Синтез стероидных [17,16-d]пиразолов и пиразолинов, потенциальных биорегуляторов направленного действия тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

УЧРЕЖДЕНИЕ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н. Д. ЗЕЛИНСКОГО РАН

На правах рукописи

Черткова Виктория Валерьевна

Синтез стероидных [17,16-с1]пиразолов и пиразолинов, потенциальных биорегуляторов направленного

действия.

Специальность 02.00.03 — органическая химия

Автореферат

Диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

О

□□3482771

Москва-2009

003482771

Работа выполнена в группе химии стероидов и оксилипинов Учреждения Российской академии наук Институт органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН.

Научные консультант:

Доктор химических наук, профессор A.B. Камерницкий Научный руководитель:

Доктор химических наук, вед. науч. сотр. И.В. Заварзин

Официальные оппоненты:

Доктор химических наук, профессор В.Г. Граник

Доктор химических наук, профессор В.Г. Ненайденко

Ведущая организация: Учреждение Российской академии наук Институт

органической химии Уфимского научного центра РАН.

Защита состоится «01» декабря 2009г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 002.222.01 при Учреждении Российской академии наук Институт органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН по адресу: 119991, Москва, Ленинский проспект, 47.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИОХ РАН.

Автореферат разослан «01» ноября 2009г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор химических наук

Л.А. Родиновская

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время широко проводятся исследования по разработке методов синтеза и изучению биологической активности стероидов, конденсированных по 16,17-положениям с разнообразными гетероциклами. Интерес к аналогам стероидных гормонов, конденсированных в 16,17-положениях с азотистыми гетероциклами, вызван не только тем, что эти соединения применяются в клинической практике, но и возможностью изучения влияния пространственной структуры стероидной молекулы на биологические свойства. Однако замещенные 16,17-гетероциклические стероиды, у которых боковая цепь при С17 включена в гетероциклический фрагмент, практически не известны, т.к. методы синтеза стероидных гегероциклов, описанные в литературе до начала наших исследований, имеют существенные ограничения и не позволяют получать соединения, несущие сложные заместители в гетероцикле.

Весьма немногочисленные известные представители этого ряда обладают сочетанием свойств, нехарактерных для нативных гормонов - не проявляя гормонального действия, такого, например, как подавление иммунитета, они в то же время обладают противоспалительным действием, высокой антимикробной активностью, нормализуют давление и уменьшают уровень холестерина. Установлено, что для проявления такого действия необходимо наличие заместителя (чаще всего ацильного) у атома азота гетероцикла, сопряженного в 16,17-положениях со стероидным скелетом.

Необходимость развития химии этих соединений не вызывает сомнения. Это побудило нас обратиться к синтезу неизвестных ранее стероидных [17,16-с1]пиразолинов и пиразолов. Особый интерес при этом могут представлять [17,16-(1]гетероциклостероиды, полученные на основе тиогидразидов оксаминовых кислот. Можно было предположить, что объединение в одной молекуле тиогидразидов оксаминовых кислот и хирального стероидного скелета открывает широкие синтетические возможности для получения системных наборов гетероциклостероидов, которые, возможно будут обладать ценными биологическими свойствами.

Цель работы - разработка удобных общих методов синтеза стероидных [17,16-4-пиразолинов и пиразолов - производных 16-дегидропрегненолона и тиогидразидов оксаминовых кислот, изучение их реакционной способности и создание на их основе новых структур, среди которых предполагалось выявить вещества с высокой биологической активностью.

Научная новизна и практическая значимость. Впервые получены стероидные гидразоны тиогидразидов оксаминовых кислот. Разработан удобный метод синтеза 14-(тиооксамидо)замещенных стероидных [17а,16а-с1]пиразолинов андростанового ряда. Получены ранее не известные М-(ариламино)оксалил-[ 17а, 16а-с1] пиразол югы андростанового ряда.

Впервые систематически изучено взаимодействие 16,17-эпоксипрегн-5-ен-ЗР-ол-20-онов с гидразидами кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот. Получены не известные ранее 1ба/1бр-изомеры 5'-метил-(2'-арилкарбамоил)-Зр,16-дигидроксиспиро-андрост-5-ен-17,6'-[ 1,3,4]тиадиазинов.

Впервые изучено взаимодействие а-хлорацетамидов стероидных [17,16-с1]пиразолов андростанового ряда с элементной серой в присутствии аминов и получены К-(тиооксамидо)заметенные стероидные [ 17а, 16а-(1] гтиразолы андростанового ряда.

Предложен новый десульфуризующий агент - 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохинон фОСЗ), позволивший с хорошим выходом получать оксамиды из монотиооксамидов.

Установлено, что Ы-замещенные [17а,16а-с1]пиразолины андростанового ряда проявили активность на уровне сильнейших известных антипаразитарных препаратов.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на Научной конференции «Органическая химия для медицины», г. Черноголовка, Мое. обл., сентябрь, 2008г., 23-ем Международном симпозиуме по органической химии серы (150С5-23), Москва, июнь-июль 2008г. Международной научно-практической конференции «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнике», Москва 2008г.

Публикации, Основное содержание работы опубликовано в 4 научных статьях в отечественных и зарубежных журналах, а также в 3 тезисах докладов на научных конференциях.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 140 страницах и включает в себя введение, литературный обзор, посвященный способам получения стероидов, конденсированных в 16,17-положениях с разнообразными гетероциклами, и их биологической активности, обсуждение результатов, экспериментальную часть и выводы. Список литературы содержит 130 литературных ссылок.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Известные в литературе способы получения стероидов, конденсированных в 16,17-положениях с пиразолами и пиразолинами (дигидропиразолами) имеют ряд недостатков и ограничений. В частности, описано получение производных пиразолов и пиразолинов только с относительно простыми заместителями, в основном, алкилами и арилами. Синтез целевых стероидов андростанового ряда, содержащих монотиооксамидные фрагменты, в литературе неизвестен.

I. Синтез [17,16-с1]дигидропиразолов.

Для получения целевых соединений нами был предложен новый общий подход, основанный на циклизации стероидных гидразонов прегнанового ряда 3 в соответсвующие [17,16-<1]пиразолины 4, которые затем превращают в целевые Д4-3-кето андрост-5-ено [17,16-с1] дигидропиразолы 6 (схема 1).

Схема 1

1.1. Синтез стероидных гидразонов тиогидразидов оксаминовых кислот.

На первом этапе перед нами стояла задача - разработка удобной методики получения стероидных гидразонов тиогидразидов оксаминовых кислот 3. В качестве исходных соединений был использован доступный ацетат дегидропрегненолона 1 (АДП), а также набор тиогидразидов оксаминовых кислот 2. Выбор данных тиогидразидов оксаминовых кислот обусловлен тем, что соединения этого ряда проявляют высокую биологическую активность, в частности, они обладают противомикробными и антивирусными свойствами. Можно было предположить, что конденсация тиогидразидов 2 со стероидным скелетом может привести к появлению новых веществ с такими важных качествами, как, например, высокая липофильность, при сохранении высокой биологической активности.

Исходные тиогидразиды оксаминовых кислот 2а-} были получены удобным известным методом из соответствующих хлорацетамидов по нижеприведенной схеме.

ПЫН2 +

о о

рмр/0-5°с ii ^/пгамтелэмр

01 С1

э

И-Н/Н-ОГОМР II

I V п ——*- ^

о И

2а-}

a. К=С6Н5 <1. И=/;-С1-С6Н4 Н=о-Ме-С6Н5

b. Я=/>-МеО-С5Н4 е. И=р-Р-С6Н4 1. Я=р-Вг-С6Н4

c. К=т-МеО-С6Н4 {. Я=т-Р-С6Н4 j. 11=о-Вг-С6Н4

Схема 2

Полученные из соответствующих аминов хлорацетамиды подвергали взаимодействию с серой в присутствии морфолина с образованием монотиооксамидов. Переамидированием действием гидразингидрата в среде ДМФА при комнатной температуре с выходами 60-70% были синтезированы тиогидразиды оксаминовых кислот 2а-} (схема 2).

Взаимодействием АДП 1 с тиогидразидами 2а-} при кипячении в спирте в присутствии каталитического количества уксусной кислоты были получены стероидные гидразоны За-] с выходом 76-80% (схема 3).

еО

2а-е э

АсО

с2н5он

1

a. 1*=С6Н5 а. 11=р-С1-С6Н4 Й- Я=о-Ме-С6Н5

b. Я=р-МеО-С6Н4 е. К=р-Р-С6Н4 I. Я=;;-Вг-С6Н4

c. К=т-МеО-С6Н4 Г. Я=т-Р-С6Н4 К=о-Вг-С6Н4

Схема 3

Строение соединений 3 установлено спектральными методами и элементным анализом. С помощью одномерных и двумерных методик спектроскопиии 'н, и 13С- ЯМР на примере соединения Зg показано, что метальная группа при С-20 и аминогруппа гидразонного фрагмента находятся в ^-конфигурации относительно связи С=>?, а образующиеся гидразоны имеют 2-конфигурацию.

1.2. Циклизация стероидных гидразонов тиогидразидов оксаминовых кислот в

[17а,16а-(1]пиразолины.

Гидразоны За-] подвергаются внутримолекулярной циклизации, протекающей, как нуклеофильное присоединение ИН группы к Д1б-связи стероидной молекулы, что приводит к единственному продукту реакции - 1 '-(арилкарбамоилтио)-З -метил-ЗР-ацетоксиандрост-5-ен[17а,16а-с1]пиразолинам 4а-} (схема 4).

За^

4а-}

a. К=С6Н, (1. К=р-С1-С6Н4 & Н=о-Ме-С6Н5

b. К=р-МеО-Сь114 е. К=р-Р-С6И4 ¡. И=р-Вг-С,]1,

c. Я=т-МеО-С6Н4 Г. Я=т-Р-С(1Н4 j. Я=о-Вг-С6Н4

Схема 4

Для большинства гидразонов 3 циклизация успешно осуществляется при кипячении в ледяной уксусной кислоте. Выход пиразолинов 4а-} составляет 75-84%.

Следует отметить, что в том случае, когда в реакцию с АДП 1 вводят тиогидразиды оксаминовых кислот 2, содержащие в ароматической части электронодонорные заместители, то при проведении процесса в кипящей уксусной кислоте наблюдается самопроизвольная циклизация промежуточно образующихся гидразонов в дигидропиразолы 4 (схема 5).

