Жидкостная хроматография фталоцианинов и их структурных аналогов тема автореферата и диссертации по химии, 02.00.02 ВАК РФ
|
Уварова, Мария Игоревна
АВТОР
|
||||
|
кандидата химических наук
УЧЕНАЯ СТЕПЕНЬ
|
||||
|
Москва
МЕСТО ЗАЩИТЫ
|
||||
|
2000
ГОД ЗАЩИТЫ
|
|
02.00.02
КОД ВАК РФ
|
||
|
|
||||
На правах рукописи
РГБ ОД
О 4 ЛЕК 2300
УВАРОВА МАРИЯ ИГОРЕВНА
ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ ФТАЛОЦИАНИНОВ И ИХ СТРУКТУРНЫХ АНАЛОГОВ
02.00.02 - Аналитическая химия
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук
Москва-2000
Работа выполнена на кафедре аналитической химии Химического факультета Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова
Научный руководитель: кандидат химических наук, доцент
БРЫКИНА Г.Д.
Научный консультант: доктор химических наук, профессор
ШПИГУН О.А.
Официальные оппоненты: доктор химических наук
ЛАНИН С.Н.
доктор химических наук ТОМИЛОВА Л.Г.
Ведущая организация: Институт химии растворов РАН, Иваново
Защита состоится 6 декабря 2000 года в час. .40 мин. вауд. 344
на заседании диссертационного Совета Д.053.05.60 по химическим наукам при Московском государственном университете им. М.В. Ломоносова по адресу: 119899, ГСП-3, Москва, В-234, Воробьевы горы, МГУ, Химический факультет.
С диссертацией можно ознакомится в библиотеке Химического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова.
Автореферат разослан «2. ноября 2000 г.
Ученый секретарь диссертационного Совета кандидат химических наук
Торочешникова И.И.
гол; п
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. При использовании фталоцианинов и их структурных аналогов в различных областях науки и техники нужны чистые соединения, не содержащие изомеров и каких-либо примесей. Обычно даже направленный синтез тетра- и октазамещенных фталоцианинов приводит к образованию ряда структурных изомеров.
Для выделения и очистки фталоцианинов (как и порфиринов) широко применяется препаративная хроматография. Определению примесей в металлфталоцианинах посвящено необычайно мало работ и практически не используется метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Методом ВЭЖХ, несомненно, может быть не только проконтролирована степень разделения и очистки структурных изомеров, но прежде всего подобраны условия для их препаративного хроматографического разделения. Метод ВЭЖХ наиболее перспективен для идентификации изомеров, оценки устойчивости продуктов синтеза, определения примесей в сырых продуктах синтеза и в очищенном материале. Отметим, что до настоящего времени не проводилось исследований, которые связывали бы структуру фталоцианинов с их хроматографическим поведением.
Таким образом, исследование поведения фталоцианинов в различных системах в условиях ВЭЖХ актуально в двух аспектах: в теоретическом - установление связи между структурой соединений и их хроматографическими свойствами и практическом идентификация фталоцианинов по параметрам удерживания, разделение структурных изомеров, определение степени очистки и др. Актуальной также является разработка различных вариантов косвенного детектирования в ВЭЖХ, поиск новых модификаторов подвижных фаз, поглощающих в видимой области спектра. В связи с этим в настоящей работе для косвенного спектрофотометрического детектирования неэлектролитов предполагается использовать фталоцианины.
Цель работы. На основе изучения хроматографического поведения и адсорбции замещенных фталоцианинов и синтетических порфиринов в различных системах растворителей на различных сорбентах при комнатной и повышенной температурах установить закономерности удерживания фталоцианинов и их структурных аналогов; использовать метод ВЭЖХ для идентификации и количественного определения этих соединений; а также для разделения изомеров, образующихся при синтезе фталоцианинов и порфинов. Конкретные задачи исследования:
- проследить влияние структуры лигандов и центрального атома металла на удерживание соединений;
использовать ВЭЖХ для идентификации, оценки степени очистки и количественного определения соединений;
- подобрать условия для разделения и идентификации структурных изомеров ряда порфиринов и фталоцианинов;
- изучить механизм адсорбции фталоцианинов и порфиринов, проверить адекватность описания экспериментальных данных уравнениями Снайдера - Сочевинского и Скотта - Кучеры;
- выбрать фталоцианины для использования в качестве модификаторов подвижных фаз для косвенного спектрофотометрического детектирования неэлектролитов.
Научная новизна. В условиях нормально- и обращенно-фазового вариантов ВЭЖХ систематически исследовано хроматографическое поведение ряда фталоцианинов (тетра-4-тярт-бутилфталоцианин, тетра(3,5-ди-/лрет-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианин, окта-4,5-карбоксифталоцианин) и их комплексов с металлами (Zn(II), Си(П), Со(П), Ni(II), Mg(n), Pd(II), Rh(UI), Lu(IV), Dy(IV), Tb(IV), Sn(IV) и др.), а также некоторых алкил- и арилзамещенных порфиринов, азапорфири-нов и их комплексов с Zn(II), Си(П) и Pd(II). Найдены условия для разделения безметальных фталоцианинов и их металлокомплексов.
Установлены закономерности удерживания фталоцианинов и порфиринов с боковыми заместителями различной природы. Исследовано влияние температуры колонки на селективность разделения соединений.
Изучена статическая и динамическая сорбция ряда фталоцианинов и порфиринов, рассчитаны изотермы адсорбции. Рассмотрена применимость классических моделей Снайдера - Сочевинского и Скотта - Кучеры для описания экспериментальных данных.
Предложены хроматографические системы и найдены условия для косвенного спектрофотометрического детектирования в видимой области спектра фуллеренов С6о и С70, показаны преимущества косвенного детектирования по сравнению с прямым ультрафиолетовым детектированием.
Практическая значимость. Полученные данные по хроматографическим параметрам удерживания фталоцианинов и порфиринов позволили выбрать системы для разделения и количественного определения методом ВЭЖХ с высокой чувствительностью тетра-4-трет-бутилфталоцианина, его комплексов с цинком и никелем, а также 15-фенил-2,8,]2,18-тетраметил-3,7-диэтилпорфирина и его комплекса с цинком. Показана перспективность метода ВЭЖХ для качественной идентификации и количественной оценки содержания фталоцианинов в продуктах синтеза и в очищенном материале. Подобраны условия для разделения структурных изомеров тетра-4-фенокси-тетра-5-нитрофталоцианата меди и атропизомеров 5,15-ди(фенил-2-метокси)-3,7,13,17-тетраметш1-2,8,12,18-тетрабутилпорфирината цинка. Проанализирован экстракт из фуллереновой сажи, содержащий фуллерены Сбо и С70.
