Строение, биологическая активность полисахаридов некоторых бурых водорослей и продуктов их ферментативной трансформации тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.10 ВАК РФ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

2.1. Распространение, состав и структура полисахаридов бурых водорослей.

2.2. Ферментативная трансформация полисахаридов.

2.2.1. Гликозштрансферазы.

2.2.2. Гликозшгидролазы.

2.3. Биологическое действие полисахаридов бурых водорослей.

2.3.1. Иммунотропное действие.

2.3.1.1. Действие на фагоцитирующие клетки.

2.3.1.2. Влияние полисахаридов из бурых водорослей на клеточные иммунные реакции и миграцию иммунокомпетентных клеток.

2.3.1.3. Влияние сульфатированных полисахаридов бурых водорослей на продукцию и свойства лимфокинов и монокинов.

2.3.1.4. Влияние на систему комплемента.

2.3.2. Противоопухолевая активность.

2.3.3. Антивирусная, антибактериальная и антипаразитарная активность и влияние на резистентность к инфекциям.

2.3.4. Прочие, не иммунотропные свойства, и исследования на токсичность.

2.3.5. Действие фукоиданов на систему свертывания крови. Связь структуры и функции.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.:.

3.1. Водорастворимые полисахариды бурых водорослей Дальнего Востока.

3.1.1 Новый метод выделения полисахаридов из бурых водорослей.

3.1.2. Содержание и структурные характеристики водорастворимых полисахаридов бурых водорослей в зависимости от условий произрцстания.

3.1.3. Структурные характеристики фукоиданов.

3.1.4. Структурные характеристики ламинаранов.

3.2. Особенности действия эндо-1,3-Р-0-глюканаз из морских моллюсков на различные Р-О-глюканы.

3.3. Некоторые свойства эндоглюканаз ЛО и Л1У.

3.3.1. Сравнение энзиматических и структурных характеристик эндоглюканаз ЛО и Л1У.

3.3.2. Иммунохимическое сравнение эндоглюканаз ЛО и Л1¥.

3.4. Получение биологически активных веществ при ферментативном преобразовании ламинаранов. Транслам.

3.5. Получение и использование антител к биологически активному глюкану -трансламу.• •.

3.6. Действие фукоиданов и ламинаранов на систему комплемента.

4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

5. ВЫВОДЫ.-.

В настоящее время актуальным является поиск новых высокоэффективных, малотоксичных биологически активных препаратов из доступных природных источников. Наибольшее признание в качестве таких веществ получили соединения полисахаридной природы. Их низкая токсичность для организма, большая степень свободы дозирования, экологически чистые и экономичные технологии производства привлекают внимание исследователей.

Источники получения полисахаридов могут быть различными: бактерии, водоросли, мхи, лишайники, грибы, высшие растения. Среди них одними из наиболее эффективных и доступных являются полисахариды водорослей, так как около половины органических веществ в мире продуцируются водорослями, при этом полисахариды составляют основную массу органического вещества. Использование водорослей и морских трав как сырья в нашей стране имеет большое значение из-за большой протяженности береговой линии, а также экономически выгодной возможности возделывать их в марикультуре повсеместно, в водных биотопах любого типа. Себестоимость их производства ниже, а технология проще и экологически безопаснее производства бактериальных и синтетических полисахаридов. Кроме того, биологическое действие некоторых полисахаридов из морских водорослей и трав более выражено, чем бактериальных, дрожжевых и полисахаридов из высших растений.

Бурые водоросли, являющиеся богатым и легко возобновляемым сырьевым источником интересных по структуре и биологической активности полисахаридов, заслуживают особого внимания. Эти источники, наряду с широко известной альгиновой кислотой, содержат уникальные водорастворимые полисахариды -ламинараны и фукоиданы, которым принадлежит главная роль в биологическом действии водорослей. У фукоиданов обнаружены антикоагулянтная, противоопухолевая, антивирусная (в том числе против ВИЧ-инфекции), гиполипидемическая, иммуномодулирующая активности. Интерес к 1,3; 1,6-^-0-глюканам, к которым относятся ламинараны, обусловлен прямым участием этих полисахаридов в животном и растительном иммунитете. Учитывая природное происхождение, традиционное использование в пищу жителями приморских областей многих из исследуемых водорослей, данные полисахариды могут быть использованы с целью иммунокоррекции в виде пищевых добавок. Ламинараны и фукоиданы из беломорских водорослей в настоящее время предлагаются как антиопухолевые средства, кроме того они являются исходным материалом для получения методом ферментативной трансформации новых биологически активных гликанов.

Ферментативная трансформация этих полисахаридов и, в частности, под действием ферментов из морских источников, заслуживает особого внимания. Она открывает возможности получения более биологически активных соединений, чем исходные полисахариды, труднодоступных олигосахаридов и т.д. Чаще всего эти ферменты содержатся в пищеварительных трактах морских беспозвоночных, в том числе, в кристаллических стебельках морских моллюсков, которые являются отходами переработки морепродуктов.

При производстве альгиновой кислоты или другой переработке водорослей, ламинараны и фукоиданы также попадают в отходы, хотя очевидно, что эти полисахариды могут быть использованы в медицине, рыбоводстве, микробиологии.

Применение фукоиданов и ламинаранов как терапевтических агентов сдерживается проблемами получения фракций со стандартными характеристиками. Трудности со стандартизацией связаны с тем, что содержание и структурные характеристики этих полисахаридов варьируют от сезона сбора, возраста водоросли, а также отсутствием простых методов их выделения и фракционирования.

Исходя из вышеизложенного, представляется актуальным разработка простого и технологичного метода получения и фракционирования водорастворимых полисахаридов бурых водорослей; изучение ферментативной трансформации полисахаридов; получение препаративных количеств исходных и синтезированных соединений; выяснение структурных характеристик полисахаридов, лежащих в основе их биологического действия.

-62. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

-785. ВЫВОДЫ

1. Предложен новый метод выделения водорастворимых полисахаридов из бурых водорослей, использующий гидрофобную хроматографию и позволяющий в одну стадию разделить нейтральные и заряженные полисахариды.

2. Выделены и охарактеризованы фракции сульфатированных полисахаридов -фукоиданов, различающиеся моносахаридным составом и степенью сульфатирования, а также ламинараны с различной степенью разветвленности.