Строение соединений 4 было установлено при помощи одномерных и двумерных методик спектроскопии ЯМР на протонах и ядрах 13С на примере соединения 4(1 (рис. 1). Была проведена корреляция между углеродами и соответствующими протонами в спектрах Ш(2С. Анализ двумерных спектров Н-Н ЫОЕЗУ позволил установить пространственно сближенные протоны и соответственно 17а,16а-конфигурацию гетероцикла в соединении 4(1.

АсО

1 а. К=С6Н5

b. К=р-МеО-С6Н4

c. К=т-МеО-С6Н4 К=о-Ме-С6Н,

4а-с,г

Схема 5

ГУ

\

н

Рисунок 1

В ROESY спектре выявлено отсутствие корреляции между протоном Н-14 и протонами Н-16 и Н-17, наличие корреляции между протоном Н-16 и протонами Н-15, Н-15' Н-17, Н-18, а также между протоном Н-17 и протоном Н-18. Это возможно только в случае (см. рис. 1) 16а,17а-конфигурации кольца D.

Таким образом, нами разработан подход к синтезу сложнозамещенных пиразолинов андростанового ряда и впервые получены 1 '-(арилкарбамоилтио)-З -метил-Зр-ацстоксиаидрост-5-ен[17аД6а-(й]пиразол1шы 4a-j.

На следующем этапе был осуществлен синтез зр-гидроксиандрост-5-ен[17,16-с1]пиразолинов Мы исследовали реакцию гидролиза зР-ацетокси-[17,16-

(1]пиразолинов 4а-\. как в щелочных, так и в кислотных условиях. Проведение гидролиза в кислотных условиях приводит к сложной смеси продуктов, из которой пиразолины 5а-] были выделены с незначительным выходом. Получить целевые ЗР-гидроксипроизводные с хорошим выходом удалось в условиях щелочного гидролиза, однако в этом случае имеет место побочная реакция десульфуризации тиооксамидного фрагмента, приводящая к образование Ы-оксалатов (схема 6).

1.3. Синтез Зр-гидроксиандрост-5-ен[17,16-с1]пиразол1шов.

Схема 6

Для разработки оптимальных условий гидролиза для получения необходимых соединений 5 мы варьировали соотношение реагентов, температуру и время выдержки

реакционной смеси. Образование продукта десульфуризации можно свести к минимуму, проводя реакцию при низкой температуре. Так, щелочной гидролиз ацетата 4 в диоксане при 5°С с 2% раствором ИаОН в ЕЮН приводит к З-метил-1-(арил)карбамоилтиокарбонил-Зр-гидроксиандрост-5-ен[ 17а, 16а-с1]пиразолинам с

выходом 85%. В этом случае удается практически полностью избежать образования оксамидов 7. В то же время, как уже было отмечено, увеличение температуры способствует образованию оксамидов и при проведении реакции при 60°С в 5% растворе ШОН в этаноле с высокой селективностью и высоким выходом получают 3-метил-1 (ариламино)оксалил-Зр-гидроксиандрост-5-ен[17,16-с1]-пиразолины 7а^.

1.4. Синтез А4-3-кетоандрост-5-ен[17,16-(1]пиразолинов.

Окисление полученных выше спиртов и 7а^ в стандартных условиях реакции Оппенауэра протекает гладко. При кипячении соответсвующих спиртов с циклогексаноном в толуоле в присутствии А1(01Рг)з с выходом 60-64% были получены целевые продукты - Д4-3-кето-[17,16-с1] пиразолины 6а-] и (схема 7).

7 8Х=° а-К=СбН5 А К=р-а-С6Н4 & 11=о-Ме-С6Н5

b. 11=р-МеО-С6Н4 е. К=р-Р-С6Н4 ¡. 1?=о-Вг-С6Н4

c. И=т-МеО-С6Н4 Г. К=т-р-С6Н4 1 1{=р-Вг-С6Н4

Схема 7

Таким образом, нами впервые были получены 1'-арилкарбамоилтиокарбонил-3'-метил-3-оксоандрост-4-ен[17,16-(1]пиразолины и Г-ариламинооксалил-З'-метил-З-оксоандрост-4-ен[17,16-с1]пиразолины 8а-], содержащие, соответственно, тиооксамидные или оксамидные заместители в боковой цепи.

Альтернативным подходом к синтезу стероидных пиразолинов 6 может быть путь, совмещающий стадии циклизации гидразонного фрагмента в пиразолиновый цикл и окисления гидроксигруппы в кетогруппу. С целью проверки этого предположения нами были получены ЗР-гидроксигидразоны 9а,Ь,(1-й (схема 8).

За,Ь,а-8 а. К=С6Н5 е.1{=р-Р-С6Н4 9а,

Ь. К=р-МеО-С6Н4 Г. К=т-Р-С6Н4 й. К=р-С1-С6Н4 & Я-о-Ме-С6114

Схема 8

Проведение реакции гидролиза Зр-ацетоксигруппы в стероидах За,Ь,с1-й при 5°С в диоксане, содержащем 2% этанольный раствор ИаОН, приводит к 20-гидразонам Зр-гидроксиандрост-5-ен-20-она 9а,Ь,(1-й с высокими выходами.

Было установлено, что окисление Зр-гидроксильной группы в тиогидразонах 9а,Ь,<1-£ в стандартных условиях реакции Оппенауэра сопровождается циклизацией гидразонов с образованием Д4-3-кето-[17,16-<1]пиразолинов 6а,Ь,с1^ в качестве основного продукта с выходом 56%, а выход нециклизованных Д4-3-кето-20 гидразонов 10а,Ь,(1^ не превышает 7%. При длительном кипячении единствнными продуктами реакции являются Д4-3-кето- [16,17-с)]пиразолины 6а,Ь,с1-д при этом их выход увеличивается до 62% (схема 9).

Схема 9

Совмещение стадий гидролиза Зр-ацетоксигруппы и циклизации позволило значительно увеличить общий выход целевых Д4-3-кетоандрост-5-ен[17,16-с1]пиразолинов 6 и упростить их синтез.

II. Изучение подходов к синтезу стероидных пиразолов.

11.1. Изучение возможности получения андростано[17а,16а-с1]пиразолов реакцией дегидрирования 1'-арилкарбамоилтиокарбонил-3'-метил-Зр-гидроксиандрост-5-ен[17а,16а-(1]пиразоли110в.

В литературе для синтеза пиразолов широко используют дегидрирование соответствующих пиразолинов, несущих алкильные или арильные заместители при атоме азота, под действием ряда дегидрирующих агентов - кислород воздуха, хлоранил, ООО. Однако все попытки провести дегидрирование полученных нами пиразолинов 5, несущих тиооксамидный заместитель, под действием известных дегидрирующих агентов не привели к желаемым пиразолам. Нами показано, что проведение реакции в жестких условиях - 20% водный раствор N3011 в ДМФА - приводит к потере сложного тиоксамидного заместителя, а образующийся в этих условиях незамещенный пиразолин 11 легко дегидрируется под действием кислорода воздуха. Единственным выделенным продуктом, в этих условиях, является незамещенный МН-пиразол 12, полученный с выходом 40% (схема 10).

5а,Ь а. К=С6Н5 И 12

Ь. Я=р-МеО-С6Н4

Схема 10

В то же время было установлено, что использование ООО при обработке 5а, Ь, (1-й приводит к образованию неизвестных ранее оксамидов 7а, Ь, (схема 10).

a. Я=С6Н5 е. а=р-Р-С„Н4

b. Я=/>-МеО-С6Н4 Г. Я=т-Р-С6Н4 а. К=р-С1-С6Н4 в. Я=о-Ме-С6Н4

Схема 11

Необходимо отметить, что значительное влияние на протекание этой реакции оказывает присутствие воды в реакционной системе. Проведение реакции в безводных

растворителях приводит к сложной трудноразделимой смеси продуктов, и, наоборот, проведение реакции в насыщенном водой бензоле или ацетонитриле (содержание воды -5%) при кипячении с 00<3 приводит с хорошим выходом к оксамидам 7а, Ь, с!^. Реакция, по-видимому, носит общий характер. Так, в этих условиях различные тиооксамиды 13а-с с хорошим выходом превращаются в соответствующие оксамиды 14а-с (схема 12).

А-

R ^ ^NHR, DDQ - NHR,

й ....." О b. R,= ^ R2=C6H,

Им 14а-с с. R _ ^ ^А^ ^

Схема 12

Введение в эту же реакцию гидразонов тиогидразидов оксаминовых кислот 15а-с приводит с количественными выходами к образованию тиадиазолов 16а-с. Известно, что гидразоны тиооксаминовых кислот в растворах существуют в виде двух таутомерных форм - линейной 15А и циклической 1SB. Можно предположить, что при окислении циклической формы гидразонов 15В происходит образование тиадиазолов 16а-с (схема 13).

н

» RHN' Х—Г1 0Н DP«yC"3CN RHN

НО'

п

15А 15В \=/

a. К=р-Р-С6Н4

b. 1И>-МеО-С6Н4 с. ^ оо,в

Схема 13

11.2. Изучение возможности получения пиразолов из 16-галогензамещеш1ых производных 20-гидразонов Зр-ацетоксипрегна-5,16-диен-20-она.

Одним из возможных подходов к синтезу целевых пиразолов андростанового ряда является метод, включающий функционализацию А16-связи 20-гидразонов дегидропрегненолона, путем введения в молекулу атома галогена с последующей циклизацией 1бР-бром-20-гидразонов в соответствующие пиразолы. Бромирование Д16-связи в 20-гидразонах дегидропрегненолона К-бромсукцинимидом при кипячении в ацетонитриле гладко протекает только для 20-ацетилгидразона 17 с образованием 16-бромпроизводного 18. Однако циклизовать соединение 18 в среде различных

растворителей (СН2С12, СН3С1Ч, ОМ!1) под действием оснований, которые применяют для такого рода превращений (КОАс, К2СО3), не удалось (схема 14).

Для 20-тиогидразонов За,Ь продуктов бромирования Д16-связи получить не удается.

Использование в качестве галогенирующего агента йода или йодсукцинимида в СНгСЬ или в СНзСК, для гидразонов типа За,Ъ,е приводит к трудноразделимым смесям, а единственными выделенными продуктами являются бис-стероиды 19а,Ь,е. В более полярном растворителе - ДМФА при добавлении 12 или Гчт-иодсукщшимида гидразоны также с более высоким выходом превращаются в димеры 19а,Ь,е (схема 15).

