Синтез высокоразветвленных регулярных олигосахаридов тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.03 ВАК РФ

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ ОРГАНИЧЕСКОЙ ХИМИИ им. Н.Д. ЗЕЛИНСКОГО

На правах рукописи

РГБ ОД

АБРОНИНА ПОЛИНА ИГОРЕВНА ,

I * 7 ДПР 2303

СИНТЕЗ ВЫСОКОРАЗВЕТВЛЕННЫХ РЕГУЛЯРНЫХ ОЛИГОСАХАРИДОВ

02.00.03 - органическая химия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Москва 2000

Работа выполнена в Лаборатории химии углеводов Института органической химии им. Н. Д. Зелинского.

Научный руководитель:

доктор химических наук, профессор Л. В. Бакиновский Официальные оппоненты:

д.х.н. Я. В. Возный (ИОХ им. Н. Д. Зелинского РАН);

к.х.н. Н. Э. Байрамова (ИБХ им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН) Ведущая организация:

Химический факультет Московского педагогического государственно университета.

Защита диссертации состоится 2 У апреля 2000 г. в часов на заседай Диссертационного совета К002.62.02 по присуждению ученой степени кандида химических наук в Институте органической химии имени Н. Д. Зелинского Р/ по адресу: 117913, Москва, Ленинский проспект, д. 47.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ИОХ РАН. Автореферат разослан 21 марта 2000 г.

Ученый секретарь Диссертационного

совета, доктор химических наук

Л /I /~\

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы

Синтез высокоразветвленных (дендритных) структур — одно из новых и ггенсивно развивающихся направлений современной органической химии. К единениям этого класса относятся и так называемые гликодендримеры. звестны гликодендримеры, в которых углеводы составляют периферию и «соединены к неуглеводной "сердцевине". Показано, что они обладают лыней биологической активностью по сравнению с линейными структурами, в стности, служат антигенами и ингибиторами взаимодействия лектинов с неводами. Другой пример — это молекулы, в которых углеводы образуют и риферию и "сердцевину"; их природными представителями являются гсокоразветвленные олиго- и полисахариды. Следует отметить, что число работ, »священных синтезу структур второго типа, содержащих высокоразветвленные мгосахаридные фрагменты, весьма невелико. Вместе с тем, разработка «дходов к получению таких гликодендримеров является актуальной для льнейшего изучения углевод-белкового взаимодействия.

Цель работы

Целью исследования являлся блочный синтез высокоразветвленных гулярных олигосахаридов с замещениями в положениях 3 и 6. В качестве зносахарида, составляющего скелет будущих олигосахаридов, выбрана Б-шнопираноза, и манноолигосахариды можно, таким образом, рассматривать 1К модели углеводных цепей ./У-гликоггротеинов. Для синтеза подобных мгосахаридов методом тритил—цианоэтилиденовой конденсации необходимо ало получить, во-первых, разветвленный трисахаридный гликозил-донор, во-орых, олигосахаридные тритиловые эфиры Сахаров как гликозил-акцепторы, и третьих, осуществить их конденсацию. Кроме того, для перехода к структурам с лыпей степенью разветвления необходимо было синтезировать разветвленные мгосахариды с избирательно удаляемыми защитными группами.

Научная новизна и практическая ценность работы

Методом тритил-цианоэтюхиденовой конденсации синтезированы .юокоразветвленные регулярные олигоманнозиды, содержащие остатки 3 и 6-мещенной маннозы.

Показана эффективность разветвленного трисахарида цианоэтилиденового юизводного как гликозил-донора.

Осуществлен направленный синтез моно- и дитритиловых эфиров мон ди- и триманнозидов, служащих гликозил-акцепторами.

На основе конденсации разветвленного трясахаридного гликозил-донор; тритилоеыми эфирами синтезированы защищенные изомерные тетра-, пента-гексаманнозиды, а также гепта- и нонасахариды. Все одигосахариды получе) также в свободном шзде и подробно охарактеризованы методами 1D и 20-ЯМ спектроскопии, что может бьпъ использовано для установления структуры такс типа соединений.

Синтезированы избирательно защищенные трисахаридные гликозь доноры на основе цианоэтилвденового производного с хлоращетильной силильной защитными грушами. Установлено, что силильная защитная хруп устойчива в условиях тритил-цианоэгилиденовой конденсации. Осуществл первый синтез разветвленных олигосахаридов с избирательно удаляемы] защитными группами, что открывает путь к созданию дендрита: олигосахаридов с большей степенью разветвления.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы ("Сшп дендримеров"), обсуждения полученных результатов ("Синт высокоразветвленных регулярных олигосахаридов"), экспериментальной чао выводов и списка цитируемой литературы ( 130 ссылок). Общий объ диссертации 12 6 страниц. В работе содержится 12 таблиц и 7 рисунков.

Апробация работы

Отдельные части работы докладывались на конкурсе молодых ученых ИС им. Н.Д. Зелинского РАН (1997), на 8 Симпозиуме по химии углевод (Смоленицы, Словакия, 1997), на конференции по химии углевод Королевского общества (Бирмингем, Англия, 1998), а также на X Менделеевском съезде по общей и прикладной химии химии (Санкт-Петерб) 1998).

Содержание работы Синтез трисахаридкого гдикозил-донора-4-О-аиегил-З.б-ди-0-(2.3.4.6-тетоа-0-адетил-а-Р-маннопиранозил)-1г2-0-[1-(экзо-пиано>этилиден1-р-Р-

маннопиранозм

Синтез трисахаридного цианоэтилиденового производного (см. схему 1 предусматривал превращение известного триацетата цианоэтилиденовоп производного D-маннозы (1) в триол (2) и его избирательное гликозшшрование

Реакция триола 2 с 3.5 экв. ацетобромманнозы (3) привела к гсахаридному цианоэтшщденовому производному 4, выделенному после тоночной хроматографии с выходом 62%. Для того, чтобы превратить этот гсахарищ в потенциальный гликозил-донор, необходимо защитить свободную 1роксильную группу. При ацетилировании соединения 4 действием Ас20 в ридине в присутствии 4-диметиламинопиридина (DMAP) получен исталлический нонаацетат 5.

Схема 1

J Br

Следует отметить, что при большем избытке ацетобромманнозы икозилированию подвергалась и ОН-группа в положении 4. Так, при анмодействии триола 2 с 4 зкв. ацетобромманнозы (3) в тех же условиях после 'оматографии был выделен хроматографически однородный продукт, который :азался, судя по данным ЯМР, смесью три- (4) и тетра-(б) сахаридов. После (етилирования АсгО в пиридине в присутствии ОМАР полученный трисахарид можно было легко выделить кристаллизацией с 42% выходом. Хроматография сточного раствора дала 16% тетрасахаридного цианоэтилиденового

производного. Строение соединений 4-6 однозначно следовало из данных Ш-20-спектроскопии 'Н и 13С ЯМР.

Для оценки гликозшшрующей способности трисахаридн цианоэтилиденового производного 5 была проведена его конденсация с мел 2,3,4-три-0-ацетил-6-0-тритил-а-0-маннош1ранозидои 7 в дихлорметане присутствии перхлората трифенилметилия как катализатора с применен* вакуумной техники.

Строение выделенного с выходом 56% сполна защищенного тетрасахарид 8 подтверждено данными Ш- и 20-спектроскогаш ЯМР.

Таким образом, тригил-цианоэтилиденовая конденсация с использование! трисахаридного цианоэгшшденового производного 5 в качестве гликозил-донор представляется перспективной для направленного синтеза высокоразветвленны манноолигосахаридов.

Гликозилирование триталовых эфиров моносахаридов разветвленным трисахзрилным инанозтнлнденовыи производным

На примере синтеза производных тетрасахарида 11 и гептасахарида 13, 'Лученных путем избирательного введения одного или одновременно двух исахаридных фрагментов в молекулу моносахаридного акцептора, показаны зможности применения тритил-цианоэтилиденовой конденсации для 1лучения высокоразветтиенных олигосахаридов.