3. Изучена специфичность действия эндо-1,3-(3-0-глюканаз из морских моллюсков Chlamys albidus (ЛО) и Spisula sachalinensis (Л1У) на линейный 1,3-P-D-глюкан и разветвленный 1,3;1,6-Р-0-глюкан. Под действием Л1У Р-1,6-связанные остатки глюкозы накапливаются, в основном, во фракции трисахаридов, а под действием ЛО - во фракции тетрасахаридов, содержащей 2 б"1- и 6 -P-D-глюкопиранозилламинаритриозы в соотношении 1:1.

4. Установлено, что 6э~Р-0-глюкопиранозилламинаритриоза обладает ингибирующим действием на реакцию гидролиза, осуществляемую эндо-1,3-Р-D-глюканазами ЛО и Л1У.

5. Показано, что эндоглюканаза Л1У на высокоразветвленные 1,3;1,6-P-D-глюкоолигосахариды не действует, тогда как при действии на них эндоглюканазы ЛО в качестве продуктов образуются только 1,3;1,6-P-D-глюкоолигосахариды с большей молекулярной массой, а продукты гидролиза практически отсутствуют. Таким образом, впервые для этой группы ферментов у эндо-1,3-Р-0-птюканазы ЛО обнаружена глюканозилтрансферазная активность.

6. Действием эндо-1,3-Р-0-глюканазы ЛО на ламинаран из Laminaria cichorioides получен новый 1,3;1,6-Р-0-глюкан - транслам, обладающий иммуномодулирующей активностью. Разработан препаративный способ его получения.

7. Разработан метод конкурентного иммунно-ферментного анализа на основе полученных поликлональных антител к трансламу, который применен для сравнения и стандартизации различных партий транслама и ламинарана.

1. Кочетков Н.К., Бочков А.Ф., Дмитриев Б.А. и др. Химия углеводов. М.: Химия1967. С. 477-556.

2. Усов А.И., Чижов O.C. Химические исследования водорослей. М.: Знание 1988. 48 с. (Новое в жизни, науке, технике. Сер. Химия, №5).

3. Nelson Т.Е., Lewis В.A. Separation and characterization of the soluble and insoluble components of insoluble laminaran.//Carbohydr.Res. 1974. Уо1. 33. P. 63-74.

4. Percival E., Dowell R.H. Chemistry and Enzymology of Marine Algal Polysaccharides. Acad. Press: London. 1967. p. 219.

5. Percival E. Algal polysacharides./Лп: The Carbohydrates. (Chemistry and Biochemistry).

6. W. Pigman, D.Horton eds.) 1970. Acad. Press: N.Y. Vol. IIB. P. 541-544.

7. Usui T., Topiyama T., Mizuno T. Structural investigation of laminaran of Eisenia ¿>/cyc/w.//Agric.Biol.Chem. 1979. Vol. 43. P. 603-611.

8. Maeda M., Nisizawa K. Laminaran from Ishige o£amurae.//Carbohydr.Res. 1968. Vol. 7. P. 97-99.

9. Усов А.И., Чижов A.O. Полисахариды водорослей. XL. Углеводный состав бурой водоросли Chorda/?/мт.//Биоорган.химия. 1989. Т. 15. С. 208-216.

10. Varum К.М., Kvam B.J., Myklestad S., Paulsen В.S. Structure of a food-reserve P-D-glucan produced by the haptophyte alga Emiliania huxleyi.HCdixbobyàï. Res. 1986. Vol. 152. P. 243-248.

11. Kloareg В., Quatrano R. S. Structure of the cell walls of marine algae and ecophysiological functions of the matrix polysaccharides.// Oceanogr. Mar. Biol. Annu. Rev., 1988. Vol. 26. P. 259-315.

12. Nagumo T., Nishino T. Fucan Sulfates and Their Anticoagulant Activities // In: Polysaccharides in Medicinae Applications. (S.Dumitriu ed.). University of Sherbrooke, Quebes, Canada.: N. -York-Basel-Hong Kong. 1997. P. 545-574.

13. Chizhov A.O., Dell A., Morris H.R., et al. A study of fucoidan from the brown seaweed Chorda fdum.HCarbohydr. Res. 1999. Vol. 320. P. 108-119.

14. Nishino T., Nagumo T., Kiyohara H., Yamada H. Structural characterization of a new anticoagulant fucan sulfate from the brown seaweed Ecklonia kurome J/Cmbohyàr. Res. 1991. Vol. 211 P. 77-90.

15. Usui T., Asari K., Mizuno T. Isolation of highly purified "fucoidan" from Eisenia bicyclis and its anticoagulant and antitumor activities.//Agric.Biol.Chem. 1980. Vol. 44. P. 1963-1966.

16. Усов А.И., Смирнова Г.П., Билан М.И., Шашков А.С. Полисахариды водорослей. 53. Бурая водоросль Laminaria saccharina (L.) Lam. как источник фукоидана //Биоорганическая химия, 1998. Т. 24. С. 437-445.

17. Fujikawa T., Wada M. Schleim aus der Braunalge Nemacystus decipiens, Mozuku. 1. Mitt. Bestandteile des Schleims und ihre Eigenschften.//Agric.Biol.Chem. 1975. Vol. 39. P. 1109-1114.

18. Anno К., Terahata H., Hayashi Y., Seno N. Isolation and purification of fucoidan from brown seaweed Pelvetia w/g/z/zï.//Agric.Biol.Chem. 1966. Vol. 30. P. 495-499.

19. Усов А.И., Кирьянов А.В. Полисахариды водорослей. 47. Выделение фракций фукоидана из бурой водоросли Laminaria cichorioides Miyabe.//Биоорган.химия. 1994. Т. 20. С. 1342-1348.

20. Honya М, Mori Н., Anzai М., et al. Monthly changes in the content of fucans, their constituent sugars and sulfate in cultured Laminaria japonica.llHydrobiologia. 1999. Vol.399. P. 411-416.

21. Mulloy В., Ribeiro A., Alves A., et al. Sulfated fucans from echinoderms have a regular tetrasaccharide repeating unit defined by specific patterns of sulfation at the 0-2 and O-4 position.//J.Biol.Chem. 1994. Vol. 269. P. 22113 22123.