Схема 15

Таким образом, попытка использования 16-галогензамещенных производных гидразонов тиогидразидов оксаминовых кислот для синтеза пиразолов оказалась безуспешной.

-1211.3. Реакция изомерных 16,17-эпоксипрегненолонов с гидразидами карбоновых кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот.

Взаимодействие 16,17-эпокси-20-кетостероидов с гидразидами карбоновых кислот, как показано в ряде опубликованных работ, открывает интересный путь к синтезу пиразолов. Данные, имеющиеся в литературе, относятся в основном к раскрытию стероидных 20-кетоокисей и их гидразонов, структурной и пространственной направленности этой реакции, однако сведений о ее синтетических возможностях для получения стероидных пиразолов крайне мало.

Нами проведено исследование взаимодействия изомерных 1бр,17р-эпокси изопрегненолона и 16а,17а-эпоксипрегненолона с гидразидами карбоновых кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот.

П.3.1 Взаимодействие 16р,17р-эпоксиизопрегненолона с гидразидами карбоновых кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот.

Для синтеза 1бр,17р-эпоксиизопрегненолона 23 был использован модифицированный нами метод, описанный в литературе. Бромированием АДП 1 был получен 5,6-дибромпрегненолон 20 Дальнейшее бромирование ацетилгипобромидом в четыреххлористом углероде приводит к Зр,16р-диацетату 5,6,17а-трибромпрегнан-Зр,16-диол-20-ону 21. Применение подобного бромирующего агента позволяет повысить выход в этой реакции до 90%. Последующим дегидробромированием и замыканием окисного цикла при кипячении в метаноле с ацетатом калия с выходом 40% (в расчете на исходный АДП 1) получают 16р,17р-эпокси- изопрегненолон 23 (схема 16).

Схема 16

Мы изучили взаимодействие 1бр,17р-эпоксиизопрегненолона 23 с гидразидами карбоновых кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот в различных условиях. Взаимодействие 1бр,17р-эпоксиизопрегненолона с гидразидами карбоновых кислот в

уксусной кислоте при 20°С, как и ожидалось, приводит к продуктам циклизации -5 гидроксипиразолинам 24а,Ь (схема 17).

24а, Ь

Схема 17

Однако при взаимодействии 16р,17Р-эпоксиизопрегненолона 23 с тиогдиразидами оксаминовых кислот в этих же условиях, помимо 5'а-гидрокси-3'-метил-Г-арилкарбонил-Зр-гидроксиандрост-5-ен[17,16-с1]пиразолинов 25а-с, e-g в реакционной смеси происходит образование значительного количества соединений, которые были идентифицированы как 5 '-метил-[2 '-(арилкарбамоил]-Зр, 16а-дигидроксиспироандрост-5-ен-17,6'[1,3,4]тиадиазины 26а-с, е^ (схема 18).

е. К=/.-Р-С,Н4

И.

b. Н=р-МеО-С6Н4 Г. К=т-Р-С6Н4

c. Н=да-МеО-С6Н4 К=о-Ме-С6Н5

26а-с, e-g

Схема 18

Следует отметить, что стероидные спиро-тиадиазины до начала наших исследований не были известны. Строение стероидных спиротиадиазинов 26 было установлено на примере соединения 26с при помощи одномерных и двумерных методик спектроскопии на 'Н-, 13С- и 15Г4- ЯМР (рис. 2).

Рнсунок 2

Было проведено полное отнесение сигналов в спектрах *Н- и 13С-ЯМР, вьшолненное путем расшифровки двумерных спектров COSY, TOCSY, NOESY, HSQC, НМВС. Анализ спектров 'Н- и ,3С-ЯМР позволил выявить закономерности, важные для определения конфигурации стероида 26с. В пользу спироструктуры при С-17 свидетельствовал химический сдвиг непротонированного атома углерода С-17 с 5 62.40м.д„ а также выявленные в спектре НМВС взаимодействия Н-16 с С-20. Анализ двумерных спектров Н-Н NOESY, позволивший установить пространственно сближенные протоны, дал возможность приписать стереохимию тиадиазинового кольца и 16-ОН-группы в кольце D молекулы. Протон при С16 дает корреляцию с протонами метальной группы Н-18, имеющей Р-конфигурацию, а также с протонами метальной группы при С-21, протонами Н-15 и Н-15'. Таким образом, протон Н-16 занимает р-положение, следовательно 16-ОН-группа находится в а-положении. При этом между протонами метальных групп Н-18 и Н-21 имеется также корреляционный пик, что возможно только в случае р-положения атома углерода С-20 (С 17). Кроме того, в пользу указанной структуры свидетельствуют данные спектра HN НМВС в котором наблюдаются корреляции N-22 с Н-21 и оксамидного азота с ароматическими протонами, и отсуствие корреляций N-23, несвязанного через 2 связи ни с одним углеродом, несущим атомы водорода (см. рис. 2).

Основываясь на литературных данных, мы предположили, что проведение реакции Р-окиси 23 с гидразидами в присутствии каталитического количества H2SO4 должно привести к образованию соответствующих пиразолов. Действительно, при взаимодействии 1бр,17р-эпоксиизопрсгнснолона 23 с гидразидами карбоновых кислот в диоксане при 20°С в присутствии каталитического количества H2SO4, были выделены исключительно [17,16-с1]пиразолы 27а,b с хорошими выходами (-80%) (схема 19).

a. Г!=ОС2Н5

b. Н=СНг-С6Н5

Схема 19

Однако взаимодействие 1бр,17р-эпоксиизопрегненолона 23 с тиогидразидами оксаминовых кислот в этих же условиях не приводит к соответствующим пиразолам. Единственными продуктами, образующимися в результате этой реакции с высокими

выходами (68-73%), являются тиадиазины 26а-с,е^. Изменение условий реакции (проведение реакции при 6°С, использование ТэОН или СР3СООН вместо Н28С>4, увеличение количества используемых тиогидразидов оксаминовых кислот) не привело к другим продуктам реакции (схема 20).

a. К=СД е. К=р-Р-С6Н4

b. К=р-МеО-С6Н4 Л 11=т-Р-С6Н4

c. К=т-МеО-С6Н4 К=о-Ме-С6Н5

Схема 20

Было также показано, что тиадиазины 26 образуются при проведении реакции в спирте, в присутствии каталитических количеств Н2504, ТхОН, СИзСООН, но с меньшими выходами (62-64%).

П.3.2. Взаимодействие16а,17а-эпоксипрегненолона с гидразидами карбоновых кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот.

16а,17а-Эпоксипрегненолон 28 является более доступным соединением по сравнению с 1бр,17Р-эпоксиизопрегненолоном 23. Для его синтеза использовали описанный в литературе одностадийный метод окисления АДП 1 щелочной перекисью водорода в метаноле. В результате с высоким выходом получили 16а,17а-кетоокись 28. (схема 21).

П.3.2.1. Синтез 20-гидразонов 16а,17а-эпоксипрегн-5-ен-Зр-ол-20-она.

Анализ литературных данных показал, что 20-гидразоны 16а,17а-эпоксипрегненолона, в отличие от 20-гидразонов 1бр,17р-эпоксиизопрегненолона, претерпевают преимущественно цис-раскрытие окисного цикла с образованием 17а-замещенных гидроксисоединений 29. Публикации, посвященные изучению раскрытия а-

окисей в присутствии гидразонов, содержат достаточно много сведений о влиянии растворителей и рН среды на протекание реакции раскрытия окисного цикла. Однако возможности направить реакцию гидразонов а-окиси в сторону циклизации с образованием [17,16-(1]пиразолов уделено немного внимания. Единственным примером подобной циклизации является взаимодействие а-окиси 28 с гидразингидратом при кипячении в этиленгликоле с образованием незамещенного [17,16-с!]пиразола 12. (схема 22). Однако жесткие условия реакции не позволяют проводить реакцию со сложнозамещенными гидразидами

Схема 22

В процессе данного исследования важным этапом стал поиск оптимальных условий получения 20-гидразонов 16а,17а-эпоксипрегненолона. Литературный метод -взаимодействие а-эпоксипрегненолона 28 с гидразидами в уксусной кислоте при комнатной температуре - приводит к 20-гидразонам 30 только при введении в реакцию гидразидов карбоновых кислот. Нами было показано, что взаимодействие кетоокиси 28 с тиогидразидами оксаминовых кислот 2 приводит к совершенно другим результатам. Реакция 16а,17а-эпоксипрегненолона 28 с тиогидразидами 2 в уксусной кислоте при комнатной температуре протекает очень медленно. Повышение температуры реакционной смеси или проведение реакции при кипячении в спирте в присутствии каталитического количества уксусной кислоты, приводит к сложной смеси продуктов, из которой в качестве основного продукта были выделены 16а-ацетат N-(2-ариламинооксотиоацетил)гидразоны прегн-5-ен-Зр,16а,17а-триол-20-она 32 (схема 23).

31а, Ь

Схема 23

32а, Ь

a. Я=С6Н5

b. 1*=/>-ОМе-С6Н4

Выходы 20-тиогидразонов 16а,17а-эпоксипрегненолона 31 в этих условиях не превышают 5%.

Мы изучили взаимодействие 16а,17а-эпоксипрегненолона 28 с тиогдидразидами оксаминовых кислот 2 в различных апротонных растворителях (ДМФА, этиленгликоль, диоксан, бензол, ДМСО). Были найдены оптимальные условия, при которых преимущественно происходит образование гидразона, а процесс раскрытия окисного цикла существенно подавлен. Проведение реакции 16а,17а-эпоксипрегненолона 28 с тиогидразидами оксаминовых кислот 2 в абсолютном ДМСО, содержащим каталитическое количество пара-толуолсульфокислоты, при 15°С позволяет получать соответствующие 20-гидразоны 31а-с,е-5 с хорошими выходами (схема 24).

31а-с, е^

а.

е. К=/>-Р-С6Н4

b. Я=р-МеО-С6Н4 Г. Г[=т-Р-С6Н4

c. Я=т-МеО-СбН4 & 1*=о-Ме-С6Н5

Схема 24

П.3.2.2. Синтез гетероциклических структур на основе 20-гидразонов 16а,17а-эпоксипрегненолона.

