sarmini K., Kendler E. Influence of organic solvents on the separation selectivity in capillary electrophoresis. // J. Chromatogr. 1997. V. 792. P. 3-11.

151. Kaizuta S., Saitoh K.J. Control pf separation selectivity in micellar electrokinetic chromatography by modification of the micellar phase with solubilized organic compounds (Review). // J. Chromatogr. A. 1997. V. 780. P. 165-178.

152. Masseter M., Zemann A.J. Influence of organic Solvents in Coelectroosmotic Capillary Electrophoresis of Phenols. // Anal. Chem. 1995. V. 67. № 6. P. 10471053.

153. Takeda S., Wakilda S., Yamana M., Kamahara A., Higashi K. Migration Behavior of Phtalate esters in Micellar Electrokinetic Chromatography. // Anal. Chem. 1993. V. 65. P. 2489-2492.

154. Jimidar M., Hamoir T.P., Fories A., Massart D.L. Comparison of CZE with HPLC for the determination of additives in foodstuffs. // J. Chromatogr. 1993. V. 636. P. 179-186.

155. Руководство по капиллярному электрофорезу. / Под. ред. A.M. Волощука. М.: ЦНИИТЭИ Тракторсельхозмаш, 1998. 231 с.

156. Wang S.-P., Chang C.-L. Determination of parabens in cosmetic products by supercritical fluid extraction and capillary zone electrophoresis. // Anal. Chim. Acta. 1998. V. 377. P. 85-93.

157. Mahuzier P.-E., Altria K.D., Clark B.J. Selective and quantitative analysis of 4-hydroxybenzoate preservatives by microemulsion electrokinetic chromatography. // J. Chromatogr. A. 2001. V. 624. P. 465-^70.

158. Baalbaki В., Blanchin M.-D., Fabre H. Validation of micellar electrokinetic capillary chromatography method for the determination of imidurea, methyl and propylparabens in a pharmaceutical ointment. // Anal. Chim. Acta. 2002. V. 463. P. 15-20.

159. Driouich R., Takayanagi T., Oshima M., Motomizu S. Separation and determination of haloperidol, parabens and some of their degradation products by micellar electrokinetic chromatography. // J. Chromatogr. A. 2000. V. 903. P. 271- 278.

160. Kuo K.-L., Hsieh Y.-Z. Determination of preservatives in food products by cyclodextrin-modified capillary electrophoresis with multiwavelength detection. // J. Chromatogr. A. 1997. V. 768. P. 334-341.

161. Дмитриенко С.Г., Логинова Е.В., Мышак Е.Н., Рунов В.К. Сорбция родаминовых красителей пенополиуретанами. // Журн. физ. химии. 1994. Т. 68. №7. С. 1295-1297.

162. Мышак Е.Н. Сорбция фенолов, их нитрофенилазопроизводных на пенополиуретанах и ее аналитическое применение. Дисс. . канд. хим. наук. МГУ. Москва. 1997.

163. Саввин С.Б., Чернова Р.К., Штыков С.Н. Поверхностно-активные вещества. М.: Наука, 1991.250 с.

164. Джадц Д., Вышецки Г. Цвет в науке и технике М.: Мир. 1978. 592 с.

165. Шлифт Г.Ю. Цифровая обработка изображений. М.: Эком. 1997. 339 с.

166. Иванов В.М., Кузнецова О.В. Химическая цветометрия: возможности метода, области применения и перспективы. // Успехи химии. 2001. Т. 70. № 5. С. 411.