22. Schweiger R.G. Methanolysis of fucoidan. II. The presence of sugars other than L-fucose.//J.Org.Chem. 1962 Vol. 27. P 4270-4276.

23. Mori H., Kamei H., Nishide E., Nishizawa K. Sugar constituents of some sulfated polysaccharides from the sporophylls of wakame (Undaria pinnatifida) and their biological activities.// Mar. Algae Pharm. Sci. 1982. Vol. 2. P. 109-115.

24. Abdel-Fattah A.F., Hussein M.M.D, Salem H.M. Studies of the purification and some properties of sargassan, a sulphated heteropolysaccharides from Sargassum linifolium.HCarbohydr.Res. 1974. V. 33. P. 9-17.

25. Percival E. Glucuronoxylofucan, a cell-wall component of Ascophyllum nodosum. Part1.// Carbohydr.Res. 1968. Vol. 7. P. 272-283.

26. Percival E. Glucuronoxylofucan, a cell-wall component of Ascophyllum nodosum. Part1.. Methylation.//Carbohydr. Res. 1971. Vol. 17. P. 121-126.

27. Medcalf D.G., Schneider T.L., Barnett R.W. Structural features of a novel glucuronogalactofucan from Ascophyllum nodosum./ICíwhohyáv. Res. 1978. Vol. 66. P. 167-171.

28. Dillon Т., Kristensen K., O'hEochdha C. Seed mucilage of Ascophyllum nodosum (L.)// Proc.Roy.IrishAcad. 1953. Vol. 55B.P. 189-194.

29. Larsen В., Haung A., Painter T.J. Sulfated polysaccharides in brown algae. III. The native state of fucoidan in Ascophyllum nodosum and Fucus vesiculosus.I IActa Chem. Scand. 1970. Vol. 24. P. 3339-3352.

30. Percival E., Young M. Carbohydrates of the brown seaweeds. Part III. Desmarestia acw/é?fíta.//Carbohydr.Res. 1974. Vol. 32. P. 195.

31. Finch P., Percival E., Slaiding I.R., Weigel H. Carbohydrates of the antarctic brown seaweed Ascoseira m/raM¿s\//Phytochemistry. 1986. Vol. 25. P. 443-449.

32. Carlberg G.E., Percival E., Rhaman M.A. Carbohydrates of the seaweeds, Desmarestia ligulata and D.firma.ll Phytochemistry. 1978. Vol. 17. P. 1289-1295.

33. Nishino Т., Kiyohara H., Yamada H., Nagumo T. An anticoagulant fucoidan from the brown seaweed Ecklonia ¿wrome.//Phytochemistry. 1991. Vol. 30. P. 535.

34. Mebeau S., Kloareg В., Joseleau J.-P. Fractionation and analysis of fucans from brown algae.//Phytochemistry. 1990. Vol. 29. P. 2441-2445.

35. Mian A.J., Percival E. Carbohydrates of the brown seaweeds Himanthalia lorea, Bifurcaría bifurcata, and Padina pavonia. Part I. Extraction and fractionation.//Carbohydr.Res. 1973. Vol. 26. P. 133-146.

36. Rao N.V.S.A.V.P., Sastry KV„ Rao E.V. Carbohydrates of Padina tetrastomaticaJfPhytochQmistry. 1984. Vol. 23. P. 2531-2534.

37. Nagumo Т., Iizima-Mizui N., Fujihara M., et al. Separation of sulfated, fucose-containing polysaccharides from the brown seaweed Sargassum kjellmanianum and their heterogeneity and antitumor activity.//Kitasato Arch.Exp.Med. 1988. Vol. 61. P. 59-65.

38. Хоменко В.А. Химическое исследование саргассана глюкуроногликана бурой водоросли Sargassum pallidum.!УДисс. . канд. хим. наук, Владивосток, 1972, 154 с.

39. Mori Н., Nisizawa К. Sugar constituents of sulfated polysaccharides from the fronds of Sargassum riggoldianumJ/Bull. Jap. Soc. Scientific Fish. 1982. Vol. 48. P. 981-988.

40. EI-Sayed M.M. The polysaccharides of the brown seaweed Turbinaria murrayana.HCarbohydr.Res. 1982. Vol. 110. P. 277.

41. Hussein M.M.-O. Two new polysaccharides from Colpomenia sinuosa.// Phytochemistry. 1975. Vol.

42. Patankar M.S., Oehninger S., Barnett Т., et al. A revised structure for fucoidan may explain some of its biological activities.//J.Biol.Chem. 1993. Vol. 268. P. 21770-21776.

43. Chevolot L., Foucault A., Chaubet F., et al. Further data on the structure of brown seaweed fucans: relationships with anticoagulant activity.//Carbohydr.Res. 1999. Vol. 319. P. 154-165.

44. Nishino T.,Takabe Y. Isolation and partial characterization of a novel (3-D galactan sulfate from the brown seaweed Laminaria angustata var. longissima.//Carbohydr. Polymers, 1994. Vol. 23. P. 165-173.

45. PCT Int. Appl. WO 96 34,004 (CL. C07H11/00) Oligosaccharides manufacture by hydrolysis of fucoidan.//Sakei Т., Kimura H., Kojima K., Ikai K., Akiyoshi S., Nakanishi Y., Katj I. Chem.Abstr. 1997. Vol. 126. 46368z.

46. Drummond G.S., Smith E.E., Whtllan W.J. Purification and properties of potato a-1,4-glucan a-l,4-glucan-6-glycosyltransferase (Q-enzyme).// Eur.J.Biochem. 1972. Vol. 26. P.168-176.

47. Morell M.K., Blennow A., Kosar-Hashemi В., Samuel M.S. Differential expression and properties of starch branching enzyme isoforms in developing wheat endosperm.//Plant Physiol. 1997. Vol. 113. P. 201-208.

48. Kuriki Т., Stewart D.C., Preiss J. Construction of chimeric enzymes out of maize endosperm branching enzymes I and II: activity and properties.//J.Biol.Chem. 1997. V. 46. P. 28999-29004.

49. Tomlinson K.L., Lloyd J.R., Smith A.M. Importance of isoforms of starch-branching enzyme in determining the structure of starch in pea leaves.//Plant J. 1997. Vol. 11. P. 31-43.