Ранее в нашей лаборатории при исследовании относительной реакционной особности тритиловых эфиров Сахаров в тритил-цианоэтилиденовой иденсации бьшо установлено, что вторичные тригаловые эфиры обладают отьшей реакционной способностью по сравнению с первичными. Таким ¡разом, мы ожидали, что взаимодействие трисахарида 5 с гликозил-акцептором (приведет к 1-3—связанному тетрасахариду.

Действительно, гликозилирование дитритилового эфира 10 эквимольным шичеством цианоэтилиденового производного 5 в стандартных условиях итил-цианоэтилиденовой конденсации, т.е. в дихлорметане в присутствии 0.1 з. перхлората трифенилметилня в качестве катализатора с применением

вакуумной техники, привело с выходом 55% к производному разветвленно тетрасахарида 11, изомерному соединению 8. •

При использовании двукратного количества гликозил-донора 5 в реакциях гликозил-акцепторами 10 и 12 с примерно одинаковыми выходами (~ 60%) бы: получены производные разветвленных гелтасахаридов 13 и 14.

Строение полученных защищенных олигосахаридов 11,13,14 следовало аналитических и спектральных данных.

Таким образом, избирательность глшсозилирования первично-вторичн] дитритиловых эфиров Сахаров в пользу вторичного акцепторного участка наш убедительное подтверждение еще на одном примере, при использован] разветвленного гликозил-донора. Отметим, что в соединении 11 сохраняется > тритильная группа, что позволило нам в дальнейшем использовать его к гликозил-акцептор для наращивания углеводной цепи по 0-6 остатка а.

Синтез тритиловых эфиров маннобяозидов и маннотриозидов, пр^-тпрстврннико высших маииоолигосахаридов

Разнообразие структур, которые можно синтезировать с применение» указанного выше гликозил-донора, будет определяться строением гликозил

цепгоров. Для синтеза олигосахаридов с разной степенью разветвления обходимо было синтезировать не только моносахаридные гликозил-цепторы, но и олигосахаридные аналоги.

В качестве исходного соединения мы использовали метил-2,4-ди- О-ацетал-6-ди-0-тритил-а-О-маннопиранозид 10. Было изучено его моно- и бис-зпсозилирование такими гаихозил-донорами, как 2,3,4,6-тетра-О-ацегил-а-О-шнопиранозилбромид 3 (ацегобромманноза) и 2,3,4,б-тетра-0-бензоил-а-о-шнопиранозилбромид 16 (бензобромманноза). Реакция дитритилового эфира ) с 1 экв. ацетобромманнозы 3 в условиях реакции Бредерека [CH2CI2, мфторметансульфонаг (трифлат) серебра] дала хроматографически однородный эодукт , который оказался, судя по данным спектроскопии ЯМР, смесью (- 2:1) ->3)- и (1->б)-связанных дисахаридов.

ТгО^Х ОАс BzOX

J \ ОАС вги у

АсО ТгО

AgOTT

Ю ОМг 16 ¿r

ОАс

ОМе

¿Л

ОАс

ВгО 7 " 18

^-У ВгО ТУОД^-Л

0№

Смесь (1-»3)- и (1-»б)-связанных дисахаридов образуется и при гикозилировании дитритилового эфира 10 эквимольным количеством ;нзобромманнозы 16 в присутствии трифлата серебра, однако продукты реакции 7 и 18 можно было легко разделить хроматографией, их выходы составили 33 и 5% соответственно.

Можно отметить, что и в этих случаях сохраняется преимущественное шкозилирование первично-вторичного дитритилового эфира по вторичной >итилоксигруппе. Строение полученных дисахаридов доказано с помощью МР-спектросхопии.

Полученные дисахаридные производные 17 и 18 содержат 0-тритильную >уппу, а следовательно могут быть использованы как новые гликозил-акцепторы

в гликозилировании упомянутым выше трисахаридным гликозил-донором 5. Тг 1-3—связанный дисахарид 17 был превращен в дальнейшем в пентасахар! Кроме того, соединение 17 использовалось для синтеза трисахариднс гликозил-акцептора. Введение остатка О-маннопиранозы с О-ацетильньп защитными группами делало возможным избирательно удалить эти группы полученных трксахаридах и затем провести тритилирование единствен» первичноспиртовой группы.

Реакция тритилового эфира 17 с гликозилбромидом 3 в присутств) трифлата серебра привела к трисахариду 19 с выходом 56%.

Его строение следовало из способа синтеза и подтверждено данньв спектроскопии ЯМР.

Трисахарвд 19 был превращен в монотритиловый эфир 20. Для это действием НС1/МеОН в соединении 19 избирательно удалили ацетилып защитные группы, не затрагивая бензоильные. Продукт 0-дезацетилирован: тритилировали действием избытка ТгС1 в пиридине и без выделен

3

Вг

>рабатывали избытком Ас^О. Выход целевого тритилового эфира 20, оделенного хроматографией, составил 75%, на три стадии.

ВгО^Л 0Вя

ОМе

\ ОАс ■п-о-А^—

18 ОМе

ревращение тритилового эфира 18 в трисахарид 22, изомерный трисахариду 19 лло осуществлено гликозилированием этого тритилового эфира действием 1,2--цианоэтилиденового производного маннозы 1 в стандартных условиях тритил-яаноэтилиденовой конденсации. Выход трисахарида 22 составил 56%. То же »единение получено с близким выходом и при гликозилировании 6-тритилового £жра дисахарида 21 гликозилбромидом 16 в условиях реакции Бредерека.

1. НО/МеОН

2. ТгС1Л?у

3. ас20

ОИе

Переход от сполна ацилированного трисахарида 22 к тритиловому эфиру 23 :ущсствлен по той же схеме, которая была использована при синтезе зитилового эфира 20 (мягкий кислотный метанолиз, тритилирование и метилирование). Выход целевого продукта составил 56%.

Полученные эфиры мегилманнобиозидов (17 н 18) и метилманнотриозид (20 и 23) содержат уходящую тритильную группу только на одном из концев: остатков, что позволяет наращивать цепь по 3 либо 6 положеш "восстанавливающего" маннозного остатка. Таким образом, эти гликози акцепторы являются предшественниками высших разветвлен» олигоманнозидов, так сказать, "несимметричной" структуры. Для получен предшественников "симметричных" олигоманнозидов, в которых централью остаток маннозы замещен одинаковым образом по 0-3 и 0-6, мы осуществи синтез 6')6"-дапршиловых эфиров метилманнотриозида 26 и этил-тиоманнотриозида 30. Выбор последнего обусловлен принципиаль» возможностью использовать тиогликозид как гликозил-донор ли непосредственно, либо после превращения в другой гликозилирующий агент.

Схема 2

АсО'Л

АсО^ АсО-

О \ ОАс

зЫа

ТгО

АсО ТгС

3 (А;>ОТ0 /1 (ТГСЮ4)

10

ОМе

10

»А ОАс

АсО^у ОАс

1. МсОИа/МсОН

24

ОШ

ОАс

ОМе

АсО

ТгО.,у ОАс

26

Предшественником "симметричных" олигосахаридов является дитритилов! эфир 10 (Схема 2). Его бисгликозилирование такими гликозил-донорами к ацетобромманноза 3, 1,2-0-(1-циано)эталиденовое производное 1 и. бензобромманноза 17 во всех случаях привело к трисахаридам, содержали одинаковым образом защищенные концевые невосстанавливающие остат маннозы. Выходы метилтриозида 24 составили -50% (из 3) и 80% (из 1).

и

Трисахарид 25 получен с выходом -70% (Схема 2). Именно последний и ыл использован для синтеза дитритилового эфира 26. Дезацилирование сполна мцшценного трисахарида по Земплену, тритилирование свободного :етилтриозида действием 3.5 экв. ТгС1 и ацетилирование привели к целевому родукзу с выходом 50%.