Положения, выносимые на защиту:
1. Выводы о закономерностях удерживания тетра-4-/яре>я-бутилфталоцианина и его комплексов с металлами Zn(II), Cu(II), Co(II), Ni(II), Mg(II), Pd(II), Rh(III), Lu(IV), Dy(IV), Tb(IV), Sn(IV) на различных сорбентах.
2. Результаты сопоставления хроматографических свойств замещенных фтало-цианинов и их комплексов металлами; а также условия разделения структурных изомеров ди- и триоктадецилсульфамоилпроизводных фталоцианина.
3. Результаты исследования в условиях обращенно- и нормально-фазовой ВЭЖХ поведения алкил-, арил- и азазамещенных порфиринов, их комплексов с Zn(II), Си(П) и Pd(II); условия разделения близких по структуре порфиринатов цинка, а также атропизомеров; орто- и .мета-изомеров дифенилзамещенных порфиринов.
4. Результаты исследования механизма адсорбции некоторых порфиринов и фта-лоцианинов. Данные по изучению адсорбции соединений методом ВЭЖХ и в статических условиях, построению изотерм адсорбции и расчету термодинамических параметров адсорбции. Выводы о применимости моделей Скотта -Кучеры и Снайдера - Сочевинского.
5. Условия для идентификации и количественного определения тетра-4-отре/л-бутилфталоцианина, его комплексов с цинком и никелем, а также 15-фенил-2,8,12,18-тетраметил-3,7-диэтилпорфирина и его комплекса с цинком методом ВЭЖХ, а также разделения структурных изомеров октазамещенных фтало-цианатов меди.
6. Данные по косвенному спектрофотометрическому детектированию фуллере-нов Сбо и С70 в видимой области спектра.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на Международном аэрозольном симпозиуме IAS-3 (Москва, 2-5 декабря 1996), International congress on analytical chemistry (Moscow, June 15-21 1997), VIII International Conference on Specroscopy and Chemistry of Porphyrins (Minsk, September 22-26 1998), XIX Всероссийском Чугаевском совещании по химии комплексных соединений (Иваново, 21-25 июня 1999), Международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам "Ломоносов - 2000" (Москва, 12-15 апреля 2000).
Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано шесть статей, в том числе обзор "Порфирины и фталоцианины в высокоэффективной жидкостной хроматографии".
Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, посвященного хроматографии фталоцианинов и порфиринов и их применению в качестве неподвижных фаз в ВЭЖХ и др., шести глав экспериментальной части с обсуждением результатов по каждой главе, выводов, библиографии, включающей 111 работ отечественных и зарубежных авторов, и приложения, содержащего электронные спектры поглощения исследованных соединений. Диссертация изложена на 174 страницах машинописного текста, включает 26 таблиц и 58 рисунков.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Исходные вещества, аппаратура
Тетра-4-/яре/л-бутилфталоцианин и его комплексы с металлами синтезированы в лаборатории д.х.н. Томиловой Л.Г., МГУ. Тетра(3,5-ди-трет-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианин и его комплексы с металлами любезно предоставлены д.х.н. Милаевой Е.Р., МГУ. Окта-4,5-карбоксифталоцианин и его комплексы с металлами получены в ИГХТУ (Иваново). Алкил-, арил- и азазамещенные порфири-ны октадецилсульфамоил-производные фтапоцианина, фталоцианин синтезированы в НИОПИК (Москва). Окта-замещенные фталоцианаты меди синтезированы к.х.н. Шишкиной О.В., ИГХТУ (Иваново). Атропизомеры порфиринов и некоторые другие алкил- и арилзамещенные порфирины предоставлены д.х.н. Мамардашвили Н.Ж., ИХР РАН (Иваново). Фуллерены С6о и С70 получены к.х.н. Воробьевой C.J1., НИИ ФП (Зеленоград).
Хроматографическое поведение соединений исследовали на хроматографе фирмы Waters, США, с колонками из нержавеющей стали 300x3,9 мм, сорбент ц-Бондапак Ci8 (10 мкм); 150x3,9 мм, сорбент Новапак С)8 (3 мкм); 150x3,9 мм, сорбент Силасорб 600 (7 мкм); 300x3,9 мм, сорбент CenapoH-SGH-NH2 (7 мкм), помещенными в воздушный термостат с рабочим диапазоном температур от 20 до 150°С, расход элюента 1 мл/мин, объем пробы 2-50 мкл, длины волн детектирования 669-680 нм (фтапоцианины), 410 нм (порфирины), 368 нм (фуллерены) и на микроколоночном жидкостном хроматографе Милихром 4 с колонками из нержавеющей стали 64x2 мм, сорбент Нуклеосил Cig (5 мкм); 64x3 мм Силасорб 600 (5 мкм); 80x2 мм, сорбент Диа-cop6-130-NH2 (7 мкм); расход элюента 100 или 200 мкл/мин, объем пробы 2-15 мкл; спектрофотометрический детектор А.=336 нм (фтапоцианины), 404 нм (порфирины), температура 20°С, если не оговорено особо. В качестве подвижных фаз использовали ацетонитрил, воду, этилацетат, метилэтилкетон, ацетон, метанол, этанол, изопропа-нол, уксусную кислоту, диметилформамид, гексан, толуол, хлороформ, хлористый метилен, треххлористый этилен, декан, тетрагидрофуран или их смеси. Величины поверхностной адсорбции соединений в зависимости от их концентрации в подвижной фазе рассчитывали по методу Глюкауфа, либо определяли в статических условиях. Электронные спектры поглощения соединений снимали на спектрофотометре Hewlett Packard 8452А, 1=1 см.
Хроматографическое поведение замещенных фталоцпанинов и их комплексов с металлами
В условиях нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ изучено поведение тетра-4-отрет-бутилфталоцианина и его комплексов с металлами Zn(II), Cu(II), Mg(II), Ni(II), Pd(II), Со(П), Rh(III), Sn(IV) с соотношением металл : лиганд 1:1; Lu(IV), Dy(IV),
ТЬ(ГУ) (1:2), тетра(3,5-ди-«р«я-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианина н его комплексов с металлами 2п(П), Си(П), М§(11), Рс1(Н), РЧ(П), Со(П), фтапоцианина, тет-ра-4-трет-бутил-тетрабензотриазапорфирината меди, окта-4,5-
карбоксифталоцианина и его комплексов с металлами 2п(П), Си(П), Со(П), РЬ(П), У(1У), октадецилсульфамоил-производных фтапоцианина.