Как бьшо установлено, экспозиция 20-гидразонов 16а,17а-эпоксипрегненолона в уксусной кислоте, или в присутствии протонных кислот приводит, в основном, к продуктам раскрытия окисного цикла. Мы предположили, что проведение реакции в неполярных апротонных растворителях с использованием в качестве катализатора кислот Льюиса может направить реакцию в сторону циклизации.

Мы использовали в качестве кислоты Льюиса эфират трехфтористого бора (48% раствор в диэтиловом эфире) Изучение циклизации гидразонов окиси 30 под действием ВИз^гО в различных температурных условях и различных по полярности апротонных растворителях (бензол, СН2С12, Н[20 СН3СМ, диоксан, ДМФА, ДМСО) позволило найти оптимальные условия для получения пиразолов 34 с сохранением ацильного заместителя при атоме азота. Проведение реакции в бензоле при постепенном повышении температуры от 5°С до 18°С в течение б часов приводит к соответствующим пиразолам с высокими выходами. При меньшем времени выдержки из реакционной смеси помимо целевого пиразола был выделен продукт неполной циклизации - оксипиразолин 33 (схема 25).

I -н.о

34

Мы попытались распространить найденные нами условия на процессы с участием 20-тиогидразонов а-окиси 31а-с,е-ц однако оказалось, что основными продуктами их циклизации в этих условиях являются изомерные тиадиазины 26 и 35, образующиеся в соотношении 1:0.7. Мы исследовали влияние температуры на соотношение образующихся изомеров 26 и 35. Проведение реакции при комнатной температуре приводит в основном к диастереомерам 26а-с,е^. При понижении температуры реакции увеличивается количество диастереомера 35а-с,е^ (схема 26).

; I У-ОН ИНН " 35а-с, е-£

31а-с, е^

a. К=С(Н5

b. К=/7-МеО-СбН4

c. И-т-МсО-С-Н.

е. К=/>-Р-С,Н4 Г. К=т-Р-С„Н4 g. Я=о-Ме-С6Н5 Схема 26

Стереохимическое строение соединений 35 было установлено на примере соединения 35с при помощи одномерных и двумерных методик спектроскопии на 'Н-13С-, 15К-ЯМР.

Для Н-16 наблюдаются корреляции с протонами метальной группы Н-21, Н-15 и Н-15'. При этом отсутствует корреляция с протонами Н-18, но, в отличие от изомерного соединения 26с, наблюдается корреляция с протоном Н-14, находящимся в а-положении. В данном соединении Н-21 не дает корреляции с Н-18, вместо этого также имеет место корреляция Н-21 с Н-14, что говорит об их пространственной близости. Таким образом, 16-ОН группа находится в Р-, а С-20 (С17-С20) - в а-положении в молекуле (см. рис. 3).

Нами было показано, что образующийся тиадиазиновый цикл достаточно устойчив и не претерпевает изменений как при обработке НгБС^ в диоксане так и при действии ЫаОН в диоксане.

П.3.2.3.Синтез 2'-арилкарбамоил-5'-метил-16а-гидрокси-спироа11дрост-4-е11~3-он-17,6 -[1,3,4]тиадиазинов.

Мы исследовали возможность получения Д4-3-кето[17,6 ]тиадиазинов Зб.из соответствующих ЗР-гидроксипроизводных 26 в условиях реакции Оппенауэра. Было установлено, что тиадиазиновый цикл не претерпевает изменений и сохраняется при окислении Зр-гидроксильной группы соединений 26 кипячением с циклогексаноном в толуоле в присутствии А1(01Рг)3. При этом с высоким выходом образуются соответствующие Д4-3-кетоны 36 (схема 27).

26а-с, с-8 а. Я=С6Н, е. К=/)-Н-СйН4 Зба-с, е-е

b. Я=р-МеО-С6Н4 {. С6Н4

c. Я=т-МеО-С6Н4 g. К=о-Ме-С6Н5

Схема 27

Как уже отмечалось выше, стероидные спиротиадиазины до начала наших исследований не были известны.

Ш. Синтез Р4-(арилтиокарбош1л)пиразолов из 1"Щ-пиразолов.

Метод, ранее использованный нами при получении тиогидразидов оксаминовых кислот (см. раздел 1.1 на стр. 6), был успешно применен и для синтеза стероидных арилтиооксамидо[17,16-с)]пиразолов 39а-с. Апетилированием незамещенного пиразола 37 с хорошим выходом получили 14-хлорлацетилпиразол 38, который затем при обработке элементной серой в присутствии ароматических аминов образует стероидные пиразолы 39а-с содержащие монотиооксамидный фрагмент. Выходы М-(арилтиооксамидо)-пиразолов 39 относительно невысокие (-20%), что, по-видимому, связано со склонностью ацильных заместителей в пиразолах к гидролизу (схема 28).

с. Г!=р-Вг-С6Н4

Схема 28

Следует отметить, что в соединениях 39а-с непосредственно у атома азота пиразола находится кетогруппа, тогда как во всех ранее полученных гетероциклах, содержащих монотиооксамидный фрагмент (соединения 4, 5,6) у атома азота гетероцикла располагалась тионная группа.

IV. Изучение биологической активности андрост-4-сн[17,16-(1]пнразол1шов.

Набор соединений 4а-Г, 5а-Г и 6а-Г был передан на биологические испытания.

a. 1*=С6Н5 а. К=р-С1-С6Н4

b. Я=р-МеО-С6Н4 е. К=р-Р-С(,П4

c. Я=т-МеО-С6Н4 Г. 1*=т-Р-С6Н4

Предварительные испытания этих соединений были проведены в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии». Впервые обнаружено биоцидное (антипаразитарное) действие стероидных дигидропиразолов на олигохеты ТиЫАЫсЫ шЫГех. Показано, что 1'-

арилкарбамоилтиокарбонил-3'-метил-3-оксоандрост-4-ено[17,16-с1]пиразолины 6а-Г более активны, чем их 3(3-гидроксианалоги 5а-С, а ЗР-ацетаты 4а-Г проявляют очень слабую активность. Это свидетельствует о том, что для проявления активности молекула стероида должна содержать ответственный за взаимодействие с рецепторными белками «якорный участок», которым в данных структурах, по-видимому, является Д4-3-кетогруппировка в кольце А. В том случае, когда этот участок «дезактивирован» ацетатной группой (для соединений 4а-Г), активность практически отсутствует. Наибольший интерес представляют пиразолины 6Ь и 6с, которые проявили при пониженной токсичности активность на уровне сильнейших антипаразитарных препаратов, используемых на сегодняшний день, таких как «авермектин» и его аналоги, а также «клозантел». Можно сделать заключение, что стероидные дигидропиразолы представляют интерес для создания противопаразитарных препаратов широкого спектра действия.

Таким образом, в результате проведенного исследования впервые систематически изучено взаимодействие 16-дегидропрегненолона и изомерных 16,17-эпоксипрегненолонов с гидразидами и тиогидразидами оксаминовых кислот. Синтезированы неизвестные ранее пиразолы, пиразолины и тиадиазины андростанового ряда. Показана перспективность использования стероидов, конденсированых с гетероцикпами, в создании веществ с полезными свойствами.

Выводы

1. Впервые получены стероидные гидразоны тиогидразидов оксаминовых кислот.

2. Разработан удобный метод синтеза Г^-(тиоксамидо)замещенных стероидных [17а,16а-с!]пиразолинов андростанового ряда.

3. Получены ранее не известные 1Ч-(ариламино)оксалил-[17а,16а-с1]пиразолины андростанового ряда.

4. Впервые систематически изучено взаимодействие 16,17-эпоксипрегн-5-ен-Зр-ол-20-она

с гидразидами кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот. Получены неизвестные ранее 5'-метил-2'-арилкарбамоил-Зр,16а-дигидроксиспироандрост-5-ен-17,6'-

[ 1,3,4]тиадиазины.

5. Впервые изучено взаимодействие а-хлорацетамидов стероидных [17,16-с1]пиразолов андростанового ряда с элементной серой в присутствии аминов и получены Ы-(тиоксамидо)замещенные стероидные [17а,16а-с1]пиразолы андростанового ряда.

6. Предложен новый десульфуризующий агент - ООО, позволивший с хорошим выходом

получать оксамиды из монотиооксамидов.

7. Установлено, что К-замещенные [17,16-<1]пиразолины андростанового ряда проявили активность на уровне сильнейших известных антипаразитарных препаратов.

Основное содержание диссертации опубликовано в следующих работах:

1. Камерницкий А.В., Чернобурова Е.И., Черткова В.В., Яровенко В.Н., Заварзин И.В., Краюшкин М.М., «Влияние заместителей в гидразонах сопряженных 20-кетостероидов прегнанового ряда на их способность к циклизации в пиразолины», // Изв. АН, сер. хим. 2006,11, 2038.

2. Камерницкий А.В., Чернобурова Е.И., Черткова В.В., Яровенко В.Н., Заварзин И.В., Краюшкин М.М., «Ацилгидразоны 20-кетостероидов и их превращения». 1. Синтез и свойства 1-ацилзамещенных 3-метиландростено-16,17-пиразолинов», // Биоорганическая химия, 2007, 337.

3. Zavarzin I.V., Kamernitsky A.V., Chertkova V.V., Chernoburova E.I., Yarovenko V.N., Krayuskin M.M., Kachala V.V. «Synthesis of 1 arylcarbamoylthiocarbonyl-3 -methyl-3-oxoandrost-4-eno[16a,17a-</]pyrazolines ». // ARKIVOC, 2008, (iv), 62

4. Джафаров M.X., A.B. Камерницкий, Е.И. Чернобурова, В.В. Черткова, В.Н. Яровенко,

Заварзин И.В., Краюшкин М.М., «Синтез и биологическая активность стероидных дигидропиразолов», // Российский иммунологический журнал, 2008,2 (11), №2-3, 192.

Тезисы докладов

1. Zavarzin I.V., Kamernitsky A.V., Chertkova V.V., Chernoburova E.I., Yarovenko V.N., Krayuskin M.M., «А New method synthesis of oxamides from monothiooxamides ». // 23nd Internationfl Symposium on the Organic Chemistry of Sulfur. Abstracts, Moscow, Russia, 2008, p.80.

2. A.B. Камерницкий, Е.И. Чернобурова, В.В. Черткова, В.Н. Яровенко, И.В Заварзин, М.М Краюшкин, А.К. Голенищев «Синтез 1-арилкарбамоилтиокарбонил-3-метил-3-оксофндрост-4-ено[ 16а, 17а-сП-4',5'-дегидропиразолов». Научная конференция «Органическая химия для медицины» // Сборник тезисов. Черноголовка, 2008, с.115.