Анализ спектров ЯМР 'Я метллтриозидов 19,20,22 и 23—26 показал, что нгналы аномерных протонов маннозных остатков с 1-»3-связью находятся в олее слабом поле, чем сигналы Н-1 остатков 1 ->6-связью с теми же заиштными эуппами. Та же тенденция наблюдается и в отношении сигналов аномерных гомов углерода в спектрах ЯМР 13С. Ранее подобная закономерность аблюдалась для свободных манноолигосахаридов.

Синтез тиогликозидного аналога соединения 26, дитритилового эфира 30, ровели аналогичным образом.

ОАс

1. МсОЧа /МеОН

2. ТгС1 / Ру т0-"\

41% и» ---------

27 ¿и 3 стадии

2« вВ

1. Ва«ОЮМеОН

2. ТЮ/Ру

3. А.с20

58%

29

ВхО-' ОВх

ОАс

АсО^/^Ц/ ТУО^у ОАс

ев

30

Вначале этил-2,3,4,6-тетра-0-ацетил-1-тио-а-в-маннопиранозид 27 гзацетилировали и свободный тиогликозид превратили в 3,6-дюритиловый £ир в условиях, предложенных для тритилирования метил-а-О-маннопиранозида, е. реакцией с 3 экв. ТгС1 в пиридине при 60°С в течение 18 часов. Из полученной леей продуктов датритиловый эфир выделен колоночной хроматографией на

силикагеле и превращен в целевой диацегат 28 ацетшшрованием Ас%О присутствии ОМАР. Его строение установлено с помощью ЯМ Р-спектроско пии.

Бисгликозилирование полученного дитритилового эфира 28 гликозилбромидс 16 в присутствии AgOTf как промотора привело к трисахариду 29.

Дезацшшрование сполна защищенного эгалтиотриозида 29, тритилирование ацегшшрование привели к целевому дтритиловому эфиру 30. Данные мае спектрометрии подтверждают его молекулярную массу, а сходство (поч идентичность) спектра ЯМР 'Н со спектром дитритилового эфира 26 — е строение.

Блочный синтез разветвленных маинопента-, -гекса- и -нопаозидов

Синтез пентасахарида 31 был осуществлен по схеме (1+4), исходя монотритилового эфира тетрасахарида 11, который использовали в качест гликозил-акцегггора при конденсации с 2,3,4,6-тетра- 0-бензоил-а-

ннопиранозилбромидом 16 в присутствии трифлата серебра и 2,4,6-коллидина, ход продукта составил 47%.

Блочный синтез сполна защищенных олигозидов методом тритил-аноэтилиденовой конденсации бьш осуществлен с использованием тритиловых «ров 17,20,23,26,30 как гликоз ил-акцепторов и цианоэтилиденового оизводного 5 как гликозил-донора.

Гибкость стратегии синтеза несимметричных олигосахаридов, зличающихся характером замещения, иллюстрируется получением нтасахарида 32, и двух изомерных гексасахаридов (33-34).

При конденсации гликозил-донора 5 с дисахаридным акцептором 17 (3+2) в шдартных условиях тритил-цианоэтилиденовой конденсации был получен олна защищенный пентаозид 32, изомерный пентасахариду 31, с выходом 66% еле хроматографии.

32. }1»Ас, Л1=В2 38. К=Я1=Н

Схема 3

Схема 4

В аналогичных условиях тритил-цианоэтилиденовой конденсации икозилирование двух изомерных трисахаридных монотритиловых эфиров 20 и I эквивалентным количеством цианоэтилиденового производного 5 привело к голна защищенным изомерным гексаозидам (33, 58%) и 34 (60%) (3+3)

(Схема 3). Полученные лента- и гексаозиды представляют собой несимметрич! построенные олигосахариды, в которых моно- и три-(тетра-) сахаридш "концевые" остатки замещают 3 или 6 положение невосстанавливающего остап маннозы.

Самые крупные олигосахариды, синтезированные в данной работе — э' нонасахариды 35 и 41. При взаимодействии трисахаридного тликозил-донора 5 дитритиловыми эфирами метилманнозида 26 и этилтиоманнозида 30 (моль» соотношение 2:1) получены нонаозиды 35 (50%) и 36 (54%) (3x2+; соответственно (Схема 4). Образование нонаозида 36 доказывает устойчивое алкилтиогликозвдов в условиях тритил-цианоэтилиденовой конденсации является еще одним примером ортогонального гликозшшрования. Э соединения, также как и гептасахарид 13, можно отнести к симметрии построенным олигосахаридам, в которых центральный остаток маннозы замевд одинаковым образом по положению 3 и 6 "центрального" остатка маннозы.

Удаление 0-ацилышх защитных групп в полученных олигосахаридах i Земплену привело к свободным гликозидам 9,15,37—42 с выходами, близкими количественным.

Строение всех полученных защищенных и свободных олигозидов следова из метода их синтеза и было подтверждено данными спектроскопии ЯМР !Н «С, а также данными масс-спеирометрии.

В целом, спектры ЯМР могут служить надежной характеристик! синтезированных олигосахарвдов, содержащих однотипные элементы структур Удается выявить не только общее количество аномерных атомов Н и С, но соотношение слабопольных (1-3-связь) и высокопольных (1-б-связь) сигналов, области резонанса аномерных атомов С отчетливо видны две группы сигналов: ~ 103—104 м.д.ддя 1-3-связанных и 5 ~100—101 м.д. для 1-6-связанных звены Положение сигнала концевого невосстанавливающего звена достаточ консервативно: 8 ~ 102 м.д.

Таким образом, был осуществлен синтез изомерных тетра-, пента-гексасахаридов, а также гептасахаридов и нонасахаридов.

Синтез избирательно защищенных цианоэтидиденовых производных разветвленного трисахарида

ВгО В/О

ЯО^Ч ОВ/

АсО

Е&С О

сэт о о

ВгО ВгО

--------43. Е=СОСИ2С.

44. ^¡РЬгВи*

ОВг

Для перехода к структурам с большей степенью разветвления была начата зработка подходов к синтезу избирательно защищенных трисахаридных якозил-доноров. Мы осуществили синтез аналогов цианоэтилиденового оизводното 5, в положениях 6'и 6" которого присутствуют хлорацетильные $) и силильные (44) группы.

Синтез 4-0-аиетил-3.6-ди-0-(2.3,4-трн-0-бензоил-6-0-хлораиетил-а-Р-маннопираиозил1-1,2-(?-[1-(э1ао-пиано)зтилиден]-р-Р-маннопиранозы

В синтезе соединения 43 использовали тот же подход, что и при лучении производного 5. Бисгликозилирование триола 2 6-<?-хлорацетил-2,3,4-и-0-бензоил-а,р-0-маннопиранозилбромидом 45 в присутствии солей ртути по трисахарид 46 с выходом 48%.

аснгсо'

ВгО' ВгО

Н3С СУ

г

асщсо

В^сю,

ОВг -О

« Вг

аа%со

46. к=п 43. К=Ас

Для превращения полученного соединения в потенциалы трисахаридный гликозил-донор необходимо было провести ацетшшрова] гидроксильной группы. Однако в условиях ацетилирования действием Ас20 в и последующей обработки хлорацетильная группа оказалась лабильной, и вы продукта 43 не превышал 30%, поэтому мы решили отказаться от дальнейш использования полученного соединения в пользу трисахарида 44, содержат синильную защитную группу.