50. Fredrick J.F. The b.e. and Q types of a-l,4-D-glucan: a-l,4-D-glucan-6-glycosyltransferase isozymes in algae.//Phytochemistry 1980. Vol. 19. P. 539-542.

51. Martin C., Smith A.M. Starch biosynthesis.//Plant Cell. 1995. Vol. 7. P. 971-985.

52. Гудвин Т., Мерсер Э. Введение в биохимию растений. (Под ред. B.JI. Кретовича) М. Высшая школа. - 1986. 392 с.

53. Takata Н., Kuriki T.,Okada S., et. al. Action of neopullulanase. Neopullulanase catalyzed both hydrolysis and transglycosylation at a-l-»4- and a-l-»6-glucosidic linkages.//J.Biol.Chem. 1992. V. 267. P. 18447-18452.

54. Guan H.P., Preiss J. Differentiation of the properties of the branching isozymes from maize (Lea moys).//Plant Physiol. 1993. Vol. 102. P. 1269-1273.

55. Czop J.K., Austen K.F. Properties of glucans that activate the human alternative complement pathway and interact with the human monocyte P-glucan receptor.//J.Immunol. 1985. Vol. 135. P. 3388-3393.

56. Czop J.K., Austen K.F. A P-Glucan inhibitable receptor on human monocytes: its identity with the phagocytic receptor for particulate activators of the alternative complement pathway.//J.Immunol. 1985. Vol. 134. P. 2588-2593.

57. Goldman R. Characteristics of the P-glucan receptor of murine macrophages.//Exptl Cell Res. 1988. Vol. 174. P. 481-490.

58. Goldman R. Induction of a (3-1,3-D-glucan receptor in P388D1 cells treated with retinoic acid or 1,25-dihydroxyvitamin D3.//Immunology. 1988. Vol. 63. P. 319-324.

59. Czop J.K., Austen K.F. Generation of leukotrienes by human monocytes upon stimulation of their P-glucan receptor during phagocytosis.//Proc.Natl.Acad. Sci. 1985. Vol.82. P. 2751-2758.

60. Janusz M.J., Austen K.F., Czop J.K. Lysosomal enzyme release from human monocytes by particulate activators is mediated by P-glucan inhibitable receptors.//J.Immunol. 1987. Vol. 138. P. 3897-3901.

61. Morikawa K., Kamegaya S., Yamazaki M., Mizuno D. Hydrogen peroxide as a tumoricidal mediator of murine polymorphonuclear leukocytes induced by a linear P-l,3-D-glucan and some other immunomodulators.//Cancer Res. 1985. Vol. 45. P. 3482-3495.

62. Williams J.D., Topley N., Alobaidi H.M., Harber M.J. Activation of human polymorphonuclear leucocytes by particulate zymosan is related to both its major carbohydrate components: glucan and mannan.//Immunology. 1986. Vol. 58. P. 117124.

63. Muller C.D., Bocchini V., Giaminis J., et al. Functional P-glucan receptor expression by a microglial cell-line //Research in Immunology. 1994. Vol. 145. P. 67-275.

64. Palkama T. Induction of interleukin-1 production by ligands binding to the scavenger receptor in human monocytes and the THP-1 cell line//Immunology. 1991. Vol. 74. P. 432-438.

65. Xu X., Remold H.G., Caulfield J.P. Potential role for scavenger receptors of human monocytes in the killing of Schistosoma mansoni.//Am. J.Pathol. 1993. Vol. 142. P. 685689

66. Sung C.P., Strorer В., Arleth A., et al. Evidence for the involvement of carbohydrate moieties in the adhesion of U937 cells to tumor necrosis factor-a (TNFa)-stimulated vascular endothelium in vitro .//Agents Actions 1991. Vol. 34. P. 205-207

67. Itoh H., Noda H., Amano H., et al. Antitumor activity and immunological properties of marine algal polysaccharides, especially fucoidan, prepared from Sargassum thunbergii of Phaeophyceae.//Anticancer Res. 1993. Vol. 13. P. 2045-2052

68. Itoh H., Noda H., Amano H., Ito H. Immunological analysis of inhibition of lung metastases by fucoidan (GIV-A) prepared from brown seaweed Sargassum thunbergii.//Anticancer Res. 1995. Vol. 15. P. 1937-1947

69. Brenan M., Parish C.R. Modification of lymphocyte migration by sulfated polysaccharides.//Eur.J.Immunol. 1986. Vol. 16. P. 423-430.

70. Granert C., Raud J., Xie X., et al. Inhibition of leukocyte rolling with polysaccharide fucoidin prevents pleocytosis in experimental meningitis in the rabbit.//J.Clin.Invest. 1994. Vol. 93. P. 929-936

71. Angstwurm K., Weber J.R., Segert A., et al. Fucoidin, a polysaccharide inhibiting leukocyte rolling, attenuates inflammatory responses in experimental pneumococcal meningitis in rats.//Neurosci.Lett. 1995. Vol. 191. P. 1-4

72. Shimaoka M., Ikeda M., Iida T., et al. Fucoidin, a potent inhibitor of leukocyte rolling, prevents neutrophil influx into phorbol-ester-induced inflammatory sites in rabbit lungs.//Am.J.Respir.Crit Care Med. 1996. Vol. 153. P. 307-311

73. Vanosselaer N., Rampart M., Herman A.G. Differential inhibition of polymorphonuclear leucokocyte recruitment in vivo by dextran sulfate and fucoidan.// Mediators Inflammation. 1996. Vol. 5. P. 346-347.