На гидрофобизированных силикагеяях удерживание комплексов возрастает в
ряду:
ИШРс' < MgPct < гпРс1 < СоРс' < БпОгРс' < ТЬРс'2 < ЬиРс'2 < ВуРс'2 < Н2Рс' < СиРс' < №Рс' « PdPct (подвижная фаза: ацетонитрил - зтилацетат (50:50))
(1)
Удерживание коррелирует со способностью центрального атома металла образовывать связи в аксиальных направлениях. Координационно-насыщенные комплексы (Си, №, Р(1) удерживаются сильнее лиганда, а координационно-ненасыщенные (Mg, Тп, Со) и комплексы с аксиальными лигандами (КЬС1, БпСЬ) - слабее. Влияние центрального иона металла (Ьи, Е>у, ТЬ) на хроматографическое поведение дифтапоциа-нинов выражено слабо, разделить их не удается. Это может быть связано с полным экранированием центрального атома редкоземельного элемента двумя макроцикличе-скими лигандами. Вероятно, по этой же причине, близки хроматографические свойства дифталоцианинов и безметального фталоцианина. В ряде подвижных фаз дифталоцианины выходят двумя пиками. Возможно это связано с тем, что для фтало-цианатов этого типа - зеленая форма - характерна реакция внутримолекулярного переноса электрона с металла на лиганд с образованием синей формы. Примеры разделения некоторых смесей тетра-4-трет-бутилзамещенных фталоцианатов показаны на рис. 1,2. Зависимость коэффициентов емкости фталоцианинов и их комплексов с металлами от состава подвижной фазы представлены на рис. 3.
Удерживание лиганда и комплексов на аминированном силикагеле в условиях обращенной (2) и нормальной (3) фаз возрастает в рядах:
Ш1С1Рс' = ТЬРс2' = ОуРс2' 5 ЬиРс2' < №Рс' = СоРс' < Н2Рс1 < СиРс' < РёРс1 < гпРс' < М§Рс' < БпСЬРс* (подвижная фаза: ацетонитрил - этилацетат (50:50))
(2)
Н2Рс' = №Рс' < СиРс' < ЬиРс2' < ТЬРс2' < ЭуРс2' < Рс1Рс' < гпРс' < Ш1С1Рс' < СоРс'« MgPc' « БпС^Рс' (подвижная фаза: гексан - изопропанол (95:5))
(3)
В данном случае в качестве координирующихся лигандов выступают не только молекулы подвижной фазы, но и привитые аминопропильные группы сорбента. Отметим, что наиболее подходящими для разделения тетра-4-треш-бутилфталоцианина и его комплексов с металлами являются гидрофобизированные силикагели.
Я = Н - фталоцианин (Н2Рс) Я = С(СНз)з - тетра-4-трет-бугилфталоцианин и его комплексы с металлами: Хп, Си, Mg, №, РсЗ, Со, ЯЪО, БпСЬ (Н2Рс',МРс1) Ьи, ТЬ, Бу (МРс'2)
(СНЗЙС
С<СЯз)3
:(СНзй
(СНз)зС-
Тетра(3,5-ди-т/7е/и-бутил-4-оксифенил)додекахлор-фталоцианин и его комплексы с металлами: 2п, Си, Ра, Р1, Со
:снз)з
лС(СНз)з
Окта-4,5-карбоксифталоцианин и его комплексы с металлами: Хп , Си, Со, РЬ, УО
502№1Ц»Нз?
Триоктадецилсульфамоилфталоцианат (М - Бп) и диоктадецилсульфа-моилфталошанины (две группы —502ШС18Нз7) (М = Н2, ЩОН)3))
НпСцКМОЙ
ЭОгМКРцНз?
■ ■_1_
0 2 мин
^ мин
Рис. 1. Хроматограмма смеси тетра-4-тре/я-бутилфталоцианина (4) и его комплексов с 2п (1), ЛЬС1 (2), Ьи (3). Колонка ц-Бондапак С18> подвижная фаза - метилэтилкетон. Рис. 2. Хроматограмма смеси тетра-4-тре/л-бутилфталоиианина (4) и его комплексов с 1п (1), Со (2), ТЬ (3), № (5). Колонка ц-Бондапак С18, подвижная фаза - ацетон.
-■— СиРа
-^-СиТБТАП —»—гпРс —нгРс ■х— ^орс«
10 20 X 40
Ацетонитрил/иэопропанол (у/у %)
Рис. 3. Зависимость коэффициента емкости фталоцианинов от содержания ацетонитрила в изопропаноле. Колонка ц-Бондапак С,8.
Аминированный и немодифицированный силикагели могут быть использованы для разделения координационно-ненасыщенных комплексов.
Времена удерживания тетра(3,5-ди-т/>етя-бутил-4-оксифенил)додекахлорфтало-цианина и его комплексов с металлами в обоих вариантах ВЭЖХ достаточно близки. Это может быть связано с тем, что центральный атом металла и ароматическая система макроцикла лиганда участия в образовании связи адсорбент - адсорбат не принимают. В обоих вариантах времена удерживания невелики, так как взаимодействия адсорбент - адсорбат достаточно слабы. Возможны и стерические препятствия при адсорбции таких объемистых молекул. Следует учитывать также, что крупные алкиль-ные заместители в порфиринах сольватируются значительно хуже самого макроцикла, поэтому наличие восьми трет-бутильных групп в молекуле фталоцианина ухудшает их взаимодействие с компонентами подвижных фаз. В результате хроматографиче-ские свойства комплексов металлов с тетра(3,5-ди-/и/5ет-бугил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианином не столь хороши как у комплексов с тетрафе-нилпорфирином и тетра-4-треот-бутилфталоцианином. Сильное взаимодействие кар-бокси-групп окта-4,5-карбоксифталоцианинов с остаточными силанольными группами гидрофобизированного силикагеля, по-видимому, приводит к размыванию пиков этих фталоцианинов практически во всех изученных подвижных фазах. Влияние природы и состава элюента на удерживание замещенных фталоцианинов, имеющих множество возможных центров сольватации различными типами растворителей, не всегда можно однозначно оценить. Так, размывание пиков тетра(3,5-ди-/лре«-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианина и его комплексов с металлами значительно увеличивается даже при небольшом изменении полярности подвижной фазы при переходе от этилацетата к смеси этилацетат-ацетонитрил (20:80). Порядок выхода Н2Рс' и СиРс1 меняется в зависимости от природы подвижной фазы (рис. 4), что подтверждает условность понятия "координационно-насыщенный комплекс". Тетра-4-отрет-бутилфталоцианины сильно удерживаются в системе ацетонитрил - ц-Бондапак С18, в то время как коэффициенты емкости октадецилсульфамоил-замещенных фталоцианинов в этой системе невелики. Пики сэндвичевых дифтало-цианатов МРс'2 полностью размываются в подвижных фазах, содержащих диметил-формамид. Выбор подвижных фаз сложен, например, необходимо учитывать растворимость фталоцианинов. Так, окта-4,5-карбоксифталоцианины лучше изучать в системах полярный растворитель - вода. Для исследования тетра-4-трет-буталфталоцианинов наоборот, удобнее брать подвижные фазы средней полярности, такие как ацетон, смеси ацетонитрил - этилацетат, метанол - этилацетат (50:50), или хорошо координирующийся растворитель - диметилформамид. Для ди- и три-октадецилсульфамоилфталоцианинов лучшие хроматографические свойства наблюдаются в ацетонитриле, а для тетра(3,5-ди-/иреот-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианина и его комплексов с металлами в этилацетате.