Синтез и»рстп-бупшмфенил(диметил)силиловых эфиров циаиоэтилиденов

производных

До сих пор соединения с с ил ильными защитными группами применялись в тригил-цианоэтилиденовой конденсации и устойчивость э защитных групп в условиях реакции не была изучена. Поэтому синтезировали модельные моносахаридные цианоэгалиденовые производные и 48, содержащие трет-бугалдиметилсилильную и тр, бутизщифенилсилильную защитные группы, соответственно. Для этого свобод цианоэтилиденовое производное 2 ввели в реакцию избирательн силилирования действием ~1 экв. Ви'Ме25Ю1 или Ви'РЬ251С1 в ДМФЛ присутствии триэтиламина и каталитических количеств ДМАР с последуюи бензоилированием. Продукты реакции представляли собой 6-О-замещеш моносилильные производные 47 и 48, выделенные с выходами 65 и 6' соответственно. Полученные соединения ввели во взаимодействие с тритилов эфиром 7 в стандартных условиях тритил-цианоэтилиденовой конденсации результате реакции были выделены дисахарид 49 с выходом 36% и дисахарид с выходом ~56%.

48.К=Ви*РЬ251 ]

49. Н=Ви1Ме251 О]

50.К=Ви«РЬ281

Наличие силильной группы в структурах соединений 47-50 хорошо согласуете данными ЯМР спектроскопии.

з результатов гликозилирования следует, что тре/я-бутилдифенилсилильная щитная группа более устойчива по сравнению с трет-бутилдиметилсилильной условиях тритил-цианоэтилиденовой конденсации. Таким образом, мы решили :тановиться на синтезе трисахаридного гликозил-донора 44 с трет-тилдифенилсилильной зашитой, кема 5

Синтез цианоэтилиденового производного 44 предусматривал зацетилирование трисахарида 5, избирательное силилирование двух первичных

спиртовых групп и бензоилирование (Схема 5). Удаление ацетильных защити групп трисахаридного цианоэтилиденового производного 5 проводили по мето Земплена (0.5М метилат натрия в смеси метанол-пиридин) в течение 15 ми продукт 51 был выделен с выходом 49%. Судя по данным ЯМР спектроскопи 4-О-ацетильная группа не удалялась в этих условиях. Избирательн силилирование трисахарвда 51 проводили 2 экв. 'ВиР11281С1 в ДМФА присутствии триэтил амина и каталитических количеств ОМАР. В результа последующего бензоилирования свободных гидроксильных гру! беизошшгаридом в пиридине был получен целевой продукт 44. Его вых составил ~45%.

Мы , исследовали гликозилирующую способность полученно трисахаридного цианоэтилиденового производного 44 как гликозил-донора стандартных условиях тритил-цианоэтилиденовой конденсаци Гликозилирование дитритилового эфира 10 двукратным мольным количестве цианоэтилиденового производного 44 привело с выходом 40% к производно) разветвленного гепгасахарида 52 (Схема 5), содержащему избиратель: удаляемые т^еш-бутилдифенилсилильные защитные группы.

Строение полученного соединения доказано на основе данных ЯМ спектроскопии и масс-спектрометрии.

Таким образом, силильная защитная группа устойчива в условиях грити цианоэхилиденовой конденсации, следовательно, избирательно защщценн] гликозил-донор 44 может быть использован для создания олигосахарид следующих поколений.

В результате проведенной работы разработан новый подход к синк регулярных разветвленных олигосахаридов, содержащих повторяющий трисахаридный фрагмент.

ВЫВОДЫ

1. Методом тритил-цианоэтилиденовой конденсации синтезирова] высокоразветвленные регулярные олигоманнозиды, содержащие остатки 3

■ 6-замещенной маннозы.

2. Показана эффективность разветвленного трисахарида цианоэтилиденовс производного как гликозил-донора.

3. Осуществлен направленный синтез моно- и дитритиловых эфиров моно-, I и триманнозидов, служащих гликозил-акцепторами.

1утем конденсации разветвленного гликозил-донора с гликозил-акцепторами 5ыли получены защищенные изомерные тетра-, пента- и гексаманнозиды, а гакже гепта- и нонасахариды.

Синтезированы трисахаридные цианоэтилиденовые производные с лорацетильной и силильной защитными группами, осуществлен синтез Ептасахарида с избирательно удаляемыми защитными группами.

Основное содержание работы изложено в следующих публикациях

1. L.V. Backinowsky, SA. Nepogodiev, P.I. Abronina, Eflicient synthesis of branched jmannosides, Abstracts of the 8th Bratislava Symposium on Saccharides, Smolenice, Slovakia, 1, p 75.

2. Л.В. Бакиновский, ГГ.И. Абронина, СЛ. Непогодьев, Направленный ический синтез маниоолигосахарвдов с (1-3),(1-б)-гликозидными связями, Менделеевский съезд по общей и прикладной химии, Санкт-Петербург 1998 (Тезисы юдов, т. 4, с. 7), изд. ПИК ВИНИТИ, Москва, 1998.

3. P.I. Abronina, L.V. Backinowsky, SA Nepogodiev, AS. Shashkov, J.F. Stoddart, A ly eflicient construction of nonasaccharide dendrons from branched trimannosides, racts, Royal Society of Chemistry, Carbohydrate Group, Spring meeting, Birmingham,1998, p.

4. JI.B. Бакиновский, П.И. Абронина, CA Непогодьев, ААГрачев, кочетков, Синтез высокоразветаленных олигоманнозидов. Сообщение 1. Синтез аацетата 3,б-ди-0-(а-0-ма1шопирапозил)-1,2-0-[(1-циаио)этилидем]-р-0-нопиранозы, трисахаридиого гликозил-донора, Изв. АН. Сер хим., 8(1998) 1631.

5. Л.В. Бакиновский, П.И. Абронина, Н.К.Кочетков, ААГрачев, Тритил-ноэтилиденовая конденсация как путь синтеза высокоразветвленных ноолигосахарвдов, Биоорг. Химия, 24 (1998) 715.

6. АА. Kulminskaya, E.V. Eneyskaya, L.S. Isaeva-Ivanova, K.AShabaIin, A.N. sl'ev, L.V. Backinowsky, P.I. Abronina, K.N.Neustroev, Enzymatic properties of a-uiosidase from Trichoderma reesei, Protein and Peptide Letters, 5(1998) 163.

7. L.V. Backinowsky, P.I. Abronina, SA. Nepogodiev, AAGrachev, N.K. Kochetkov, thesis of Highly Branched Oligomannosides. 3. Syhthcsis of Trityl Ethers of Mannobiosides

Mannotriosides as Precursors for Higher Mannooligosaccharides, Polish J. Chem., 73 99) 955.

Работа поддержана проектами Российского фонда фундаментальных ледований (проекты № 96-03-34354 и 99-03-32907) и Грантом поддержки ведущих чных школ (грант № 96-15-97380).

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. Синтез дендримеров (обзор литературы)

Неуглеводные дендримеры

Гликодендримеры

Гликодендримеры с углеводным покрытием

Углеводцентрированные гликодендримеры

Гликодендримеры, полностью состоящие из углеводов, или высшие олигосахариды

Введение в молекулу акцептора двух или более одинаковых углеводных остатков

Ортоэфирная стратегия гликозилирования

Ортогональная стратегия гликозилирования

Гликозилгалогениды, тиогликозиды, селеногликозиды я-Пентенилгликозиды

Гликали

Синтез олигосахаридов на полимерном носителе Заключение

Глава 2. Синтез высокоразветвленных регулярных олигосахаридов (обсуждение результатов) Введение

Синтез 4-0-ацетил-3,6-ди-0-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-а-О-маннопиранозил)-1,2- О- [ 1-(экзо-циано)этилиден] -0-Б-маннопиранозы и оценка ее гликозилирующей способности

Гликозилирование тритиловых эфиров моносахаридов трисахаридным цианоэтилиденовым производным Синтез тритиловых эфиров маннобиозидов и маннотриозидов, предшественников высших манноолигосахаридов

Блочный синтез разветвленных маннопента-, -гекса- и -нонаозидов

Синтез избирательно защищенных цианоэтилиденовых производных разветвленного трисахарида