74. Bartlett M.R., Warren H.S., Cowden W.B., Parish C.R. Effects of the anti-inflammatory compounds castanospermine, mannose-6- phosphate and fucoidan on allograft rejection and elicited peritoneal exudates.//Immunol.Cell Biol. 1994. Vol. 72. P. 367-374

75. Damle N.K., Klussman K., Dietsch M.T., et al. GMP-140 (P-selectin/CD62) binds to chronically stimulated but not resting CD4+ T-lymphocytes and regulates their production of proinflammatory cytokines.//Eur. J.Immunol. 1992. Vol. 22. P. 1789-1793

76. Rochon Y.P., Simon S.I., Lynam E.B., Sklar L.A. A role for lectin interactions during human neutrophil aggregation //J.Immunol. 1994. Vol. 152. P. 1385-1393

77. Brennan J., Takei F., Wong S., Mager D.L. Carbohydrate recognition by a natural killer cell receptor, Ly-49C.//J.Biol.Chem. 1995. Vol. 270. P. 9691-9694

78. McCaffrey T.A., Falcone D.J., Vicente D., et al. Protection of transforming growth factor-P 1 activity by heparin and fucoidan // J.Cell Physiol 1994. Vol. 159. P. 51-59

79. Dale M., Foreman J., Fan T. (Ed.) Textbook of Immunopharmacology. Oxford: Blackwell Sci. Publ. 1994. 370 p.

80. Blondín C., Fischer E., Boisson-Vidal C., et al. Inhibition of complement activation by natural sulfated polysaccharides (fucans) from brown seaweed.//Mol.Immunol. 1994. Vol. 31. P. 247-253

81. Blondín C., Chaubet F., Nardella A., et al. Relationships between chemical characteristics and anticomplementary activity of fucans.//Biomaterials. 1996. Vol. 17. P. 597-603

82. Adachi Y., Ohno N., Ohsawa M., et al. Macrophage activation in vitro by chemically cross-linked (l->3) P-D glucans //Chem.Pharm.Bull. 1990. Vol. 38. P. 988-992.

83. Colwell R.R. Marine Polysaccharides for pharmaceutical and microbiological applications.//In: Biotechnology of Marine Polysaccharides. (R.R.Colwell ed.). Washington, N.-Y., L. 1985. P. 363-376.

84. Yamamoto I., Takanashi M., Tamura E., et al. Antitumor activity of edible marine algae: Effect of crude fucoidan fractions prepared from edible brown seaweeds against L1210 leukemia.//Hydrobiologia. 1984. Vol. 116/117. P. 145-148.

85. Yamamoto I., Takahashi M., Suzuki Т., et al. Antitumor effect of seaweeds. IV. Enhancement of antitumor activity by sulfation of a crude fiicoidan fraction from Sargassum kjellmanianum J/Jpn J.Exp.Med. 1984. Vol. 54. P. 143-151

86. Ellouali M., Boisson-Vidal C.5 Durand P., Jozefonvicz J. Antitumor activity of low molecular weight fucans extracted from brown seaweed Ascophyllum nodosum.//Anticancer Res. 1993. Vol. 13. P. 2011-2019

87. Zhuang C., Itoh H., Mizuno Т., Ito H. Antitumor active fucoidan from the brown seaweed, umitoranoo {Sargassum //z^6erg//).//Biosci.Biotechnol.Biochem. 1995. Vol. 59. P. 563-567

88. Riou D., Colliec-Jouault S., Pinczon du Sel D., et al. Antitumor and antiproliferative effects of a fucan extracted from Ascophyllum nodosum against a non-small-cell bronchopulmonary carcinoma line.//Anticancer Res. 1996. Vol. 16. P. 1213-1218

89. Soeda S., Ishida S., Shimeno H., Nagamatsu A. Inhibitory effect of oversulfated fucoidan on invasion through reconstituted basement membrane by murine Lewis lung carcinoma.//Jpn.J.Cancer Res. 1994 Vol. 85. P. 1144-1150

90. Soeda S., Ishida S., Honda O., et al. Aminated fucoidan promotes the invasion of 3 LL cells through reconstituted basement membrane: its possible mechanism of action.//Cancer Lett. 1994. Vol. 85. P. 133-138

91. Coombe D.R., Parish C.R., Ramshaw I.A., Snowden J.M. Analysis of the inhibition of tumour metastasis by sulphated polysaccharides.//Int.J.Cancer. 1987. Vol. 39. P. 82-88

92. Coombe D.R., Parish C.R., Jacobsen K.B., Underwood P.A. Sulfated polysaccharides with antimetaststic activity acts by inhibiting tumor cell secreted endoglycosidases.// Cell.Biol.Int.Rep. 1987. Vol. 11. P.53.

93. Steuer M.K., Steuer M., Bonkowsky V., et al. Characterization of sugar receptor expression by neoglycoproteins in oral and oropharyngeal squamous cell carcinomas// Eur.Arch.Otorhinolaryngol. 1995. Vol. 252. P. 292-297

94. Aoki T. Lentinan.//In: Immune Modulation Agents and Their Mechanisms. (Fenchel R.s Chirigos M.A. eds) N.-Y.-Basel: Marsel Dekker, Inc. 1984. P. 63-76.

95. Елякова JI.А. Регуляция Р-1,3;1,6-глюканами растительного и животного иммунитетов. Энзиматический синтез новых иммуностимуляторов.//Вестник ДВО РАН. 1995. №2. С.74-85.

96. Kulicke W.-M., Lettau A.I., Thielking Н. Correlation between immunological activity, molar mass, and molecular structure of different (1—>3)-P-D-glucans.//Carbohydr.Res. 1997. Vol. 297. P. 135-143.

97. Czop J.K., Kay J. Isolation and characterization of p-glucan receptors on human mononuclear phagocytes.//J.Exp. Med. 1991. Vol. 173. P. 1511-1520.

98. Hamuro J., Chihara G. Lentinan., a T-cell-oriented immunopotentiator.// In: Immune Modulation Agents and Their Mechanisms. (Fenchel R., Chirigos M.A. eds) N.-Y. -Basel: Marsel Dekker, Inc. 1984. P. 409-436.

99. McClure M.O., Whitby D., Patience et al. Dextrin sulfate and fucoidan are potent inhibitors of HIV infection in vitro.//Antivir.Chem.Chemoter. 1991. Vol. 2. P. 149-156.

100. McClure M.O., Moore J.P., Blanc D.F., et al. Investigations into the mechanism by which sulfated polysaccharides inhibit HIV infection in vitro.//AIDS Res.Hum.Retroviruses. 1992. Vol. 8. P. 19-26

101. Lynch G., Low L., Li S.,et al. Sulfated polyanions prevent HIV infection of lymphocytes by disruption of the CD4-gpl20 interaction, but do not inhibit monocyte infection.//J.Leukoc.Biol. 1994. Vol. 56. P. 266-272

102. Sugawara I., Itoh W., Kimura S., et al. Further characterization of sulfated homopolysaccharides as anti-HIV agents.//Experientia 1989. Vol. 45. P. 996-998

103. Beress A., Wassermann O., Bruhn T., et al. A new procedure for the isolation of anti-HIV compounds (polysaccharides and polyphenols) from the marine alga Fucus vesiculosus.ilNatural Products-Lloydia. 1993. Vol. 56. P. 478-488.