3. Джафаров М.Х., Зайцев С.Ю., Мирзаев М.Н., Мельницкая Т.И., А.В. Камерницкий, В.В.

Черткова, И.В Заварзин, Е.И. Чернобурова. «Синтез стероидных пиразолинов и изучение их биологической активности». // Международная научно-практическая конференция «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнике». 2008, Москва, Сборник тезисов, с. 65.

Отпечатано в типографии ООО «Гипрософт» г. Москва, Ленинский пр-т, д.37А Тираж 100 экз.

Введение---------------------------------------------------------------------------------------7.

Глава I. Синтез и биологическая активность стероидов, конденсированных с гетероциклами в кольце D (Литературный обзор)------------------------------------------10.

1.1. Пятичленные гетероциклические системы, конденсированные со стероидной молекулой в 16,17 положениях кольца D. (пиразолины, пиразолы, имидазолы)--------------------------------------------------------------------------------------------10.

1.1.1. Синтез пиразолинов (дигидропиразолов)------------------------------------------10.

1.1.1.1. Синтез стероидных пиразолинов на основе андростана---------------------11.

1.1.1.1.1. Реакция циклизации 16-арилметиленпроизводных андростанона с гидразинами--------------------------------------------------------------------------------------11.

1.1.1.1.2. Взаимодействие 5а-Н- или А5- производных А1б-20-кетопрегнана с гидразинами--------------------------------------------------------------------------------------12.

1.1.1.1.3. Реакция циклизации 17-замещенных андростановг с д ифенил нитрил им инами---------------------------------------------------------------------13.

1.1.1.1.4. Взаимодействие ацетата дегидропрегненолона с алифатичекими диазосоединениями-----------------------------------------------------------------------------15.

1.1.1.1.5. Взаимодействие 16-альдегида D-секопрегнена с гидразинами----------16.

1.1.2. Пиразольные системы, конденсированные по 16,17-положениям кольца D стероидной молекулы-----------------------------------------------------------------------17.

1.1.2.1. Синтез стероидных пиразолов на основе андростана------------------------17.

1.1.2.1.1. Реакция циклизации производных 16-этоксиметиленандростенола с гидразинами-----------------------------------------------------------------------------------17.

1.1.2.1.2. Реакция циклизации а-оксокетенов дитиоацеталя с гидразинами-----18.

1.1.2.1.3. Реакция 17-хлор-16-формиландроста-5,16-диена с гидразинами-------19.

1.1.2.1.4. Реакция циклизации 16, 20- дикетонов с гидразингидратом------------20.

1.1.2.1.5. Реакция а-эпоксикетонов с гидразинами---------------------------------20.

1.1.2.1.6. Реакция р-эпокси кетонов с гидразинами----------------------------------21.

1.1.2.1.7. Синтез пиразолов из пиразолинов (реакция дегидрирования)---------21'.

1.1:2.2. Синтез стероидных пиразолов на основе эстрона-----------------------------22.

1.1.2.2Л: Реакция циклизации производных^ 16а-гидрокси, (этокси)метиленэстрона с гидразингидратом-----------------------------------------------------------22".

1.1:212.2. Реакция циклизации производных 16а-гидроксил (этокси)метиленэстрона с производными гидразина--------------------------------------------------------23.

1.1.2.2.3.' Модификация заместителей*пиразольных производных эстрона------24.

1.1.2^2.3.1'. Синтез 5'-алкиламидозамещенных пиразолов, конденсированных'по >

16,17 положениям кольца D эстрона--------------------------------------------------------24.

1:1.2.2.3.2. Алкилирование NH пиразолов ряда эстрона-------------------------------25.

1.1.2.2.4: Реакции, циклизации производных 16-дитиоэфиров эстрона с гидразингидратом------------------------------------------------------------------------------25.

1:1.2.2:5. Синтез [17,16-с)стероидных пиразолов из формилсекоэстрона---------26.

1.1.3. Имидазолы, конденсированные™ 16,17 положениям кольца^'------------27.

1.2: Шестичленные гетероциклические системы, конденсированные со стероидной молекулой в 16,17 положениях положениях (пиридины, хинолины,пиридазины, пиримидины)-----------------------------------------------------------28.

1.2.1. Пиридины, конденсированные по* 16,17 положениям кольца D стероидной молекулы---------------------------------------------------------------------------------------28.

1.2.1.1. Синтез пиридинов на основе андростана----------------------------------------28.

1.2:1:1:1'. Синтез стероидных пиридинов реакцией циклизации 16-ар ил метилен производных андростана-------------------------------------------------------------------28:

1.2.1.1.2.' Синтез стероидных пиридинов реакцией циклизации производных 16-формил-5а~андростан-17-она----------------------------------------------------------------29.

1.2.1.1.3. Синтез стероидных пиридонов из 17-хлор-16-формилпроизводных андростана---------------------------------------------------------------------------30.

1.2.1.1.4. Синтез стероидных пиридинов конденсацией Р-формиленамидов с циа-нометиленами под действием микроволнового излучения--------------------------30.

1.2.1.1.5. Синтез серо- и селенпроизводных стероидных пиридинов---------------30.

1.2.1.2. Синтез стероидных пиридинов на основе эстрона----------------------------31.

1.2.1.2.1. Получние стероидных пиридинов из О-аллилоксима----------------------31.

1.2.1.2.2. Использование реакции Дильса-Альдера при получении стероидных пиридинов-------------------------------------------------------------------------------------32.

1.2.2. Стероидные хинолины----------------------------------------------------------------32.

1.2.2.1. Получение стероидных хинолинов конденсацией 17-кетоандростена с производными аминобензальдегида-------------------------------------------------------32.

1.2.2.2. Синтез производных тетрагидрохинолина из16-альдегида Dсекопрегнена (Гетер о циклизация Дильса-Альдера)------------------------------------33.

1.2:3. Стероидные пиридазины---------------------------------------------------------------34.

1.2.3.1. Синтез производных [16,17-с]тетрагидропиридазина реакции Дильса-Альдера --------------------------------------------------------------------------------------------34.

1.2.3.2. Синтез производных пиридазина из зр-гидрокси-5а-андростан-17цианацетилгидразона по реакции Витига------------------------------------------------35.

1.2.4. Стероидные пиримидины--------------------------------------------------------------36.

1.2.4.1. Синтез пиримидинов из производных 16-метилен-17-кетостероидов —36.

1.2.4.2. Синтез пиримидинов конденсацией Р-амидо- а,Р-ненасыщенных кетонов--------------------------------------------------------------------------------------------36.

1.2.4.3. Синтез производных пиримидинов из а-оксокетендитиоацеталей-------37.

1.2.4.4. Синтез производных пиримидинов из 17-хлор-16-формиландростена —38. 1.3. Заключение--------------------------------------------------------------------------------39.

Глава П. Синтез стероидных [17,16-(1]пиразолов и' пиразолинов, потенциальных биорегуляторов направленного действия (Обсуждение результатов)----------------40.

П.1. Синтез [17,16-с1]дигидропиразолов------------------------------------------------40.

П.1.1. Синтез стероидных гидразонов тиогидразидов оксаминовых кислот—41. П.1.2. Циклизация стероидных гидразонов тиогидразидов оксаминовых кислот в [ 17,1 б-d) пиразол им ы------------------------------------------------------------------------42.

П.1.3.Синтез ЗР-гидроксиандрост-5-ен[17,16-£1]пиразолинов-----------------------45.

П.1.4. Синтез А4-3-кетоандрост-5-ен[17,16-(1]пиразолинов----------------------------46.

П.2. Изучение подходов к синтезу стероидных пиразолов----------------------------48.

П.2.1. Изучение возможности получения андростано[17а,16а-(1]пиразолов реакцией дегидрирования l'-арилкарбамоилтиокарбонил-З'-метил-Зргидроксиандрост-5-ен[17а,16а-{1]пиразолинов-------------------------------------------48.

П.2.2. Изучение возможности получения" пиразолов из 16-галогензамещенных производных 20-гидразонов Зр-ацетоксипрегна-5,16-диен-20-она-----------------51:

П.2.3. Реакция- изомерных 16,17-эпоксипрегненалонов с гидразидами карболовых кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот------------------------52.

П.2.3.1 Взаимодействие 1бр,17р-эпоксиизопрегненолона с гидразидами карбоновых кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот-----------------------53.

П.2.3.2. Взаимодействие16а,17а-эпоксипрегненолона с гидразидами карбоновых кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот-----------------------------------------59.

П.2.3.2.1. Синтез 20-гидразонов116а,17а-эпоксипрегн-5-ен-ЗР-ол-20-она---------60.

11:2.3.2.2. Синтез гетероциклических структур на основе20-гидразонов 16а,17аэпоксипрегненолона----------------------------------------------------------------------63.

П.2. 3.2.3.Синтез 2'-арилкарбамоил-5'-метил-16а-гидроксиспироандрост-4-ен—3он-17,6 -[1,3,4]тиадиазинов------------------------------------------------------------------65.

П.З. Синтез 1Ч-(арилтиокарбонил)пиразолов из NH-пиразолов---------------------66.

П.4. Изучение биологической активности стероидных[17,16-с!]пиразолинов —67.

Глава Ш. Экспериментальная часть-----------------------------------------------------69.

Выводы---------------------------------------------------------------------------------120.

Аналоги стероидных гормонов, содержащие конденсированные гетероциклические фрагменты, являются уникальными биологически активными веществами, проявляющими зачастую не только избирательное биологическое действие, но и обладающие сочетанием эффектов невозможных для нативных гормонов. Интерес к аналогам стероидных гормонов, конденсированных в 16,17 положениях с азотистыми гетероциклами, вызван не только тем, что эти соединения применяются в клинической практике, но и возможностью изучения влияния пространственной структуры стероидной молекулы на биологические свойства. Однако 16,17-гетероциклические стероиды, у которых прегнановая боковая цепь включена в гетероциклический фрагмент практически не известны, т.к. методы синтеза стероидных гетероциклов, описанные в литературе до начала наших исследований имеют существенные ограничения и не позволяли получать соединения, несущие сложные заместители в гетероцикле.