Синтез 4-0-ацетил-3,6-ди-0-(2,3,4-три-О-бензоил-6-Охлорацетил-а-О-маннопиранозил)-1,2- О- [ 1 -(экзоциано)этилиден]-р-В-маннопиранозы

Синтез /п/>еАЯ-бутилдифенил (диметил) с ил иловых эфиров цианоэтилиденовых производных

Глава 3. Экспериментальная часть

Общие методы

Синтез трисахаридных и тетрасахаридного цианоэтилиденовых производных

Синтез тетра- и гептасахаридов

Синтез тритиловых эфиров ди- и трисахаридов

Блочный синтез маннопента-, -гекса- и -нонаозидов

Синтез 4-(9-ацетил-3,6-ди-0-(2,3,4-три-О-бензоил-6-Охлорацетил-а-О-маннопиранозил)-1,2- О- [ 1 -(экзоциано)этилиден]-|3-0-маннопиранозы

Синтез трет- бутилдифенил (диметил) сил иловых эфиров цианоэтилиденовых производных

ВЫВОДЫ

Синтез высокоразветвленных (дендритных) структур — одно из новых и интенсивно развивающихся направлений современной органической химии. К соединениям этого класса относятся и так называемые гликодендримеры. Известны гликодендримеры, в которых углеводы составляют периферию и присоединены к неуглеводной "сердцевине". Показано, что они обладают большей биологической активностью по сравнению с линейными структурами, в частности, служат антигенами и ингибиторами взаимодействия лектинов с углеводами. Другой пример — это молекулы, в которых углеводы образуют и периферию и "сердцевину"; их природными представителями являются высокоразветвленные олиго- и полисахариды. Следует отметить, что число работ, посвященных синтезу структур, содержащих высокоразветвленные олигосахаридные фрагменты, весьма невелико. Таким образом, представляется актуальным разработать подходы к получению гликодендримеров второго типа, чтобы использовать их для изучения углевод-белкового взаимодействия.

В качестве моносахарида, составляющего скелет будущих олигосахаридов, выбрана О-маннопираноза с замещениями в положениях 3 и 6, и манноолигосахариды можно, таким образом, рассматривать как модели углеводных цепей ТУ-гликопротеинов. Использование производных маннозы имеет то несомненное достоинство, что гликозилирование гликозил-донорами на их основе протекает стереоспецифично.

Диссертация включает литературный обзор, обсуждение полученных результатов и экспериментальную часть.

Литературный обзор состоит из трех основных разделов. Первый описывает синтез неуглеводных дендримеров. Второй посвящен синтезу гликодендримеров. И, наконец, в заключительной главе рассматривается синтез высокоразветвленных олигосахаридов, которые представляют собой аналоги дендримеров, полностью построенные из углеводов.

Работа поддержана проектами Российского фонда фундаментальных исследований (проекты № 96-03-34354 и 99-03-32907) и Грантом поддержки ведущих научных школ (грант № 96-15-97380). 5

1.3. Заключение

Приведенный в данном обзоре материал демонстрирует широкое разнообразие работ, посвященных созданию различных неуглеводных дендритных структур и гликодендримеров смешанного типа. Количество исследований, направленных на получение гликодендримеров в основном построенных из углеводов, существенно меньше. В синтезе высших олигосахаридов, которые можно рассматривать в качестве разветвленных дендронов, обращает на себя внимание использование в большинстве случаев блочного подхода, а также перспективность ортогональной стратегии. В этой связи, важно отметить применение новых гликозилирующих агентов, таких как я-пентенил-гликозиды (Фразер-Рейд), гликали (Данишевский), селено- и тиогликозиды (Грайс, Ли), с помощью которых были, в частности, синтезированы различные цепи ТУ-гликопротеи нов маннозного типа.

54

Глава 2. Синтез высокоразветвленных регулярных олигосахаридов обсуждение результатов) 2.1. Введение

Целью нашего исследования являлся синтез модельных высокоразветвленных регулярных (т.е. содержащих однотипные блоки) олигоманнозидов с замещениями в положениях 3 и 6. Для получения подобных структур мы воспользовались методом тритил-цианоэтилиденовой конденсации, разработанной в лаборатории химии углеводов ИОХ РАН и включающей взаимодействие 1,2-0-(1-циано)этилиденовых производных (ЦЭП) Сахаров как гликозил-доноров с тритиловыми эфирами Сахаров как гликозил-акцепторами.

Наиболее рациональным подходом к синтезу структур, построенных из повторяющихся элементов, несомненно, является блочный подход, основанный на применении одного и того же олигосахаридного гликозил-донора. Таким образом, необходимо было получить 3,6-разветвленное трисахаридное циано-этилиденовое производное и исследовать его гликозилирующую способность в тритил-цианоэтилиденовой конденсации.

Разнообразие структур, которые можно синтезировать с применением такого гликозил-донора, будет определяться строением гликозил-акцепторов. Для синтеза олигосахаридов с разной степенью разветвления необходимо было получить тритиловые эфиры moho-, ди- и трисахаридов. Кроме того, для перехода к структурам с большей степенью разветвления важно разработать подходы к созданию избирательно защищенных олигоманнозидов — предшественников новых гликозил-акцепторов.

55

2.2 Синтез трисахаридного гликозил-донора— 4- О-ацетил-3,6-ди-О-(2у 3,4,6-тетра-0-ацетил-а-В-маннопиранозил)-1,2- 0-[1-(экзо-циано)этилиден]-р-В-маннопиранозы и оценка его гликозилирующей способности

Синтез трисахаридного цианоэтилиденового производного (см. схему 1) предусматривал превращение триацетата В-маннозы (1) в триол (2) и его избирательное гликозилирование.

Исходным соединением послужила 3,4,6-три- О-ацетил-1,2- О- [ {-{экзо-циано)этилиден]-р-Б-маннопираноза (1),полученная по реакции 2,3,4,6-тетра-О-ацетил-а-О-маннопиранозилбромида (ацетобромманнозы, 3) с КСЫ [102]. Превращение триацетата 1 в тригидроксильное производное 2, которое ранее использовали для получения мономеров в синтезе (1->6)- [103] и (1^4)-«-0-маннопирананов [104], цианоэтилиденового производного Б-маннуроновой кислоты [105] и циклических олигосахаридов, аналогов циклодекстринов [106], проводили с помощью катализируемого МеСЖа или Е1зК метанолиза. В данной работе мы использовали методику, предусматривающую обработку триацетата 1 метил атом натрия в смеси метанол—пиридин [105], и продукт 2 затем вводили в гликозилирование.

Гликозилирование гидроксил-содержащих цианоэтилиденовых производных, которое можно рассматривать как пример ортогонального гликозилирования [107], существенно расширившее возможности метода тритил-цианоэтилиденовой конденсации, обычно проводили действием ацилгликозилбромидов в условиях реакции Гельфериха, т.е. в ацетонитриле в присутствии Нз(С1Ч)2 [108]. Описано также успешное проведение гликозилирования в присутствии такого активного промотора, как трифторметансульфонат серебра, и 2,4,6-коллидина [106]. Мы использовали более мягкий промотор, Н§(СТЧ)2 в сочетании с Н§Вг2, с тем, чтобы обеспечить избирательность гликозилирования триол а 2. То, что избирательное введение О-заместителей в молекулу триола 2 возможно, доказано получением 3,6-ди-О-бензоильного производного [104, 106]. Так, при действии 4 эквивалентов бензоилхлорида в пиридине выход указанного дибензоата составил свыше 70% [106]. Как было показано в работе [81], гликозилирование 1,2-0-этилиден-р-В-маннопиранозы ацетобромманнозой в присутствии ^ОТГ и эквивалентного

56 количества 2,4-лутидина, также протекало высоко региоселективно — замещения по положению 4 не наблюдалось, при этом образовывался 3,6-замещенный трисахаридный диортоэфир. Можно было ожидать аналогичной региоизбирательности и при гликозилировании соединения 2.