104. Pearce-Pratt R., Phillips D.M. Sulfated polysaccharides inhibit lymphocyte-to-epithelial transmission of human immunodeficiency virus-l.//Biol.Reprod. 1996. Vol. 54. P. 173-182

105. Garcia-Villalon D., Gil-Fernandez C. Antiviral activity of sulfated polysaccharides against African swine fever virus.//Antiviral Res. 1991. Vol. 15. P. 139-148

106. Mayer A.M.S., Krotz L., Bonfil R.D., et al. Biological activity in Macrocystis pyrifera from Argentina: sodium alginate, fucoidan and laminaran. I. Antitumor, cytotoxicity and humoral response.//Hydrobiologia. 1987. Vol. 151/152. P. 483-489.

107. Brennan M.J., Hannah J.H., Leininger E. Adhesion of Bordetella pertussis to sulfatidés and to the GalNAc-P-l->4Gal sequence found in glycosphingolipids.// J.Biol.Chem. 1991. Vol. 266. P. 18827-18831

108. Pascu C., Ljungh A., Wadstrom T. Staphylococci bind heparin-binding host growth factors.//Curr.Microbiol. 1996. Vol. 32. P. 201-207

109. Pancake S.J., Holt G.D., Mellouk S., Hoffman S.L. Malaria sporozoites and circumsporozoite proteins bind specifically to sulfated glycoconjugates.//J.Cell Biol. 1992. Vol. 117. P. 1351-1357

110. Xiao L., Yang C., Patterson P.S., et al. Sulfated polyanions inhibit invasion of erythrocytes by plasmodial merozoites and cytoadherence of endothelial cells to parasitized erythrocytes.//Infect.Immun. 1996. Vol. 6. P. 1373-1378.

111. Zhang Q., Young T.F., Ross R.F. Glycolipid receptors for attachment of Mycoplasma hyopneumoniae to porcine respiratory ciliated cells.//Infect.Immun. 1994. Vol. 62. P. 4367-4373

112. Zaretzky F.R., Pearce-Pratt R., Phillips D.M. Sulfated polyanions block Chlamydia trachomatis infection of cervix-derived human epithelia.//Infect.Immun. 1995. Vol. 63. P. 3520-3526

113. Katsuraya K., Nakashima H., Yamamoto N., Uryu T. Synthesis of sulfated oligosaccharide glycosides having high anti-HIV activity and the relationship between activity and chemical structure.//Carbohydr.Res. 1999. Vol. 315. P. 234-242.

114. Figueira M.M., Volesky B., Ciminelli V.S.T., Roddick F.A. Biosorption of metals in brown seaweed biomass.//Water Research. 2000. Vol. 34. P. 196-204.

115. Becker G., Osterloh K., Schafer S., et al. Influence of fucoidan on the intestinal absorption of iron, cobalt, manganese and zinc in rats.//Digestion. 1981. Vol. 21. P. 612.

116. Lyamkin G.P., Artyukov A.A., Loenko Yu.N. The application of marine natural polysaccarides to remove lead ions from organisms.//Proc. 6th Int.Symp. Marine Natural Products. Dakar, Senegal. 1989. P. 12.

117. Remedium. 1997. №4. P. 49.

118. Weijian X., Weng Y., Qionghua C. Prevention and treatment of alloxan-induced diabetes in mice by the polysaccharides from Laminaria japonica and Hericium erinaceus.//Zhongguo Yaoke Daxue Xuebao. 1989. Vol. 20. P. 378-380.

119. Dalmo R.A., Ingebrigtsen K., Bogwald J. et al. Accumulation of immunomodulatoiy laminaran (P-l,3-D-glucan) in the spleen and kidney of atlantic salmon, Salmo salar L.// J.Fish Diseases. 1995. Vol. 18. P. 545-553.

120. Dalmo R.A., Ingebrigtsen K., Sveinbjornsson В., Seljelid R. Accumulation of immunomodulatory laminaran (|3-l,3-D-glucan) in heart, spleen and kidney of atlantic cod, Gadus morhua L.//J.Fish Diseases. 1996. Vol. 19. P. 29-136.

121. Mahony M.C., Clark G.F., Oehninger S., et al. Fucoidin binding activity and its localization on human spermatozoa.//Contraception. 1993. Vol. 48. P. 277-289.

122. Oehninger S., Clark G.F., Fulgham D., et al. Effect of fucoidin on human sperm-zona pellucida interactions.//!Androl. 1992. Vol. 13. P. 519-525.

123. Jones R., Williams R.W. Characterization of receptors for sulphated polysaccharides on guinea-pig spermatozoa.//Biochem.Soc.Trans. 1990. Vol. 18. 497-498.

124. Hirmo S., Utt M., Ringer M., Wadstrom T. Inhibition of heparan-sulfate and other glycosaminoglycans binding to Helicobacter pylori by various polysulfated carbohydrates.//FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1995. Vol. 10. P. 301-306.

125. Розкин М.Я., Левина M.H., Ефимов B.C., Усов A.M. Антикоагулянтная и стимулирующая липолиз активность полисахаридов из бурых морских водорослей.//Фармакология и токсикология. 1991. Т. 54. С. 40-42.

126. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э. и др. Основы биохимии. Т. 3. (Под ред. Ю.А.Овчинникова) М.: Мир, 1986. 534 с.

127. Millet J., Jouault S.C., Mauray S., et al. Antithrombotic and anticoagulant activities of a low molecular weight fucoidan by the subcutaneous route.//Thromb.Haemost. 1999. Vol. 81. P. 391-395

128. Nishino Т., Nagumo T. Sugar constituents and blood-anticoagulant activities of fucose-containing sulfated polysaccharides in nine brown seaweed species.// Nippon Nogeikagaku Kaishi. 1987. Vol. 61. 361-363.