Весьма немногочисленные известные представители этого ряда обладают сочетанием свойств, нехарактерных для нативных гормонов — не проявляя гормонального действия такого, например, как подавление иммунитета, они в то же время проявляют высокую антимикробную и противоспалительную активность, нормализуют давление и уменьшают уровень холестерина. Установлено, что для проявления такого действия необходимо наличие заместителя (чаще всего ацильного) у атома азота гетероцикла, сопряженного в 16,17 положениях со стероидным скелетом. Так, андростано-N-ацетилпиразол не проявляет гормонального действия, но обладает уникальным сочетанием биологических свойств.

Проявляя ярко выраженное противовоспалительное действие он полностью лишен тимолитического эффекта и, в то же время, вызывает повышение иммунитета и снижает стрессорное воздействие.

Необходимость развития химии подобных соединений не вызывает сомнения. Это побудило нас обратиться к синтезу неизвестных ранее стероидных [17,16-сЦпиразолинов и пиразолов. Особый интерес при этом могут представлять [17,16-сЦгетероциклостероиды, полученные на основе тиогидразидов оксаминовых кислот Можно было предположить, что объединение в одной молекуле тиогидразидов оксаминовых кислот и хирального стероидного скелета открывает широкие синтетические возможности для получения системных наборов гетероциклостероидов, которые, возможно будут обладать ценными биологическими свойствами.

Диссертационная работа направлена на решение трех основных задач, включающих - разработку удобных общих методов синтеза стероидных [17,16-d]-пиразолинов и пиразолов — производных 16-дегидропрегненолона и тиогидразидов оксаминовых кислот, изучение их реакционной способности и создание на их основе новых структур, среди которых предполагалось выявить вещества с высокой биологической активностью. Существенной частью проведенного исследования было установление строения, и в особенности, стереохимии полученных соединений. Для этого широко использовали физико-химические инструментальные методы. Структуры всех синтезированных стероидов были подтверждены данными масс-спектров и спектров *Н и 13С-ЯМРс использоанием методик COSY, TOCSY, NOESY, HSQC и НМВС.

Нами впервые получены стероидные гидразоны тиогидразидов оксаминовых кислот. Разработан удобный метод синтеза 1М-(тиооксамидо)замещенных стероидных [17а,16а-<1]пиразолинов андростанового ряда. Получены ранее не известные N-(ариламино)оксалил-[17а,1ба-(1]пиразолины андростанового ряда. Впервые систематически изучено взаимодействие 16,17-эпоксипрегн-5-ен-Зр-ол-20-она с гидразидами кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот. Получены не известные ранее 16а- и 1бР-изомеры 5'-метил-(2'-арилкарбамоил)-Зрз 16-дигидроксиспироандрост-5-ен-17,6-[1,3,4]тиадиазины. Впервые изучено взаимодействие а-хлорацетамидов стероидных [17,1б-с1]пиразолов андростанового ряда с элементной серой в присутствии аминов и получены Ы-(тиооксамидо)замещенные стероидные [17а,16а-с1]пиразолы андростанового ряда. Предложен новый десульфуризующий агент — DDQ, позволивший с хорошим выходом получать оксамиды из монотиооксамидов. Установлено, что N-замещенные [17а,16а-с1]гшразолины андростанового ряда проявили активность на уровне сильнейших известных антипаразитарных препаратов.

Таким образом, в результате проведенного нами исследования разработан удобный общий метод получения Ы-(тиооксамидо)- и К-(ариламино)оксалил-замещенных стероидных [17а,16а-с1]пиразолинов и пиразолов андростанового ряда. Впервые систематически изучено взаимодействие 16,17-эпоксипрегн-5-ен-ЗР-ол-20-она с гидразидами кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот. Показана перспективность использования стероидных тиогидразидов оксаминовых кислот в синтезе широкого ряда неизвестных ранее или труднодоступных стероидных гетероциклических структур, среди которых выявлены вещества с высокой биологической активностью, представляющие практический интерес.

Диссертация включает три главы. Литературный обзор (глава I), посвящен способам получения стероидов, конденсированных в 16,17-положениях с разнообразными гетер оциклами. Во второй главе обсуждается синтез ]\Г-(тиооксамидо)- и N-(ариламино)оксалил-замещенных стероидных [17а,16а-с1]пиразолинов и пиразолов андростанового ряда, а также обсуждается возможность их практического применения, (глава П). Третья глава представляет собой экспериментальную часть, в которой собраны основные методики синтеза соединений.

выводы

1. Впервые получены стероидные гидразоны тиогидразидов оксаминовых кислот.

2. Разработан удобный метод синтеза 1Ч-(тиооксамидо)замещенных стероидных [17а,16а-(1]пиразолинов андростанового ряда.

3. Получены ранее не известные 1Ч-(ариламино)оксалил-[17а,16а-(1]пиразолины андростанового ряда.

4. Впервые систематически изучено взаимодействие 16,17-эпоксипрегн-5-ен-Зр~ ол-20-она с гидразидами кислот и тиогидразидами оксаминовых кислот. Получены неизвестные ранее 5'-метил-2'-арилкарбамоил-Зр,16а-дигидроксиспироандрост-5-ен-17,6'-[1,3,4]тиадиазины.

5. Впервые изучено взаимодействие а-хлорацетамидов стероидных [17,16-d]пиразолов андростанового ряда с элементной серой в присутствии аминов и получены 1Ч-(тиооксамидо)замещенные стероидные [17а,16а^]пиразолы андростанового ряда.

6. Предложен новый десульфуризующий агент — DDQ, позволивший с хорошим выходом получать оксамиды из монотиооксамидов.

7. Установлено, что N-замещенные [17,16^]пиразолины андростанового ряда проявили активность на уровне сильнейших известных антипаразитарных препаратов.

1. Abdelhalim М. М., El-Saidi М. М. Т., Rabie S., Elmegeed G. А. / Synthesis of novel steroidal heterocyclic derivatives as antibacterial agents/ Steroids, 2007, 72, 5, 459 - 465.

2. Мерлани M. И., Камертелидзе E. P., Пападополус К., Меньшова H. И. / Синтез из тигогенина и противотуберкулезная активность некоторых производных гидразонов 5 а-кетостероидов/ Биоорг. Хим., 2004, 30, 5, 552-557.

3. Dawidar А. М., Metwally М. A., Abdel-Galil F. М., Berghot М. А. / Ketosteroids: Part П Synthesis of condensed androsteno nitrogen heterocycles/ ItidJ. Chem. Sest. B, 1985, 24B, 1124 - 1128.

4. Amr A. E.; Abdulla, Abdulla M. M. / Anti-inflammatory profile of some synthesized heterocyclic pyridone and pyridine derivatives fused with steroidal structure / Bioorg. med. Chem. 2006, 14, 13, 4341-4352.

5. Китаев Ю. П., Бузыкин Б. И. / Гидразоны/ 1974, М., «Наука», с. 191.

6. Hirschmann Н. / Steroid excretion in a case of adrenocortical carcinoma: I. The isolation of a A5-androstenetriol-3(P),16,17/ J. Biolog. Chem., 1943, 150, 363373.

7. Wettstein A.; Miescher К / Zur Konstitution des Cafestols/ Helvet. Chim. Acta, 1943, 26, 631 -640.

8. Chagonda L. S., Marples B. A. / Peracid Oxidation of 16-Arylidene- and 16-Alkylidene-I 7-oxo-steroids/ J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1988, 875 880.

9. Bridgeman J. E., Butchers С. E., Jones Sir E. R. H. Kasal A, Woodgate D. / Studies in the Steroid Group. Part LXXX. 1 Preparation of 2-and 16-oxo-, and 3,16-and 2,16-Dioxo-5a-androstane, and 2-Oxo-5a-cholestane/ J. Chem. Soc. Sect. C, 1970, 244-250.

10. Hirschmann F. В., Hirschmann H. / Inversions of Both Adjacent Centers in the Formolysis of a 2,2,6-Trialkylcyclohexyl Tosylate. Formation of a 13a-D-Homo Steroid/ J. Org. Chem., 1973, 38, 1270 1275.

11. Amr A. E, Latif N. A, Nehad A.; Abdalla M. M. / Synthesis and antiandrogenic activity of some new 3-substituted androstano17,16-c.-50-aryl-pyrazoline and their derivatives/ Bioorg. Med. Chem., 2006, 14, 2, 373-384.

12. Siddiqui A. U, Siddiqui A. H, ; Ramaiah, T. Sundara / Sinthesis of steroidal heterocyclic compounds fron a claisen condensation product of a 6-keto sterol/ J. Ind. Chem. Soc., 1994, 71, 2, 107 108.

13. Arm A. E. E, Abdula M. M, Synthesis and pharmacological screening of some new pyridine and cyanohexenone fused steroial derivatives/ Ind. J.Het. Chem., 2002,12, 129.

14. Barbieri. W, Consoni A, Sciaky R. / Acid-Catalyzed Cyclization of 21-Benzylidene-16-dehydropregnenolone Acetate/ J. Org. Chem., 1968, 33, 9, 3544-3547.

15. Rapole K. R, Siddiqui A. H, Dayal B, Batta A. K, Rao S. J, Kumar F, Salen G. / Synthesis of Steroidal Pyrimidines/ Synth. Comm., 1996, 26, 18, 3511 -3515.

16. Stefanovic M, Miovi I. V, Jeremi D, Miljkovi D. / Intramolecular cyclization-of 3p-acetoxy-16-picolinylidene-5-androsten-17-one by catalytic hydrogenation/ Tetrahedron, 1970, 2609-2616.

17. Vasuki G, Parthasarathi V., Ramamurthi K, Jindal D. P, Dubey S. / 17-Oxo-16-(2-pyridylmethylene)-androst-5-en-3p-ol monohydrate/ Acta Cryst. Sect. C, 2001, 57, 9, 1062- 1063.

18. Hema. R, Parthasarathi. V, Thamotharan. S, Dubey. S, Jindal. D. P. / 16-(4-Cyanobenzylidene)-17-oxo-androst-5-en-3P-ol/^cto Cryst. Sect. C, 2003, 59, 4, o213 — o215.

19. Dubey S,Jindal D. P., Piplani P. / Synthesis and Antineoplastic activity of some 16-benzylidene substituted steroidal oximes/ Ind. J. Chem. Sect. B, 2005, 44, 10,2126-2137.

20. Ашг А. Е, Latif N. A., Nehad A.; Abdalla М. М. / Synthesis and antiandrogenic activity of some new 3-substituted androstano17,16-c.-50-aryl-pyrazoline and their derivatives/ Bioorg. Med. Chem., 2006, 14, 2, 373 384.