Реакция триола 2 с 3.5 эквивалентами ацетобромманнозы (3) привела к трисахаридному цианоэтилиденовому производному 4, выделенному после колоночной хроматографии с выходом 62%. Для того, чтобы превратить этот трисахарид в потенциальный гликозил-донор, необходимо защитить свободную гидроксильную группу. Ацетилирование соединения 4 действием АС2О в пиридине в присутствии 4-диметиламинопиридина (DMAP) привело к кристаллическому продукту 5.

Следует отметить, что при большем избытке ацетобромманнозы гликозилированию подвергалась и ОН-группа в положении 4. Так, при взаимодействии триола 2 с 4 эквивалентами ацетобромманнозы (3) в тех же условиях после хроматографии был выделен хроматографически однородный продукт, который оказался, судя по данным ЯМР, смесью три- и тетра-(б)

Схема 1 з

Вг

57 сахаридов. После ацетилирования АС2О в пиридине в присутствии DMAP полученный трисахарид 5 можно было легко отделить кристаллизацией с 42% выходом. Хроматография маточного раствора дала 16% тетрасахаридного цианоэтилиденового производного.

Данные *Н и 13С спектроскопии ЯМР полученных соединений 4-6 приведены в Таблицах 1 и 2.

Отнесение сигналов в спектре ЯМР 'Н (Таблица 1) трисахарида 4 было выполнено в результате анализа совокупности 1D- и 2D-cneKTpoB (NOE, COSY, COSYRCT). С помощью COSY- и COSYRCT-спектров были установлены корреляции между сигналами Н-1—Н-4 и Н-5—Н-6,6' звеньев b и с. Химические сдвиги Н-3 каждого из остатков совпадали с химическими сдвигами Н-4, что не позволило провести однозначное отнесение сигналов. Такое отнесение проведено с помощью методики 1D-NOE в разностном варианте: предоблучение сигнала Н-5 с 8 4.06 м.д. вызвало отклик на Н-3 с 5 5.28 м.д. , что позволило выявить корреляцию Н-5с/Н-Зс. Та же методика, но с предоблучен и ем аномерных протонов Н-lb и Н-1с позволила установить наличие Ь(1-»3)а и с(1->6)а связей, т.е. 3,6-дизамещение в остатке а. В пользу этого говорит и присутствие свободной гидроксильной группы при С-4а, корреляция протона которой с Н-4а выявлена в спектре COSY.

В аномерной области спектра ЯМР 13С соединения 4 (5 ~ 100 м.д.) присутствовало 4 сигнала, один из которых (5 101.7 м.д.) принадлежит "центральному", ацетальному атому С цианоэтилиденовой группы. Химические сдвиги остальных характеристических сигналов [5 26.7 (СН3) и 116.8 м.д. (CN) (ср. лит. данные [106])] доказывают сохранность этой группы в условиях дезацетилирования цианоэтилиденового производного 1 и гликозилирования триола 2.

Отнесение сигналов в спектре ЯМР 13С (Таблица 2) проведено с помощью гетероядерной двумерной спектроскопии HMQC с учетом положения протонов в спектре ГН ЯМР. Все сигналы находятся в удовлетворительном соответствии с литературными данными для метил-2,3,4,6-тетра-0-ацетил-а-Б-маннопиранозида [109], что говорит об а-конфигурации вновь образованных маннозидных связей.

59

Наибольшее различие наблюдалось в величинах химических сдвигов С-lb и С-1с (то же справедливо и для Н-lb и Н-1с, (см. Табл. 1). Подобное различие в химических сдвигах Н(С)-1 в остатках с разным типом связи отмечали ранее в спектрах незащищенных олигоманнозидов [110]: атомы Н(С)-1 остатков, связанных 1-»3-связями, резонируют в более слабом поле, чем атомы Н(С)-1 остатков, образующих 1->6-гликозидную связь.

Дополнительное подтвержение b( 1 >3)[с( 1—>6) |а структуры соединения 4 получено из анализа химических сдвигов сигналов атомов С остатка а: сигналы С-3 и С-6 заметно смещены в слабое поле по сравнению с их положением в спектре триола 2 [106], а сигналы С-2, С-4 и С-5 — в сильное поле за счет а- и Р-эффектов гликозилирования, соответственно. Таким образом, продуктом гликозилирования триола 2 является 3,6-ди-(9-(2,3,4,6-тетра-0-ацетил-а-О-маннопиранозил)-1,2- 0-[1-(э/сзо-циано)этилиден]-р-О-маннопираноза 4.

Строение трисахарида 5 также полностью доказано с помощью спектроскопии ЯМР. Отнесение сигналов протонов звена а было однозначно осуществлено с помощью 2В-спектроскопии и с учетом данных для соединения 4 (Табл. 1). Как и ожидалось, сигнал Н-4а в спектре ацетата 5 смещен в слабое поле относительно его положения в спектре ОН-производного 4. Полное отнесение сигналов в спектре ЯМР ХН проведено, как и в случае соединения 4, на основании совокупности данных спектров NOE, COSY и COSYRCT. В частности, предоблучение сигнала Н-5 с 5 4.17 м.д. вызвало отклик на Н-3 с 5 5.27 м.д.

Для отнесения сигналов в спектре ЯМР 13С соединения 5 была использована спектроскопия HMQC (Рис. 1), положение сигналов CN-группы, ацетального атома С цианоэтилиденовой группы и СН2-групп определено дополнительно с помощью методики APT [111] (см. Табл. 2).

Спектр 13С сполна ацетилированного тетрасахарида 6, 3,4,6-три-0-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-а-Б-маннопиранозил)-1,2-О-[ 1-(э/сзо-циано)этилиден]-p-D-маннопиранозы, содержит 25 сигналов в области 5 102 - 60 м.д., что соответствует 4 гексозным остаткам (4x6) и "центральному" атому С цианоэтилиденовой группы. Четыре сигнала с 5 100.4, 98.9, 97.7, 97.2 м.д. отвечают 4 аномерным атомам углерода. Сигналы с 5 26.4, 100.5 и 116.4 м.д. соответствуют атомам С группы CH3-C-CN. Три сигнала атомов углерода СН2О-групп находятся в области 5 62.0-62.7 м.д., которые принадлежат трем концевым невосстанавливающим моносахаридным остаткам—это доказывает замещение по всем трем положениям центрального остатка маннозы.

1. H.B.Mekelburger, W.Jaworek, F.Vögtle, Angew. Chem. 1.t. Ed. Engl, 31 (1992)1571.

2. J.Issberner ,R.Moors, F.Vögtle, Angew. Chem. Int. Ed. Engl.,33 (1994) 2413.

3. D.A.Tomalia, H.Baker, J.R.Dewald, M.Hall, G.Kallos, S.Martin, J.Roeck, J.Ryder, P.Smith.Po/jm./., 17 (1985) 117.

4. G.R.Newkome, Z.Q.Yao, G.R.Baker, V.K.Gupta, J.Org.Chem., 50 (1985) 2003.

5. E.Buhleier, W.Wehner, F.Vögtle, Synthesis, (1978) 155.

6. D.A.Tomalia, Adel M.Naylor, W.A.Goddard III, Angew. Chem. Int. Ed. Engl, 29(1990) 138.

7. R.G.Denkewalter,J.F.Kolc,WJ.Lukasavage,US Pat 4410688 (1983), Chem.AbstrA00 (1984) 103907p.

8. G.R.Newkome, C.N.Moorefield, G.R.Baker, A.L.Johnson, R.K.Behera, Angew. Chem. Int. Ed. Engl, 30 (1991) 1176.

9. C.J.Hawker, J.M.J.Frechet, J.Am.Chem.Soc., 112 (1990) 7638.

10. A.Basir-Hashemi, H.Hart, D.L.Wart, J.Am.Chem.Soc., 108 (1980) 6675.

11. Z.Xu, J.S.Moore, Angew. Chem. Int. Ed. Engl, 105 (1993) 261.

12. H.Uchida, Ykabe, K.Yoshino, A.Kawamata, T.Tsumuraya, S.Masamune, J.Am. Chem.Soc., 112 (1990) 7077.

13. T.Nagasaki, M.Ukon, S.Arimori, S.Shinkai, J.Chem.Soc.Chem.Commun., (1992) 608.

14. К.Rengan, R.Engel, J.Chem.Soc. Perkin Trans. 1, (1991) 987.