О 8 16 24 32 40 ^мин
Рис. 4. Хроматограмма смеси тетра-4-тре/л-бутилфталоцианина (4) и его комплексов с КЬС1 (I), Хп (2), Си (3), № (5), Р<1 (б). Колонка ^-Бондапак С18, подвижная фаза - диметилформа-мид.
Методом ВЭЖХ показано наличие некоторого количества примесей в случае тетра(3,5-ди-трет-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианинов, окта-4,5-
карбоксифталоцианинов и октадецилсульфамоилфталоцианинов, неотделяемых обычными методами очистки. Разделены структурные изомеры октадецилсульфамо-илфталоцианинов, что подтверждает влияние расположения заместителей в макроцикле на удерживание (рис. 5).
Порядок элюирования безметального фталоцианина и его комплексов с металлами близок к ряду удерживания природных и синтетических порфиринов и коррелирует с рядами кинетической и термодинамической устойчивости металлопорфиринов.
Важным параметром оптимизации хроматографического разделения является температура колонки. При повышении температуры размывание пиков фталоциани-нов уменьшается (рис. 6). Это можно использовать для повышения чувствительности их определения.
Сравнительное исследование широкого круга структурных аналогов сложного строения показало, что удерживание замещенных фталоцнанннов в условиях ВЭЖХ зависит от природы заместителей и их расположения в макроцикле, азазамещения, числа макроциклов в молекуле, природы центрального атома металла. Важным параметром, влияющим на удерживание является также аксиальная координация. Таким образом, хроматографическое поведение металлфталоцианинов разной структуры отражает взаимное влияние атомов в сопряженных и многоконтурных ароматических системах.
I I I > 1 1 I I I I
0 4 8 12 ^ мин
Рис. 5. Хроматограмма комплекса триоктадецилсульфамоилфталоцианина с оловом. Колонка ц-Бондапак С)8, подвижная фаза - ацетонитрил. Б - пик растворителя.
Рис. 6. Зависимость № тетра-4-тре/л-бутилзамещенных фталоцианинов от обратной абсолютной температуры: СиРс' (1), Н2Рс' (2), ЬиРс'2 (3), гпРс1 (4), ЯЬС1Рс' (5). Колонка ц-Бондапак Си, подвижная фаза - изопропанол.
Хроматографнческое поведение замещенных порфирннов
Исследовано влияние алкил-, арил-, бензо- и азазамещения в молекуле порфири-на, а также наличия атома металла в макроцикле на удерживание синтетических пор-фиринов сложного строения:
мезо-метилтетраметилдиэтилпорфирин (Н2дМТМДЭП, гпцМТМДЭП)
мезо-метилтетраметилтетраэтилпорфирин (Н2цМТМТЭП)
С?!
д^дз^дгСНз; д2=д7=с2н5
тетраметилдиэтилпорфирин (7пТМДЭП)
К3=СбН5; д,=д8=С2Н5; (32=д3=<26=СЬ=СН3 мезо-фенилтетраметилдиэтилпорфирин (Н2цФТМДЭП, гпцФТМДЭП)
Нг^^-Н; 1*3=01; д .К^д^К^^д^С^ мезо-цианоктазтилпорфирин (Н2цЦОЭП)
к,=а2=Яз= л4= СбН13; дгд2=дз=д4=д5=дб-д7=д8:=н мезо-тетрагексилпорфирин (Н2цТГП, Pdjj.ll и)
1^2=1*3= СбН5; д,=д2-дз=д4=д5=д6=д7=д3=н мезо-тетрафенилпорфирин (Н2ТФП, гпТФП, СиТФП, Рс1ТФП)
к2=яз=к4=н; д,=д4=д5=д3=с2н5; д2=д3=д6=д7=сн3
моноазаэтиопорфирин П (Н2МАЭП П)
д,=дз=д6=д8-сн3; д2=д4=д5=д7=с2н5 моноазаэтиопорфирин IV (Н2МАЭПIV, СиМАЭП IV)
^^¡^¡^СИзОН!
мезо-тетра-л-метилфеншпетрабензопорфирин (2пцТМФТБП) а,=К2=Р3=Я4-С6Н5
мезо-тетрафенилтетрабензопорфирин (2пцТФТБП) К,=^2=Кз=К4=С6Н4СН2
мезо-тетрабензилтетрабензопорфирин (гпцТБТБП)
В условиях обращенной фазы для лигандов и металлокомплексов характерно возрастание времен удерживания с увеличением числа атомов углерода в боковых заместителях (табл. 1, рис. 7). Кроме того, на удерживание оказывает влияние природа заместителей. Так, НгцТГП удерживается сильнее Н2ТФП, хотя число атомов углерода в боковых цепях у них одинаково и заместители расположены симметрично в ц-положениях. Однако гексильные группы ближе по строению к углеводородным радикалам С18, чем фенильные, и, возможно, поэтому они сильнее взаимодействуют с сорбентом. Отметим сходство хроматографического поведения Н2|ЛТП и феофитина а, удерживание которого в условиях обращенной фазы происходит за счет гидрофобных взаимодействий, главным образом фитильного остатка с поверхностью сорбента.
Различие в расположении боковых заместителей в макроцикле также влияет на удерживание, например к' изомеров Н2МАЭП П и Н2МАЭП IV несколько отличаются. Это может быть связано с влиянием функционального замещения на растворимость порфиринов. Известно, что уменьшение плотности упаковки молекул в кристалле приводит к увеличению растворимости. Изомер этиопорфирина П обладает более низкой растворимостью в бензоле и спиртах по сравнению с изомером IV (расположение боковых заместителей соответствует Н2МАЭП П и IV соответственно). Это свидетельствует о том, что конфигурация молекулы первого из упомянутых порфиринов более благоприятна для получения плотной упаковки молекул в кристалле. Макроциклический лиганд этиопорфирина II более симметричен, так как содержит две оси симметрии. Действительно, во всех исследованных подвижных фазах Н2МАЭП П удерживается сильнее, чем Н2МАЭПIV. У мезо-замещенных цинковых
Таблица 1. Зависимости времен удерживания порфиринов от количества атомов углерода в боковых заместителях макроцикла.