21. Maklad Y. A., Nosseir M. M. /Androgenic and anabolic activities of some newly synthesized epiandrosterone and progesteron derivatives/ Sci. Pharm., 2000, 68, 2, 141 158.

22. Bruckner K., Irmscher K, Werder F. V, Bork К. H, Metz H. / Reaktionen an 16-Methylen- und 16-Hydroxymethylen-17-Keto-steroiden/ Chem. Ber., 1961, 94, 2897 2909.

23. Камерницкий А. В, Павлова-Гришина H. С, Скорова A. B. / Ацилгидразоны а, Р-ненасыщенных кетонов прегнанового ряда/ Изв. АН СССР. Сер. хим., 1980, 5, 1136- 1139.

24. Cazaux J. В., Jacquier R., Mauiy G. / Pyrazolines-2 steroliques: synthese et isomerisation/ Tetrahedron Lett., 1971,41-44.

25. Green B:, Jensen В. L., Lalan P.L. / The synthesis of steroidal 16a,17a-d.-2-pyrazolines and [16,17-d]-pyrazoles/ Tetrahedron, 1978, 34, 1633 — 1639.

26. Slates H. L., Wendler L. / Reaction of Diazomethane with A16-20-Keto Steroids/ J. Am. Chem. Soc., 1959, 81, 5472-5474.

27. Green В., Sheu K. / Synthesis of steroidal D-ring fused pyrazolines: Study of regiochemistry of addition/ Steroids, 1994, 59, 8, 479 484.

28. Mueller G. P., Riegel B. / Derivatives of Steroids Containing a Small Ring. Fused to the D-Ring/ J. Am. Chem. Soc., 1954, 76, 3686 3688.

29. Moore J. A. Holton W. F., Wittl E. L. / The Formation of 1,2-Diazabicyclo 3.2.0.heptenone Derivatives from Steroidal 21-Diazo-16a, 17a-pyrazolines/ J. Am. Chem. Soc., 1962, 84; 390-395.

30. Bladon P, Rae D. R., Tait A. D. / Preparation and Decomposition of Some Steroidal 4'P,5'-Dihydro-I7a,16-c.pyrazoles/ J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1974, 1468 1475.

31. Левина И. С, Куликова JI. Е, Шулишов Е. В, Клименко И. П, Камерницкий А. В., Томилов Ю. В. / Синтез и структура 4',4'диметил16а,17а.спиропентанопрегн-4-ен-3,20-диона/ Изв. АН Сер. хам. 2006, 11, 2040-2042.

32. Mueller G. Р, Riegel В. / Derivatives of Steroids Containing a Small Ring Fused to the D-Ring/ J. Am. Chem. Soc., 1954, 76, 3686 3688.

33. Woelfling J. Magyar A, Schneider G. / Synthesis of Novel D-Seco-Pregnenes/

34. Monatsheftefuer Chemie 2003, 134, 10, 1387- 1394.

35. CatozziN., Bromley W. J, Wasnaire P, Gibson M, Taylor R. J. K. / Improved and Practical Procedures for the Preparation of Highly Substituted Pyridines and Pyridazines via Silica-Mediated Aromatisation/Synlet, 2007, 8, 1311-1313.

36. Szajli A, Woelfling J. / The Synthesis of D-Heteroannulated 3b-Hydroxy-13a-androst-5-ene Derivatives via a-Oxoketene Dithioacetal and a-Oxohydroxymethylidene Synthons/ Monatsh. fuer Chem., 2006, 137, 11, 1431 -1440.

37. Yamauchi T, Moore J. / Heterocyclic Studies. XVIII. Some Reactions of a Steroidal 1,2-Diazabicyclo3.2.0. heptenone/ J. Org. Chem., 1966, 31, 42-46.

38. Laitonjam W. S, Rajkumar T. S, Chingakham B: S. / Synthesis of some A- and D-ring fused steroidal pyrazoles, isoxazoles and pyrimidines/ Steroids, 2002, 67, 203 209.

39. Green B, Crane R. I, Khaidem I. S, Leighton R. S, Newaz S. S, Smyser Т. E. / Synthesis of Steroidal 16,17-Fused Unsaturated б-Lactone/ J. Org. Chem. 1985, 50, 5; 640 644.

40. Tominaga Y. / Synthesis of heterocyclic compounds using carbon disulfide and their products/JHet. Chem., 1989, 26, 1167-1204.

41. Rivera D. G, Peseke K, Jomarron I, Montero A, Molina R, Coll F. / Synthesis of New Pyrazole and Pyrimidine Steroidal Derivatives/ Molecules, 2003, 8, 5, 444 452.

42. Dieter R. K. / a-Oxo ketene dithioacetals and related compounds: versatile three-carbo synthons/ Tetrahedron, 1986, 42, 3029 3032.

43. Siddiqui A. U, Maheshwar Rao V. U, Maimirani M, Siddiqui A. H. / Heterocyclic Steroids: Synthesis of Androsteno 17,16-e.pyrimidines/ J. Het. Chem., 1995, 32 ,1, 353 354.

44. Elmegeed G. A. / Synthesis of Novel Pyrazolo, Pyrimidino and Pyrido Androstane Derivatives of Pharmacological Interest/ Egypt. J. Chem., 2004, 47, 6, 579 590.

45. Morita K, Noguchi S, Hiraga K, Kishi T, Nawa H, Miki T. / Synthesis of Polyhydroxysteroids. V. Preparation and Infrared Spectra of 16p, 20a-Isopropylidenedioxysteroids/ Chem. Pharm. Bull., 1963, 11, 144- 151.

46. Жунгиету Г.И, Дорофеенко Г.Н. / Успехи в области химии стероидных гетероциклов/ Успехи химии, 1967, 36, 1, 48 — 76.

47. Ахрем А. А, Титов Ю. А. / Производные стероидов с конденсированными гетероциклами/ Успехи химии, 1967, 36, 5, 745 776.

48. Barton D, Ollis W. D. / Comprehensive Organic Chemistry/ 1978, v. 27, Oxford, «Pergamon Press», p. 89.

49. Камерницкий А. В, Павлова-Гришина H. С, Скорова A. B. / Нуклеофильное присоединение изомерных стероидных арилазоолефинов/ Изв. АНССС, Сер. хим., 1976, 25, 1353 1358.

50. Ахрем А. А, Камерницкий А. В, Скорова А. В. / Трансформированные стероиды. Сообщение 25. Структурная и пространственная направленность гидролиза и ацетолиза 16,17-окиси дегидропрегненолона/ Изв. АН СССР, Сер. хим., 1970, 654 156.

51. Marker R. Е. / Steroidal Sapogenins. No. 167. Pregnene Derivatives from Nologenin/ J. Am. Chem. Soc., 1947, 69, 2395-2402.

52. Girdhar N. K., Faruk A., Suri K. A, Ishar M. P. S. / Photo trans formation of 16a, 17a-epoxy-3P-hydroxypregn- 5-ene-20-one to 3p-hydroxypregn-5-ene-16,20-dione/ Ind. J. Chem. Sect.B, 2007, 46, 1, 192-194.

53. Morita K, Shunsaku N, Hiraga K, Kishi T, Nawa H, Miki T. / Synthesis of Polyhyhydroxysteroids. V. Preparation and Infrared Spectra of 160,20a-Isopropylidenedioxids/ Chem. Pharm. Bull., 1963, 11, 144- 148.

54. Levine S. G, Wall M. E. / Steroidal Sapogenins. LI. Reaction of Steroidal Olefins with Acetyl Hypobromit/ J. Am. Chem. Soc., 1959, 81, 2826 2828.

55. Ахрем А. А, Камерницкий А. В, Скорова А. В, Дубровский В. A. / Обратимый и необратимый электронные сдвиги в реакциях стероидных 20-кето-16,17-окисей с гидразингидратом/ Изв. АН СССР, Сер. Хим., 1968, 2807-2810.

56. Terekhinal A. I, Gritsinal G. I, Kamernitskiil А. V, Lisitsal L. I, Neshchadiml N. N, Pavlova-Grishinal N. S, Skorova A. V. / Pharm. Chem. J., 1976, 10, 9, 1164- 1167.

57. Ахрем А. А, Камерницкий А. В, Скорова А. В, Павлова-Гришина H. C. / Изомеризация стероидных 20-азоолефинов гидразонов и синтез 16,17-с.-арилпиразолов андростанового ряда/ Изв. АН СССР. Сер. хим., 1973, 4, 901-906.

58. Kessar S.V, Rampal A. L. /Synthetic studies in steroidal sapogenins and alkaloids—III: The synthesis and stereochemistry of isomeric 16-hydroxy- and 16-oxo-5,17(20)-pregnadien-3P-ols/ Tetrahedron, 1968, 24, 887-892.

59. Ахрем А. А, Камерницкий А. В, Павлова-Гришина H. С. / Превращения стрероидов сообщение 36. Синтез и расктытие 20-карбоэтоксигидразона 16а-дейтеродегидропрегненолона 16Р, 17Р-окиси/ Изв. АН СССР, Сер. хим., 1971, 20, 2546 2547.

60. Akhrem A. A, Dubrovsky V. A, Kamernitskii А. V. Skorova А. V. / Transformed steroids-XX. Direction of the oxide cycle opening of the stereoisomeric 16,17-oxides of dehydropregnenolone 20-hydrazone/ Tetrahedron, 1965, 25, 4137-4742.

61. Fevig T. L., Mao M. K., Kazenellenbogen J. A. / Estrogen receptor binding tolerance of 16a-substituted estradiol derivatives/ Steroids, 1988, 51, 5-6, 471 -498.

62. Schneider G., Vass A., Vincze I., Sohar P. / Steroids, XXXVII. Neighbouring Group Participation, VIII Neighbouring Group Participation in the 16-Hydroxymethyl-3-methoxyestra-l,3,5(10)-trien-17p-ol Series/ Liebigs Annalen der Chemie, 1988, 267 274.

63. Yoshioka K., Goto G., Mabuchi H., Hiraga K., Miki T. / Studies on antiandrogenic agents. Synthesis of 16a-ethyl-19-nortestosterone/ Chem. Pharm. Bull., 1975, 23, 3203 3207.

64. Harnik M., Hurzeler E., Jensen E. V. / Acetylation and trifluoroacetylation of steroids at carbon 16/ Tetrahedron, 1967, 23, 335 340.