129. Gernardi G., Springer G.F. Properties of highly purified fucan.//J.Biol.Chem. 1962. Vol. 237. P. 75-80.

130. Kitamura K., Matsuo M., Yasui T. Fucoidan from brown seaweed Laminaria angustata var. /o«<g"m/ma.//Agric.Biol.Chem. 1991. Vol. 55. P. 615-620.

131. Grauffel V., Kloareg В., Mabeau S., et al. New natural polysaccharides with potent antithrombic activity: fucans from brown algae.//Biomaterials. 1989. Vol. 10. P. 363368.

132. Nishino Т., Nagumo T. Change in the anticoagulant activity and composition of a fucan sulfate from the brown seaweed Ecklonia kurome during refrigerated storage of the fronds.//Bot.Mar. 1991 Vol. 34. P. 387-389.

133. Nishino Т., Aizu Y., Nagumo T. The influence of sulfate content and molecular weight of a fucan sulfate from the brown seaweed Ecklonia kurome on its antithrombin activity.//Thromb.Res. 1991. Vol. 64. P. 723-731

134. Haroun-Bouhedja F., Ellouali M., Sinquin C., Boisson-Vidal C. Relationship between sulfate groups and biological activities of fucans.//Thromb.Res. 2000. Vol. 100. P. 453459.

135. Abdel-Fattah A.F., Hussein M.M.-D., Fouad S.T. Carbohydrates of the brown seaweed Dictyota dichotoma.ilPhytochemistry, 1978. Vol. 17. P. 741-745.

136. Hussein M.M.-D., Abdel-Aziz A., Salem H.M. Sulphated heteropolysaccharides from PadinapavomW/Phytochemistry. 1980. Vol. 19. 2131 2136.

137. Mauray S., Sternberg C., Theveniaux J., et al. Venous antithrombotic and anticoagulant activities of a fucoidan fraction.//Thromb.Haemost. 1995. Vol. 74. P. 1280-1285.

138. US Patent N 5,948,405. Fucan with low molecular weight having anticoagulant, antithrombinic and antithromobic activity./ Cedro A., Porta R., Cattaneo F., Trento F., EnnioA. 1999.

139. Игнатенко JI.А. Иммуномодулирующие и радиозащитные свойства транслама //Дисс. канд.мед.наук. 1994. Владивосток. 160 с.

140. Zvyagintseva T.N., Elyakova L.A. A study of the laminarins of some far-eastern brown seaweeds.//Carbohydr.Res. 1974. Vol. 34. P. 241-248.

141. Патент РФ №1642725. Способ получения ламинарина./Звягинцева Т.Н., Елякова Л.А., Сундукова Е.В. БИ №14. 1991.

142. Zvyagintseva T.N., Shevchenko N.M., Popivnich I.В., et al. A new procedure for the separation of water-soluble polysaccharides from brown seaweeds.//Carbohydr.Res. 1999. Vol. 322. P. 32-39.

143. Патент РФ №2135518 Способ получения водорастворимых полисахаридов бурых водорослей./Звягинцева Т.Н., Шевченко Н.М., Попивнич И.Б., Светашева Т.Г., Исаков В.В., Скобун А.С., Елякова Л.А. БИ №24. 1999

144. А.с. №1329153. Способ выделения разветвленных 1,3;1,6-Р-0-глюкоолиго- и полисахаридов./Звягинцева Т.Н., Елякова Л.А., Исаков В.В., Шевченко Н.М. БИ №29. 1987.

145. А.с. №900588. Способ получения гликозидов, обладающих антигрибковым действием./ Ильченко Г.И., Стоник В.А. и др. БИ №19. 1984.

146. А.с. №953565. Способ очистки низкомолекулярных белков.// Зыкова Т.А., Вожжова Е.И., Козловская Э.П., Еляков Г.Б. БИ №31. 1982.

147. Zvyagintseva T.N., Sundukova E.V., Shevchenko N.M., Elyakova L.A. Water soluble polysaccharides of some Far-Eastern seaweeds.//PICES Scientific Report. 1996. Vol. 2 . C. 406-410.

148. Широкова Н.И. Полиферментная система р-1,3-глюканаз из моллюска Eulota maakii: свойства, специфичность и механизм действия отдельных компонентов.// Дисс. . канд. хим. наук. Владивосток. 1985. 206 с.

149. Elyakova L.A, Shevchenko N.M., Avaeva S.M. A comparative study of carbohydrase activities in marine invertebrates.//Comp.Biochem.Biophys. 1981. Vol. 69B. P. 905908.

150. Сундукова Е.В., Елякова JI.A. Распространение некоторых глюканаз среди морских беспозвоночных.//Биология моря. 1989. №4. С. 78-80.

151. Privalova N.M., Elyakova L.A. Purification and some properties of endo-p-l-»3-glucanase from marine bivalve Chlamys a/6/<^.//Comp.Biochem.Physiol. 1978. Vol. 60B. P. 225-228.

152. Sova V.V., Elyakova L.A., Vaskovsky V.E. Purification and some properties of 1—»3-P-glucan glucanohydrolase from the crystalline style of bivalve, Spisula sachalinensis. //Biochim.biophys. Acta. 1970. V. 212. P.l 11-115.

153. A.c. №574469 Способ получения эндо-1,3-Р-0-глюканазы./Елякова Л.А. Привалова Н.М. БИ №36,1977.

154. Елякова Л.А., Звягинцева Т.Н., Привалова Н.М. Сравнительная характеристика и изучение сорбционных свойств активных центров эндо-Р-1,3-глюканаз из морских беспозвоночных.//Биоорган. химия. 1978. Т. 4. С. 1553-1559.

155. Sova V.V., Elyakova L.A. Some aspects of the specificity and action pattern of P-l,3-glucan glucanhydrolase from iS,.5<arc/z«/me/75«.//Biochim.Biophys.Acta. 1972. Vol. 258. P. 219-227.

156. Безукладников П.В., Елякова Л.А., Звягинцева Т.Н., Миргородская О.Л. Изучение реакций, катализируемых карбогидразами, с помощью масс-спектрометрии ЭРИАД.//Химия природн. соедин. 1989. №1. С. 54-59.

157. Звягинцева Т.Н., Елякова Л.А. Специфичность и механизм действия эндо-1,3-Р-Б-глюканаз из морских моллюсков.//Биоорган.химия. 1994. Т. 20. С. 453-474.