Количество атомов углеро- Время удерживания (мин)
Соединение да в в подвижной фазе ацетонит-
боковых заместителях рил-этилацетат (80:20)
Н2цМТМДЭП 9 7,1
Н2МАЭПIV 12 8,4
Н2цМТМТЭП 13 7,8
Н2цФТМДЭП 14 7Д
Н2цЦОЭП 17 11,5
Н2ТФП 24 8,2
Н2цТГП 24 21,8
2пцТФТБП 40 6,2
гпцТМФТБП 44 7,4
гпцТБТБП 44 9,4
I
О
1, мин
Рис. 7. Хроматограмма смеси цинковых комплексов порфиринов: 1 - гпТМДЭП, 2 -гпцМТМДЭП, 3 - гпцФТМДЭП, 4 - гпТФП. Колонка ц-Бондапак Сш, подвижная фаза - аце-тонитрил.
комплексов порфирина и тетрабензопорфина порядок выхода практически во всех подвижных фазах одинаков: гпТФП < 2пцТБТБП < 2пцТФТБП < 2п(дТМФТБП. Это, вероятно, связано с тем, что у двух последних увеличена цепь сопряжения за счет периферийных фенильных колец.
Наличие метального заместителя в пара-положении в комплексе цинка с цТМФТБП усиливает донорные свойства заместителей вследствие положительного индуктивного эффекта. У 2пцТБТБП фенил изолирован от ароматической системы макроцикла и не может на нее оказать существенного влияния. Поэтому данный комплекс удерживается слабее предыдущих. гпцТФТБП отличается от 2пТФП наличием четырех бензо-заместителей и удерживается сильнее его во всех исследованных подвижных фазах. Бензо-заместители также увеличивают цепь сопряжения в макроцикле, что приводит к повышению адсорбции пигмента. В добавление к этому при бензо-замещении существенно увеличивается количество атомов углерода в молекуле (табл. 1). Было установлено, что азазамещение одного метанового мостика приводит к увеличению удерживания. Сопоставление удерживания Н2цМТМТЭП и Н2МАЭП IV показывает, что азазамещение больше влияет на удерживание, чем введение метальной группы в ц-положение. При аза- и бензозамещении в молекуле порфина ароматичность и жесткость макроцикла растут. Увеличение ароматичности (возрастание порядка связей) в макрокольце приводит к возрастанию сил межмолекулярного
(гидрофобного) взаимодействия, и значит должно увеличивать удерживание на обращенной фазе.
Отметим, что разделение и определение порфиринов с гидрофобными заместителями в макрокольце обращенно-фазовый вариант ВЭЖХ является более предпочтительным, чем нормально-фазовый.
Изучение механизма адсорбции фталоцианннов и норфнринов
Для выяснения механизмов адсорбции в различных хроматографических системах нами рассмотрена применимость моделей Скотта-Кучеры и Снайдера-Сочевинского для описания удерживания фтапоцианинов и порфиринов в ВЭЖХ, а также рассчитаны и проанализированы изотермы адсорбции.
Линейный характер зависимостей 1/к' - М и - для тетра-4-тре/л-бутилфталоцианина и его комплексов с металлами выполняется только в ограниченной области исследованных концентраций этилацетата в системе ацетонитрил - этил-ацетат - Диасорб-130-№12 (рис. 8). Это может указывать на существенное влияние взаимодействий между молекулами сорбата, этилацетата и ацетонитрила в подвижной фазе на удерживание фталоцианинов. Однако, классические модели адекватно описывают удерживание порфиринов, содержащих большое количество атомов углерода (С>17) в боковых заместителях макроцикла (Н2цТТП, Н2|ДДОЭП, Н2ТФП), т. е. наиболее гидрофобных соединений (система ацетонитрил - этилацетат - д-Бондапак С^) (рис. 9). Эти соединения сильно адсорбируются на неполярной поверхности сорбента и относительно слабо взаимодействуют с полярным компонентом элюента (ацетонитрил). Возможно, для адекватного описания механизмов удерживания фталоцианинов и порфиринов, целесообразно применять квазихимическую модель равновесной адсорбции, общую для нормально- и обращенно-фазовой ВЭЖХ. Однако, применение этой модели затруднено из-за сложности рассматриваемых систем и отсутствия количественных характеристик межмолекулярных взаимодействий в таких системах.
Изотермы адсорбции ряда фталоцианинов и порфиринов в системе ацетонитрил - этилацетат (60:40) - ц-Бондапак С18 относятся к Ь-типу. Расположение изотерм адсорбции и величины изменения энергии Гиббса адсорбции (табл. 2) согласуются с порядком выхода из колонки исследованных порфиринов и фталоцианинов: Н2Рс' > гпРс' > Н2цФТМДЭП > гпцФТМДЭП (рис. 10). Возможно, что аза- и бензозамеше-ние, а также большее количество атомов углерода в боковом обрамлении макроцикла приводят к тому, что наибольшие значения времен удерживания и максимальная адсорбция наблюдаются у тетра-4-/ярет- бутилфталоцианина. Отметим, что адсорбция цинкового комплекса фталоцианина намного
201.61.2-оэ-
£14
ао
оо
а1
—I— 02
аз
—I—
04
—I—
0.5
М(ЭА)
06
—I
07
Рис. 8. Зависимость обратной величины коэффициента емкости от мольной доли этилацета-та в подвижной фазе ацетонитрил - этилацетат для сорбента Диасорб-13 0-ЫН2.
Рис. 9. Зависимость логарифма коэффициентов емкости порфиринов: 1 - Н2цТГП, 2 - Н2ТФП, 3 - Н2цЦОЭП, 4 - Н2цФТМДЭП, 5 - Н2цМТМТЭП от отрицательного логарифма мольной доли этилацетата в подвижной фазе ацетонитрил - этилацетат для сорбента ц-Бондапак С18. •
Таблица 2. Оценочные величины емкости монослоя, констант адсорбции и энергии Гиббса.