15. K.Rengan, R.Engel, J.Chem.Soc.Chem.Commun., (1992) 757.

16. G.R.Newkome, C.N.Moorefield, G.R.Baker, R.K.Behera, Angew. Chem. Int. Ed. Engl, 30 (1991) 1176.

17. A.W.van der Made, P.W.N.M. van Leenwen, J.Chem.Soc.Chem.Commun., (1992) 1400.

18. F.Moulines, L.Djakovitch, R.Boese, B.Gloaguen, W.Thiel, J.L.Fillaut, Angew. Chem. Int. Ed. Engl, 32 (1993) 1075.

19. K.L.Wooley, C.J.Hawker, J.M.J.Frechet, F.Wudl, G.Srdanov, S.Shi, C.Li, M.Kao, J.Am. Chem.Soc., 115 (1993) 9836.

20. R.Moors, F.Vögtle, Chem.Ber., 126 (1993) 2133.122

21. G.R.Newkome, C.N.Moorefield, J.M.Keith, G.R.Baker, G.H.Escamillia, Angew. Chem. Int. Ed. Engl, 33 (1994) 666.

22. K.L.Wooley, C.J.Hawker, J.M.J.Frechet, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 33 (1994)82.

23. Z.Xu, M.Kahr, K.L.Walker, C.L.Wilkins, J.S.Moore, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 116 (1994) 4537.

24. N.Launay, A.M.Caminade, R.Lahana, J.P.Maioral, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 33 (1994) 1589.

25. K.Rengan, R.Engel, J. Chem.Soc. Chem. Commun., (1992) 1084.

26. Y.H.Kim, O.W.Webster, J.Am. Chem.Soc., 112 (1990) 4592.

27. A.Rajca, .Utamapanya, J.Am. Chem.Soc., 115 (1993) 10688.

28. H.F.Chow, C.C.Mak, J.Chem.Soc Perkin Trans. 1, (1994) 2223.

29. H.T.Chang, C.T.Chen, T.Kondo, G.Siuzdak, K.B.Sharpless, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 35 (1996) 182.

30. R.Roy, D.Zanini, S.J.Meunier, A.Romanowska,J.Am. Chem.Soc., (1993) 1869.

31. R.H.E.Hudson, M.J.Damha, J.Am.Chem.Soc., 115 (1993) 2119.

32. C.Rao, J.P.Tam, J.Am. Chem.Soc., 116 (1993) 6975.

33. T. K. Lindhorst, C. Kieburg, U. Krallman-Wenzel, Glycoconjugate J., 15 (1998)605.

34. P. R. Ashton, S. E. Boyd, C. L. Brown, S. A. Nepogodiev, E. W. Meijer, H. W. I. Peerlings, J. F. Stoddart, Chem. Eur. J., 3 (1997) 974.

35. P. R. Ashton, E. F. Hounsell, N. Jayaraman, T. M. Nilsen, N. Spencer, J. F Stoddart, M. Young, /. Org. Chem., 63 (1998) 3429.

36. R. Roy, D. Page, S. Figueroa Perez, V. Verez Bencomo, Glycoconjugate /., 15 (1998) 251.

37. M.Dubber, T.Lindhorst, Carbohydr.Res., 310 (1998) 35.

38. B. Colonna,V.D. Harding, S.A. Nepogodiev, F.M. Raymo, N. Spencer, J.F. Stoddart, Chem. Eur.J., 4 (1998) 1244.

39. A.M. Stephen, in The Polysaccharides, Ed. G. O. Aspinall, Academic Press, NewYork 2 (1997) 97.

40. P.A.J. Gorin and E. Barreto-Bergter, in The Polysaccharides, Ed.G.O. Aspinale, Academic Press, New York, 2 (1983) 365.

41. H.Bretting, N.F. Whittaker, E.A.Kabat, K.Konigsmann-Lange, H.J.Thiem, Carbohydr. Res., 98 (1981) 213.123

42. P.M.Rudd, R.A.Dwek, Crit.Rev.Bbchem.Mol.Biol., 32 (1997) 1.

43. A.Varki, Glycobiology, 3 (1993) 97.

44. D.R.Bundle, N.M.Young, Current Opinion in Structural Biology, 12 (1992) 666.

45. R.T.Lee, Y.C.Lee., Glycoconjug.J., 4 (1987) 317.

46. R.T.Lee, Y.C.Lee., ACS Symposium Series 560, (1994) 23.

47. D.Zanini, R.Roy, J.Am.Chem.Soc., 119 (1997) 2088.

48. R.Roy, Trends Glycosci. Glycotechnol., 8 (1996) 79.

49. I.H.Oguchi, T.Toyokuni, B.Dean, H.Ito, Cancer Commun., 2 (1990) 311.

50. S.A.Defrees, W.Kosch, W.Way, J.C.Paulson, J.Am.Chem.Soc., 117 (1995) 66.

51. M.Llinares, R.Roy, Chem.Commun., (1997) 2119.

52. R.Roy, Polymer News, 21 (1996) 226.

53. P.R. Ashton, S.E. Boyd, C.L. Brown, S.A. Nepogodiev, J.F. Stoddart, Chem. Eur.J., 3 (1997) 974.

54. D. Zanini, R. Roy, J.Org.Chem., 63 (1998) 3486.

55. T.K.Lindhorst, K.Kieburg, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 35 (1996) 1953.

56. T.K.Lindhorst, K.Kieburg, Glycoconjug.J., 15 (1998) 605.

57. K. Aoi, K.Itoh, M.Okada, Macromolecules, 28, (1995) 5391.

58. D D.Page, D.Zanini, R.Roy, Bioorg. Med.Chem., 4(1996) 1949.

59. D.Page, S.Arabid, R.Roy, Chem.Commun(1996) 1913.

60. P.Page, R.Roy, Bioconjug Chem., 8 (1997) 714.

61. WJ.Lees, A.Spaltenstein, J.E.Kingery, G.M.Whitesides, J.Med.Chem., 37 (1994) 3419.

62. R.Roy, W.K.Park, Q.Wu and S.Wang, Tetrahedron Lett., 36 (1995) 4377.

63. R.Roy, D.Page, S.F.Perez, V.V.Bencomo, Glycoconjug.J., 15 (1998) 251.

64. R.Roy, D.Zanini, S.J.Meunier, ACS Symposium Series 560, (1994) 104.

65. M.Dubber, T.Lindhorst, Carbohydr.Res., 310 (1998) 35.

66. M.Dubber, T.Lindhorst, Chem.Commun., (1998) 1265.

67. M.Boysen, T.K.Lindhorst, Xth European Carbohydr. Symp. (Eurocarb X), Galway (1999) PA008.

68. F.Ortega-Caballero, J.J.Gimenez-Martinez, A.Vargas-Berenguel, Xth European Carbohydr. Symp. (Eurocarb X), Galway, (1999) OA11.