158. Широкова Н.И. , Елякова Л.А. Механизм действия и специфичность экзо-Р-1,3-глюканазы из моллюска Eulota тая&и.//Биохимия. 1983. Т. 48. С. 83-91.

159. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. 3-е изд. М.:Мир, 1982. 1118 с

160. Звягинцева Т.Н. Изучение механизма действия Р-1,3-глюканаз из Spisula sachalinensis.//Дисс. . канд. хим. наук. Владивосток. 1976. 210 с.

161. Лакизова И.Ю. Сравнительное изучение эндо-Р-1,3-глюканаз морских моллюсков спектральными методами.//Дисс. . канд. хим. наук. Владивосток. 1986. 220 с.

162. Rudakova V.Ya., Shevchenko N.M., Elyakova L.A. Isolation and some properties of endo-(l-»6)-P-D-glucanases from marine mollusk Chlamys albidusJ/C omp. Biochem.Physiol. 1985. Vol. 81B. P. 677-682.

163. Назарова Н.И., Елякова Л.А. Исследование трансгликозилирующей способности эндо-Р-1,3-глюканаз. I. Ламинарин и его олигосахариды в качестве доноров и арил-Р-Б-гликозиды в качестве акцепторов.//Биоорган.химия. 1982. Т. 8. С. 1189-1196.

164. Звягинцева Т.Н., Сова В.В., Бакунина И.Ю. и др. Морские организмы как источники биологически активных полисахаридов, полисахарид гидролаз с уникальной специфичностью и их ингибиторов.//Химия в интересах устойчивого развития. 1998. №6. С. 417-426.

165. Елякова Л.А., Светашева Т.Г. Сова В.В. Шевченко Н.М. Исследование функциональных групп, существенных для каталитической активности эндо-1—»3-p-D-глюканазы из Chlamys albidus методом химической модификации.// Биохимия. 1984. Т. 49. С. 762-1768.

166. Савельев А.Н., Яковлева М.Ф., Фиреов JI.M. Углеводный состав и некоторые свойства глюкоамилазы из Aspergillus аугатоп'.//Биохимия, 1984. Т.49.С.1754-1761.

167. Post С.В., Karplus М. Does lysozyme follow the lysozyme pathway. An alternative based on dynamic structural and stereoelectronic considerations.//J.Amer.Chem.Soc. 1986. Vol. 108. P. 1317-.

168. Девэни Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды и белки. М: Мир. 1976. 116 с.

169. Prager Е.М., Wilson А.С. The dependence of immunological cross-reactivity upon sequence resemblance among lysozymes.//J.Biol.Chem. 1971. Vol. 246. P. 7010-7015.

170. Hanke H., Prager E.M., Wilson A.C. Quantitative immunological and electrophoretic comparison of primate lysozymes.//J.Biol.Chem. 1973. Vol. 248. P. 2824-2830.

171. Бэм Э. Двойная радиальная иммунодиффузия по Ухтерлони.//В кн.: Иммунологические методы (Под ред.Х. Фримеля) М.: Мир. 1979. С. 31-37.

172. Сова В.В., Мястовская О.М., Светашева Т.Е. и др. Сравнение энзиматических и структурных характеристик 1,3-|3-0-глюканаз из морских моллюсков.// Химия природ.соедин. 1987. №4. С.577-580.

173. Maximenko N., Panteleev G., Grotov A., et al. Mean circulation in the North Western Pacific mixed layer from Toga/woce Lacrangian drifters.//Proc. CREMS 97 Int. Symp., 28-30 January 1997, Fukuoka, Japan, P. 189-192.

174. Borovsky D., Smith E.E., Whelan W.J. On the mechanism of amylose branching by potato Q-enzyme.//Eur.J.Biochem. 1976. Vol. 62. P. 307-312.

175. Беседнова H.H., Звягинцева Т.Н., Елякова J1.А. Иммунотропные свойства 1—*3;1 —>6-р-0-глюканов.//Антибиотики и химиотерапия. 2000. Т 45. С 37-44.

176. Звягинцева Т.Н., Елякова J1.A., Исаков В.В. Ферментное превращение ламинаранов в 1->3;1-»6-(3-В-глюканы, обладающие иммуностимулирующим действием.//Биоорган.химия. 1995. Т. 21. С.218-225.

177. Запорожец Т.С., Беседнова Т.Н., Елякова Л.А. и др. Влияние транслама на иммунный ответ облученных мышей.//Радиационная биология радиоэкология. 1995. Т. 35. С. 260-263.

178. Патент РФ №2095417. Способ получения глюкана, обладающего иммуностимулирующей активностью./Елякова Л.А., Звягинцева Т.Н., Шевченко Н.М. БИ №31. 1997.

179. Патент РФ №2097059. Способ лечения острой формы лучевой болезни./ Чертков К.С., Чотий В.Е., Стеймацкая З.А., Нестерова А., Елякова Л.А., Звягинцева Т.Н., Шевченко Н.М., Беседнова Н.Н., Игнатенко Л.А. БИ №33. 1997.

180. Adachi Y., Ohno N., Yadomae Т. Preparation and Antigen-specificity of an anti-(l,3)-P-D-glucan antibody.//Biol.Pharm.Bull. 1994. Vol. 17. P. 1508-1512.

181. Tabata K., Itoh W., Hirata A., et al. Preparation of polyclonal antibodies to an antitumor (l->3)-p-D-glucan, schizophyllan.//Agric.Biol.Chem. 1990. Vol. 54. P. 19531959.

182. A.c. 1227199. Способ получения пустулана./Звягинцева Т.Н., Сундукова Е.В., Мищенко Н.П., Кривощекова О.Е., Елякова Л.А.

183. Dubois М., Gilles К.A., Hamilton J.K., et al. Colorimetric method for determination of sugars and related substances.//Anal.Chem. 1956. Vol. 28. P. 350-356.

184. Nelson N. A photometric adaptation of the Somogyi method of determination of glucose.//J. Biol. Chem. 1944. Vol. 153. P. 375-381.

185. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.I. Protein measurement with the Folin phenol reagent.//J.Biol.Chem. 1951. Vol. 193. P. 265-275.