Соединение Емкость монослоя аш, моль/г Константа адсорбции, К Изменение энергии Гиббса адсорбции, ДО", кДж/моль
гпцФТМДЭП 2,6610"' 5,0 105 -32,5
Н2цФТМДЭП 1,50'10-' 2,0106 -35,2
гпРс' 1,6510-' 2,0 10й -36,0
Н2Рс' 4,7110"' 2,910' -36,9
С , М
рааи.
Рис. 10. Изотермы адсорбции (Т=20 °С), система ацетонитрил - этилацетат (60:40) - )х-Бондапак Си.
меньше, чем у лиганда и близка к таковой у безметального порфирина, что коррелирует с величинами селективности: Н2Рс{/2пРс1 - 3,2; 2пРс1/Н2ЦФТМДЭП - 1,1; Н2цФТМДЭП/2пцФТМДЭП - 1,4. Отсюда следует, что центральный атом металла может способствовать взаимодействию макроциклических молекул с компонентами подвижной фазы, что уменьшает их удерживание и адсорбцию по сравнению с лиган-дами на обращенно - фазовых сорбентах. Наличие аксиальных лигандов затрудняет взаимодействие пигментов с адсорбционными центрами. Однако, введение металлов другой природы, таких как N¡(11), Рс1(Н), Си(П) оказывает противоположное влияние на удерживание и адсорбцию соответствующих комплексов. Сопоставление изотерм адсорбции Н2Рс1 и №Рс1, полученных по данным хроматографического и статического методов, в системах диметилформамид - Нуклеосил С | д и диметилформамид -Преп-Пак-500 С {8 (относятся к Б-типу), позволило представить концентрационные зависимости в более широком интервале (рис. 11).
С ,м
раен.
Рис. 11. Изотермы адсорбции (Т^20°С), рассчитанные по данным хроматографического и статического методов.
Из-за сильного размывания хроматографических пиков окта-4,5-карбоксифталоцианина и его комплексов с металлами данные по их адсорбции для построения изотерм получали в статических условиях (рис. 12). Все изотермы относятся к классу Ленгмюра. Расположение изотерм адсорбции согласуется с порядком выхода других координационно-насыщенных и ненасыщенных комплексов фтало-цианинов из колонки с обращенной фазой: VOL < PbL < ZnL < CoL < H2L < CuL. Уменьшение адсорбции комплексов кобальта, цинка, свинца и ванадила по сравнению с безметальным фталоцианином, по-видимому, происходит из-за присоединения к центральному атому металла аксиальных лигандов. Это, безусловно, препятствует образованию прочных ассоциатов, в том числе и на поверхности адсорбента. Из полученных данных рассчитаны оценочные величины емкости монослоя, константы адсорбции и изменение энергии Гиббса (табл. 3).
Из данных для построения изотерм адсорбции рассчитаны градуировочные графики для определения фталоцианинов (Н2Рс!, ZnPc') и порфиринов (Н2цФТМДЭП, гпцФТМДЭП) методом ВЭЖХ в системе АН-ЭА (60:40) - ц-Бондапак С18 и фталоцианинов (NiPc', Н2Рс') в системе ДМФА - Нуклеосил Cig. Пределы обнаружения комплексов и лигандов составляют п-10"8 М.
С , М
равн.
Рис. 12. Изотермы адсорбции (Т=20°С) окта-4,5-карбоксифталоцианина (2) и его комплексов с Си (1), Со (3), Хп (4), УО (5), РЬ (6) в системе диметилформамид - вода (30:70) - Преп-Пак-500 С,8.
Таблица 3. Оценочные величины емкости монослоя, констант адсорбции и изменения энергии Гиббса окта-4,5-карбоксифталоцианина и его комплексов с металлами в системе диме-тилформамид - Н,0 (30:70) - Преп-Пак-500 С„.__
Емкость Константа адсорбции, Изменение энергии Гиб-
Соединение монослоя К бса адсорбции,
ат, моль/г AG0, кДж/моль
СиРс(СООН)8 1,2 10"6 1,79 Ю4 -24,3
Н2Рс(СООН)8 3,510'7 1,72105 -29,9
СоРс(СООН), 6,3 ю-7 9,47103 -22,7
ZnPc(COOH), 2,110-' 7,26104 -27,7
РЬРс(СООН), 6,4'10'8 4,20105 -32,1
VOPc(COOH), 9,210"8 2,55104 -25,1
Разделение изомеров фталоцианинов и порфиринов
Для разделения структурных изомеров комплексов I-VI (формулы приведены ниже) наиболее подходящим является нормально-фазовый вариант ВЭЖХ:
Я
N Си N
тетра-4-фенокси-тетра-5-нитрофталоцианат меди (I)
Соединение
-К02
Я. Яг
тетра-4-[(4-фенилазо)-фенокси]тетра-5-нитрофталоцианат меди (II)
тетра-4-[1-нафтокси]-тетра-5- _N02
нитрофталоцианат меди (III)
тетра-4-трет-бутил-тетра-5- _}ч102
нитрофталоцианат меди (IV)
—С(СНз)з
тетра-4-фенилтио-тетра-5-нитрофталоцианат меди (V)
тетра-4-фенокси-тетра-5-ациламинофталоцианат меди (VI)
Во всех исследованных подвижных фазах (толуол, гексан - толуол (20:80), (40:60)) получено 3-4 пика (рис. 13). Наличие полярных нитро-групп способствует сильному взаимодействию адсорбат - адсорбент. Показано, что все исследованные соединения представляют собой смеси структурных изомеров. При использовании гидрофобизированного сорбента с подвижными фазами ацетонитрил - этилацетат (50:50), диметилформамид, изопропанол пики структурных изомеров не разрешаются. Разделение рандомеров представляет собой нелегкую задачу, поэтому, целесообразно систематическое изучение влияния структурных особенностей фталоцианинов на параметры их удерживания в условиях ВЭЖХ.
Исследовано влияние атропизомерии (рис. 14) и орто- и мета-изомерии на удерживание порфиринатов в условиях обращенно-фазовой ВЭЖХ. Подвижные фазы были выбраны на основании исследований, проведенных ранее с алкил- и арилзамещенными порфиринами. Следует отметить, что практически во всех изученных системах (Новапак С18 - ацетонитрил, ацетонитрил - этилацетат (90:10, 80:20, 70:30)) происходит разделение орто- и -иета-изомеров 5,15-ди(фенил-СНзО)-3,7,13,17-тетраметил-2,8,12,18-тетрабутилпорфири-ната цинка, а также атропизомеров 5,15-ди(фенил-2-СН30)-3,7,13,17-тетраметил-2,8,12,18-тетрабутилпорфирината цинка. Метокси-группы в орто-положениях фенильных мезо- заместителей препятствуют их
0 1 2 3 4 5
I, МИН
Рис. 13. Хроматограмма комплекса меди с тетра-4-фенилтио-тетра-5-нитрофталоцианином (V). Колонка Силасорб-600, подвижная фаза гексан - толуол (20:80), Б - пик растворителя. (150x3,9 мм).