65. Sweet F., Boyd J., Medina O., Konderski L., Murdock G. L. / Hydrogen Bonding in Steroidogenesis: Studies on New Heterocyclic Analogs of Estrone that Inhibit Human Estradiol 17P-Dehydrogenase/ Biochem. Biophys. Research Comm., 1991, 180, 2, 1057-1063.

66. Robinson С. H., Bruce N. F., Oliveto E. P. / Steroidal 17,16-c.Pyrazoles/ J. Med. Chem., 1963, 6, 793 794.

67. Siddiqui, A. H.; Satyanarayana, Y.; Srinivas, M.'; Rajeshwar, K.; JICSAH/ Synthesis of steroidal heterocyclic compounds from a Claisen condensation prouct of a 6-keto sterol/ J. Ind. Chem. Soc., 1992, 69, 12, 846 848.

68. Suresh J. R., Barun O., Junjappa H. / a-Oxoketene Dithioacetals Mediated Benzoannelation of Aromatic Heterocycles: an Efficient Regiocontrolled Synthesis of Highly Substituted and Polycyclic Benzob.thiophenes/ Tetrahedron, 2000, 56, 8153-8160.

69. Myrboh В., Junjappa H. / Polarized Ketene Dithioacetals. 28. A New General Highly Stereoselective and Regiospecific Method for Homologation of Ketones to a,P-Unsaturated Esters via a-Oxoketene Dithioacetals/ J. Org. Chem., 1983,48, 5327-5332.

70. Chauhan S. M. S., Junjappa H. / Ketene-S,S-acetals-V: The reactions of a-keto and a-cyanoketene-S,S-acetals with guanidine and thiourea: a new general synthesis of alkoxy-pyrimidines/ Tetrahedron, 1976, 32, 1779-1787.

71. Posner G. H, Brunelle D. J. / Reaction of lithium dialkylcuprates withp-alkoxy and P-alkylthio -unsaturated carbonyl compounds/ J. Chem. SOC., Chem. Commun., 1973, 907 908.

72. Kobayashi S., Mukaiyama T. / The stereospecific preparation of methyl farnesoate and synthetic precursors of Cis- and C17 juvenile hormones/ Chem. Lett., 1974, 3, 12, 1425 1428.

73. Gupta A. K, Mallik У. K, Balaram P, Hiriyakkanavar I, Hiriyakkanavar J. / Synthesis of D-Ring Functionalized and D-Benzo/Hetero-Annulated Estrone Derivatives via a-Oxoketene Dithioacetal/ Synthesis, 1995, 7, 841 844.

74. Woelfling J, Mernyak E.; Forgo P, Schneider G. / Stereoselective halogenation of the 16-hydroxymethyl-3-methoxy-13a.-estra-l,3,5(10)-trien-17-ols and their solvolytic investigation/ Steroids, 2003, 68, 5, 451 -458.

75. Woelfling J, Mernyak E., Frank E, Falkay G., Marki A., Minorics R, Schneider G. / Synthesis and receptor-binding examinations of the normal and 13-epz-D-homoestrones and their 3-methyl ethers/ Steroids, 2003, 68, 3, 277288.

76. Frank E, Wolfling J., Aukszi В , Konig V, Schneider T. R., Schneider G. / Stereoselective synthesis of some novel heterocyclic estrone derivatives by intramolecular 1,3-dipolar cycloaddition/ Thethrahedron, 2002, 58, 6843 -6849.

77. Catsoulacos P, Souli E. / Steroidal imidazo-pyridines/ Bull. Soc. Chim. Fr., 1975, 2313-2314.87. .Toja E., Guzzi U. / Synthesis of estra-l,3,5(10)trieno17,16-d.imidazoles/ Farmaco Ed. Sci., 1974, 29, 727 732.

78. Catsoulacos P, Souli E. / Steroidal imidazo-pyridines/ J. Het. Chem., 1974, 11, 87-88.

79. Шаранин Ю. А, Литвинов В. П, Клокол Г. В, Богданов В. С, Камерницкий А. В. / Конеднсированные пиридины. Сообщение 5. Синтез и превращения 3 '-циано-5а-андростено17,16^.пиридин-2'(1н)-тиона/ Изв. АН СССР. Сер. хим., 1986, 7, 1656 1659.

80. Utpal S, Shahadat A, Romesh С. В. / A facile synthesis of annelated pyridinesfrom P-formyl enamides under microwave irradiation/ Tetrahedron Lett., 2000, 41, 18, 3493-3495.

81. Шаранин Ю. А, Пономаренков В. К, Шестопалов А. М. / Реакции циклизации нитрилов V. 2-Арил-3-(2-теноил)-1,1-дицианопропаны и производные пиридинов на их основе/Ж Орг. Хим., 1982, 18, 630 138.

82. Шестопалов А. М, Промоненков В. К, Шаранин Ю. А, Родиновская JI. А, Шаранин С. Ю. / Реакции циклизации нитрилов IX. Синтез на основе 2-арил-3-ароил-1,1-дицианопропанов/Ж Орг. Хим., 1984, 20, 1517.

83. Litvinov V. P., Mortikov V. Yu, Sharanin Yu. A, Shestopalov A. M. / Condensed Pyridines; 1. A Convenient Method for Synthesis of Novel 3-Cyanopyridine-2(lH)-selenones and 3-Aminoselenolo 2,3-b.pyridines/ Syntesis, 1985, 1, 98 100.

84. Шаранин Ю. А, Клокол Г. В, / Реакция циклизации нитрилов. 28. Синтез и реации ЗР-ацетокси-2'-метил5'-цианоандрост-5-ено- 17,16-с.пиридин-б'(1'Н)-тиона/ХГС, 1988, 24, 7, 943 946.

85. Шаранин Ю. А, Клокол Г. В, / Синтез 2'-метил-5'-циано-ЗР-ацетоксиандрост-5-ено и алкилирование их хлорацетонитрилом/ Химия природы, соедин., 1988, 24, 1,138 139.

86. CatozziN, Bromley W,J, Wasnaire P, Gibson M, Taylor R, J. K. / Improved and Practical Procedures for the Preparation of Highly Substituted Pyridines and Pyridazines via Silica-Mediated Aromatisation/ Synlett, 2007, 14, 2217 2221.

87. Hassner A, Haddadin M. J. / Synthesis of Quinolino Steroids/ J. Org. Chem., 1962, 27, 1911 1913.

88. Magyar A, Wolfling J., Kubas M:, Seijo J. A. G., Sewana M, Herbst-Irmer R, Forgo P, Schneider G. / Synthesis of novel steroid-tetrahydroquinoline hybrid molecules and D-homosteroids by intramolecular cyclization reactions/ Steroids, 2004, 69, 301 312.

89. Wolfling J., Frank Ё, Schneider G, Tietze L. F. / Synthesis of novel steroid alkaloids by cyclization of arylimines from estrone/ Eur. J. Org. Chem., 1999,3013-3020.

90. Wolfling J., Frank Ё., Schneider G, Bes M. T, Tietze L. F. / Synthesis of azasteroids and D-homosteroids by intramolecular cyclisation reactions of steroid arylimines/ Synlett, 1998, 1205 1206.

91. Yoshizawa J, Tomoeda M. / Studies on Conformation and Reactivity. Bart 1x2 Stereochemical Aspects of the Diels-Alder Reaction of Diethyl Amodicarboxylate with Steroid Dienes/ J. Chem. Soc. Sect. C, 1971, 1741 — 1746.

92. Tomoeda M, Yoshizawa J. / The synthesis and its ord and cd study of new steroidal heterocycles with a 4-oxoperhydropyridazine system fused to ring D/ Tetrahedron Lett., 1967, 975 979.

93. Skoda-Foeldes R, Kollar L. / Facile Synthesis of Steroidal 16,17-c.Tetrahydropyridazine Derivatives by One-Pot Stille Coupling and Hetero-Diels-Alder Reactions / Synthesis, 2006, 17, 2939 2943.

94. Forgo P, Vincze I. / Syntheses and advanced NMR structure determination of androsteno-17,16-d.-pyrimidine derivatives/ Steroids, 2002, 61, 749 756.

95. Bajwa J.S, Sykes P.J. / Steroidal Heterocycles: 2-Thiocyanatoandrosteno-3,2-d. pyrimidines and -[I 7,16-d]pyrimidines/ J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, 1978, 1618-1620.

96. Matsumoto T, Watanabe M, Mataka S, Thiemann T. / Estrano17,16-e.pyrimidine-peptide conjugates/ Steroids, 2003, 68, 9, 751 -758.

97. Baran P. S, Shenvi R. A, Nguyen S. A. / One-Step Syntesis of 4,5-Disubstituted Pyrimidines Using Commercially Available and Inexpensive/ Heterocycles, 2006, 70, 581 586.

98. Cresswell R. M, Maurer H. K, Strauss T, Brown G. B. / Purine N-Oxides. XIV. A Total Synthesis of a Pyrimidine N-Oxide, a Pteridine 1-N-Oxide, and Xanthine З-N-Oxidel/ J. Org. Chem., 1965, 30,408-410.

99. Romo J, Rodriguez-Halm L, Jimenez M. / Synthesis of steroidal pyrimidine N-oxides/ Can. J. Chem., 1968,46, 2807 2815.

100. Заварзин И.В, Краюшкин M.M, Яровенко В.Н. / Синтез и реакционная способность монотиооксамидов и тиогидразидов оксаминовых кислот/ Изв. АН, Сер. хим., 2004, 3, 491.

101. Inhoffen Н. Н, Blomeyer F, Bruckner К. / Untersuchungen an Steroiden XL: Darstellung von 16-Oxy-pregnan-Verbindungen/ Chem. Ber., 1954, 87, 593.

102. Levine S. G, Wall M. E. / Steroidal Sapogenins. LI. Reaction of Steroidal Olefins with Acetyl Hypobromite/ J. Am. Chem. Soc., 1959, 81, 11, 2826-2829.

103. Julian P. L, Meyer E. W„ Karpel W. J, Waller I. R. / Sterols. XI. 17a-Hydroxy-ll-desoxycorticosterone (Reichstein's Substance S)/ J. Amer. Chem. Soc., 1950, 72, 5145-5147.

104. Loken B, Kaufmann S., Rosenkranz G, Sondheimer F. / Steroids. LXXVII.l Synthesis and Reactions of 16|3-Oxygenated Pregnan-20-one Derivatives/ J. Am. Chem. Soc., 1956, 78, 1738-1741.