69. H.Paulsen, R.Lebuhn, Angew.Chem.Int.Ed.Engl., 21 (1982) 926.

70. H.Paulsen, R.Lebuhn, Carbohydr.Res., 125 (1984) 21.

71. T.Ogawa, T.Kitajma, T.Nukada, Carbohydr.Res., 123 (1983) C5.124

72. T.Kitajma, M.Sugimoto, T.Nukada, T.Ogawa, Carbohydr.Res., 127 (1984) CI.

73. Z.Wang, X.Zang, Y.Ito, Y.Nakahara, T.Ogawa, Carbohydr.Res., 295 (1996) 25.

74. W.Wang, F.Kong, Carbohydr. Res., 315 (1999) 128.

75. Y.Nakahara, S.Shibayama, Y.Nakahara, T.Ogawa, Carbohydr. Res., 280 (1996) 67.

76. J.Ning, F.Kong, Tetrahedron Lett, 40 (1999) 1357.

77. H.Paulsen, Angew.Chem.Int.Ed.Engl, 20 (1996).

78. AToepfer, R.R.Schmidt, Tetrahedron Let., 33 (1992) 5161.

79. N.K.Kochetkov, A.F.Bochkov, in "Recent Developments in the Chemistry of Natural Carbon Compounds", Eds. R.Bognar, V.Brückner, Cs.Szantai, Akademiai Kiado, Budapest, 4 (1971) 77.

80. W.Wang, F.Kong, Angew. Chem., Int. Ed. Engl., 38 (1999) 1247.

81. W.Wang, F.Kong, Carbohydr. Res., 315 (1999) 117.

82. H.Lönn, Carbohydr.Res., 139 (1985) 105.

83. H.Lönn, Carbohydr.Res., 139 (1985) 115.

84. P.Fugedi, W.Birberg, P.J.Garegg, A.Pilotti, Carbohydr.Res., 164 (1987) 297.

85. S.Mehta, B.M.Pinto, J.Org.Chem., 58 (1993) 3269.

86. A.Duffels, S.V.Ley, J.Chem.Soc.,Perkin Trans., 1 (1999) 375.

87. P.Kovac, K.J.Edgar, J.Org.Chem., 57 (1992) 2455.

88. G.H.Veeneman, S.H.Van Leeuwen, J.H.van Boom, Tetrahedron Lett., 31 (1990)1331.

89. B.Fraser-Reid, U.E.Udodong, Z.Wu, H.Ottoson, J.R.Merrit, S.Rao, C.Roberts, R.Madsen, Synlett., 12 (1992) 927.

90. J.R.Merrit, E.Naisang,B.Fraser-Reid, J.Org.Chem., 59 (1994) 4443.

91. A.Demchenko, G.-J. Boons, Tetrahedron Lett., 38 (1997) 1629.

92. S.J.Danishefsky, S.Hu, P.F.Cirillo, M.Eckhardt, P.H.Seeberger, Chem.Eur.J., 3 (1997) 161.

93. J.T.Randolph, S.J.Danishefsky, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 33 (1994) 1470.

94. P.Lloyd-Williams, F.Albericio, E.Giralt, Tetrahedron, 48 (1993) 11065.

95. L.Thompson, J.Ellman, Chem.Rev., 96 (1996) 555.

96. J.Rademann, R.R.Schmidt, /. Org. Chem.,62 (1997) 3650.

97. K.Nicolaou, N.Winssinger, J.Pastor, F.Deroose, J.Am.Chem.Soc., 119 (1997) 449.

98. K.Nicolaou, N.Watanabe, J.Li, J.Pastor, N.Winssinger, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 37 (1998) 1559.

99. J.Rademann, A.Geyer, R.R.Schmidt, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 37 (1998) 1241.125

100. C.Zheng, P.Seeberger, S.J.Danishefsky, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 37 (1998) 786.

101. В. И. Бетанели, M. В. Овчинников, JT. В. Бакиновский, Н. К. Кочетков, Изв. АН СССР, Сер. хим., (1979) 2751.

102. JI. В. Бакиновский, Т. А. Оселедчик, Н. К. Кочетков, Изв. АН СССР, Сер. хим., (1981) 1387.

103. Н. К. Кочетков, Е. М. Климов, Н. Н. Малышева, А. С. Шашков, Изв. АН СССР, Сер. хим., (1986) 1884.

104. V. I. Betaneli, A. Ya. Ott, О. V. Brukhanova, and N. К. Kochetkov, Carbohydr. Res., 179 (1988) 37.

105. P. R. Ashton, C. L. Brown, S. Menzer, S. A. Nepogodiev, J. F. Stoddart, and D. J. Williams, Chem. Eur. J., 2 (1996) 580.

106. G.-J. Boons, Tetrahedron, 52 (1996) 1095.

107. Y. I. Betaneli, L. V. Backinowsky, N. E. Byramova, M. V. Ovchinnikov, M. M. Litvak, and N. K. Kochetkov, Carbohydr. Res., 113 (1983) CI.

108. K. Bock and C. Pedersen, Adv. Carbohydr. Chem. Biochem., 41 (1983) 27.

109. T. Qgawa and K. Sasajima, Carbohydr. Res., 97 (1981) 205.

110. S. L. Patt and J. N. Shoolery, J. Magn. Reson., 46 (1982) 535.

111. N. K. Kochetkov, N. E. Nifant'ev, and L. V. Backinowsky, Tetrahedron, 43 (1987) 3109.

112. С. А. Непогодьев, JI. В. Бакиновский, H. К. Кочетков, Биоорган, хим., 15 (1989) 1555.

113. Ю. Е. Цветков, Н. Э. Байрамова, JI. В. Бакиновский, Н. К. Кочетков, Н. Ф Янкина, Биоорган, хим., 12 (1986) 1213.

114. Е. G. Gros and Е. М. Gruceiro, Carbohyd. Res., 14 (1970) 409.

115. L.Y. Backinowsky, ACS Symp. Ser., 560 (1994) 36.

116. S.Koto, N.Morishima, T.Yoshida, M.Uchino, S. Zen, Bull. Chem. Soc. Jpn., 56 (1983) 1171.

117. Yu.E.Tsvetkov, P I. Kitov, L.V.Backinowsky, N.K.Kochetkov, Tetrahedron Lett., 34 (1993) 7977.

118. П.И. Китов, Ю.Е.Цветков, Jl.B.Бакиновский, H. К.Кочетков, Изв. АН. Сер. хим., (1993) 1992.

119. Yu. Tsvetkov Е., P.I. Kitov, L.V. Backinowsky, N. K.Kochetkov, J. Carbohydr. Chem., 15 (1996) 1027.126

120. R.K. Ness, H.G.Fletcher, J.Am.Chem.Soc., 72 (1950) 220.

121. N.E. Byramova, M.V.Ovchinnikov, L. V. Backinowsky, N. K. Kochetkov, Carbohydr.Res., 124 (1983) C8.

122. M.-O. Contour, J. Defaye, M. Little, and E. Wong, Carbohydr. Res., 193 (1989)283.

123. N.Heran, J.-P. Utille, P.J.A.Vottero, Carbohydr. Res., 53 (1977) 268.

124. А.И.Зинин, В,И.Торгов, В.Н.Шибаев, В.Дж.Броутон, Изв. АН. Сер.хим., (1998) 513.

125. Н.Э.Байрамова, Л.В.Бакиновский, Н.К.Кочетков, Изв. АН. Сер.хим., (1987)1120.

126. Н. J. Dauben, Jr, L. R. Honnen, and К. M. Harmon, J. Org. Chem., 25 (1960)1442,

127. N. K. Kochetkov, V. I. Betaneli, M. V. Ovchinnikov, and L. V. Backinowsky, Tetrahedron, 37 (1981) 149.

128. Russel and J. Senior, Can. J. Chem., 58 (1980).

129. V.I.Betaneli, M.V.Ovchinnikov, L.V.Backinowsky, N.K.Kochetkov, Carbohydr. Res., 84 (1980) 211.

130. Хочу выразить признательность акад. Н.К. Кочеткову и проф. В.Н. Шибаеву, а также всем сотрудникам лаборатории за ценные советы и интерес к работе.

131. Я благодарю д.хм. А. С. Шашкова и A.A. Грачева за съемку и помощь в интерпретации спектров ЯМР.

132. Я глубоко благодарна своему руководителю проф. Л. В. Бакиновскому, научный опыт и человеческие качества которого оказывали мне огромную поддержкуна всех этапах работы.