Рис. 14. Цис- (а) и транс- (б) изомеры 5,15-ди(фенил-2-СНзО)-3,7,13,17-тетраметил-2,8,12,18-тетрабутилпорфирина.
свободному вращению, поэтому фенильные кольца перпендикулярны плоскости макроцикла. Для мета-изомера, по-видимому, затруднений для свободного вращения не возникает и фенильные заместители могут располагаться в одной плоскости с макрокольцом молекулы порфирина, что увеличивает взаимодействие порфирина с поверхностью сорбента. Возможно, по этой причине мета-изомер удерживается сильнее, чем орто-изомер. Для атропизомера в ¡/ыс-форме характерно более слабое удерживание на обращенной фазе, по сравнению с транс-изомером. Это может быть связано с
большей полярностью г/ыс-изомера, что увеличивает его взаимодействие элюентом (рис.15).
О 2 ^ мин
Рис. 15. Хроматограмма смеси цинковых комплексов порфиринов: 1 и 2 соответственно цис-и транс-изомеры 5,15-ди(фенил-2-СНзО)-3,7,13,17-тетраметил-2,8,12,18-тетрабушлпор-фирината цинка, 3 - 5,15-ди(фенил-3-СН30)-3,7,13,17-тетраметил-2,8,12,18-тетрабутл-порфиринат цинка. Колонка Новапак С^, подвижная фаза - ацетонитрил-этилацетат (70:30).
Косвевное спектрофотометраческое детектирование фуллеренов
При косвенном детектировании на хроматограмме фиксируют изменение концентрации модификатора подвижной фазы, а не определяемого вещества. Использование фталоцианинов в качестве косвенных реагентов представляется перспективным в связи с высокими молярными коэффициентами светопоглощения этих соединений в длинноволновой области спектра = 660-670 нм, е-5-105), в которой растворители, применяемые в ВЭЖХ, практически не поглощают.
При выборе в качестве объектов исследования фуллеренов мы учитывали следующее. Молекулы фуллеренов и порфиринов способны к я-тс-взаимодействиям, что используется для разделения фуллеренов на силикагелях с иммобилизованными порфиринами и фталоцианинами. В длинноволновой области спектра фуллерены практически не поглощают, поэтому по высотам или площадям пиков на хромато-
1
3
2
грамме (косвенные отклики) можно непосредственно судить о количественном соотношении фуллеренов в смеси.
В качестве модификаторов подвижных фаз для косвенного детектирования фуллеренов были выбраны диоктадецилсульфамоилфталоцианин (НгРс^ОгИНС^Нзу^), его комплекс с ниобием ((0Н)зМЬРс(8021ЧНС 1^37)2), комплекс триоктадецилсульфа-моилфталоцианина с оловом (БпРс^ОгИНС^Нзу^), а также комплекс тетра-4-трет-бутилфталоцианина с цинком (2пРс'), хорошо растворимые в подвижных фазах.
При косвенном детектировании фуллеренам соответствуют положительные пики (рис. 16), системный пик отрицателен. Это подтверждает наличие сильного межчастичного фуллерен-фталоцианинового взаимодействия, обусловленного близкими диаметрами фуллереновой и порфириновой полостей. л-л-Взаимодействие между молекулами модификатора и анализируемого вещества нарушает распределение фтало-цианина между подвижной и неподвижной фазами и приводит к появлению аналитического сигнала. Таков, по-нашему мнению, механизм косвенного детектиро-
I 2 ■ '_1
О
4
8
t мин
Рис. 16. Хроматограмма смеси фуллеренов С№ (3) и С70 (4). 1 - растворитель (бензол), 2 - модификатор гпРс". Колонка ц-Бондапак С18, подвижная фаза - ацетонитрил - этилацетат (10:90)Д=669 нм.
1
вания фуллеренов. Взаимодействие модификатора в подвижной и неподвижной фазах с фуллеренами только в одном случае (БпРс^СЬЫНС |8Н37)з) приводит к некоторому уменьшению времен удерживания фуллеренов.
Хроматограмма (рис. 16) дает представление об истинном соотношении фуллеренов в смеси, в отличие от прямого детектирования, так как в последнем случае (>.=368 нм) е(С70) > е(С60). Наилучший результат был достигнут при применении гпРс1 в качестве модификатора подвижной фазы (90:10) этилацетат - ацетонитрил (Смод.^2,0-10"6 М), чувствительность определения по сравнению с таковой при прямом детектировании (А.=368 нм) для Сбо при >.=669 нм возрастает примерно в 2 раза.
Метод косвенного детектирования фуллеренов с помощью фталоцианинов можно применять для быстрого определения соотношений продуктов синтеза в бензоловом (толуоловом) экстракте из фуллереновой сажи. Возможен и количественный анализ, так как концентрационная зависимость линейна в диапазоне (3,2-51,0)-10"5 М. Установлено, что косвенный отклик увеличивается при повышении концентрации анализируемого соединения (Си), уравнение градуировочного графика С=3,61 10'5Ь (11=0,99), где Ь - высота хроматографического пика, см; С - концентрация фуллерена Сбо, М; (подвижная фаза этилацетат - ацетонитрил (90:10) - мод. гпРс1). Содержание Сбо в образце фуллереновой сажи составляет 84,2 %.
Выводы
1. Систематически исследовано хроматографическое поведение тстрг-4-трет-бутилфталоцианина и его комплексов с металлами 2п(П), Си(П), Со(П), N¡(11), N^(11), Р(3(П), ЩШ), Ьи(1У), 1)у(Г\0, ТЬ(1У), Бп(1У) на гидрофобизированных, аминирован-ных и немодифицированном силикагелях методом ВЭЖХ. Установлены закономерности удерживания этих соединений на различных сорбентах в зависимости от состава подвижной фазы, природы центрального атома металла, числа макроциклов в молекуле, температуры и длины колонки. Найдены условия для разделения безметальных фталоцианинов и порфиринов и их комплексов с металлами.
2. Сопоставлены хроматографические свойства замещенных фталоцианинов и их комплексов с металлами. Показано, что хроматографические характеристики тет-ра(3,5-ди-трет-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоиианина, окта-4,5-карбоксифталоцианина и их комплексов с металлами хуже, чем у тетрафенилпорфи-ринатов и тетра-4-трет-бутилфталоцианатов. Подтверждено, что центральный атом металла и ароматическая система макроцикла наиболее объемистых лигандов участие в связи адсорбат - адсорбент не принимают, поэтому влияние природы металла на удерживание выражено слабо. Найдены условия для разделения структурных изомеров ди- и триоктадецилсульфамоилпроизводных фталоцианина.
3. В условиях обращение- и нормально-фазовой ВЭЖХ изучено поведение ал-ккл-, арил- и азазамещенных порфиринов, их комплексов с 2п(11), Си(П) и Рс1(11). Подтверждено, что удерживание синтетических порфиринов зависит от количества атомов углерода в боковых заместителях, расположения боковых заместителей и их природы, аза- и бензозамещения, наличия центрального атома металла. Показано, что для идентификации порфиринов с гидрофобными заместителями наиболее перспективны обращенно-фазовые сорбенты. Подобраны условия для разделения близких по структуре порфиринатов цинка, а также атропизомеров; орто- и мета-изомеров ди-фенипзамещенных порфиринов.
4. В условиях обращенной фазы исследована адсорбция некоторых фталоциани-нов и порфиринов методом ВЭЖХ и статическим. Рассчитаны изотермы адсорбции из статических и хроматографических данных. Показано, что сочетание двух методов изучения адсорбции позволяет получать изотермы в более широком интервале концентраций. Найдено, что процессы адсорбции фталоцианинов в исследованных системах практически равновесны.
Установлено, что классические модели Скотга-Кучеры и Снайдера-Сочевинского применимы для описания удерживания порфиринов и фталоцианинов только в ограниченных областях концентраций модификатора (этилацетата). На гид-рофобизированном силикагеле эти зависимости близки к линейным для наиболее гидрофобных соединений.
5. Найдены условия для идентификации и количественного определения тетра-4-треш-бутилфталоцианина, его комплексов с цинком и никелем, а также 15-фенил-2,8,12,18-тетраметил-3,7-диэтилпорфирина и его комплекса с цинком методом ВЭЖХ. Показана возможность определения этих соединений с высокой чувствительностью со спектрофотометрическим детектированием в видимой (670 и 410 нм - фталоцианинов и порфиринов соответственно) и в ультрафиолетовой (336 нм - фталоцианинов) областях спектра.
6. Изучено хроматографическое поведение тетра(4-нитро-5-фенокси)фталоцианата меди в условиях обращенно- и нормально-фазовой ВЭЖХ. Установлено, что это соединение и ряд аналогичных октазамещенных фталоцианатов меди, содержат структурные изомеры, для разделения которых наиболее подходит система гексан - толуол (60:40) - Силасорб 600 (колонка 150x3,9 мм).
7. Предложены хроматографические системы и найдены условия для косвенного спектрофотометрического детектирования фуллеренов Сб0 и С70 в видимой области спектра. Показаны преимущества косвенного детектирования по сравнению с прямым ультрафиолетовым детектированием. Проанализирован экстракт из фуллереновой сажи, содержащий фуллерены С60 и С70.
Основное содержание диссертации изложено в следующих публикациях:
1. Уварова М.И., Воробьева С.Л. Высокоэффективная жидкостная хроматография фуллеренов С60, С70 и тетрациан-этиленового оксида фуллерена / Тез. докл. Международного аэрозольного симпозиума IAS-3. Москва. 1996. Секция: Фуллерены. С. 13.
2. Uvarova M.I., Brykina G.D., Shpigun О.A. HPLC of tetra-4-t-butylphthalocyanine and its complexes with metals / Abs. of International congress on analytical chemistry. Moscow. 1997.V. 2. E-24.
3. Brykina G.D., Uvarova M.I., Shpigun O.A. RP-HPLC of some metal phthalocya-nines // Microchim. Acta. 1998. V. 128. '3-4. P. 251.
4. Uvarova M.I., Brykina G.D., Shpigun O.A. The study of adsorption of alkyl- and arylsubstituted porphyrins and their zinc complexes by HPLC method / Abs. of International conference on spectroscopy and chemistry of porphyrins and their analogs. Minsk. 1998. P. 83.
5. Уварова М.И., Брыкина Г.Д., Шпигун O.A. Производные фталоцианина как модификаторы подвижных фаз для косвенного детектирования фуллеренов в ВЭЖХ // Журн. аналит. химии. 1999. Т. 54. №3. С. 252.
6. Лазарева Е.Е., Уварова М.И., Брыкина Г.Д. ВЭЖХ комплексов металлов с тетра(3,5-ди-/яре/и-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианином // Вестн. Моск. ун-та. Серия 2. Химия. 1999. Т. 40. Ш. С. 107.
7. Уварова М.И., Брыкина Г.Д., Шпигун О.А., Шишкина О.В., Майзлиш В.Е., Шапошников Г.П. Разделение геометрических изомеров комплекса меди с тетра(4-нитро-5-фенокси)фталоцианином методом ВЭЖХ / Тез. докл. XIX Всероссийского Чугаевского совещания по химии комплексных соединений. Иваново. 1999. С. 102.
8. Uvarova M.I., Brykina G.D., Shpigun O.A. Chromatographic behaviour of some porphyrins and their complexes with Zn, Pd (II) and Си (II) // J. Porphyrins Phtha-locyanines. 2000. V. 4. P. 209.
9. Альбов Д.В., Уварова М.И. Программа для компьютерного расчета изотерм и некоторых термодинамических параметров адсорбции / Тез. докл. Международной конференции студентов и аспирантов по фундаментальным наукам "Ломоносов-2000". Москва. 2000. С. 24.
10. Уварова М.И., Брыкина Г.Д., Шпигун О.А. Порфирины и фталоцианины в высокоэффективной жидкостной хроматографии //Журн. аналит. химии. 2000. Т. 55. №10. С. 1014.
11. Брыкина Г.Д., Уварова М.И., Шпигун О.А. Адсорбция окта-4,5-карбоксифталоцианина и его комплексов с металлами в системе вода - диме-тилформамид- неполярный адсорбент//Журн. физ. химии. 2001. Т. 75. №1. С. 124.
Подписано в печать 3i- ^2000 года.
Заказ № ■ Формат 60 х 90/|6. Усл. печ. л. /Ж Тираж .9(7 экз. Отпечатано на ризографе.
Отпечатано в отделе оперативной печати и информации Химического факультета М ГУ.
Список сокращений.
Введение.
Глава 1. Порфирины и фталоцианины в жидкостной хроматографии (обзор литературы).
Глава 2. Исходные вещества, аппаратура, расчетные формулы.
Глава 3. Хроматографическое поведение замещенных фталоцианинов и их комплексов с металлами.
3.1. Тетра-4-трет-бутилфталоцианин.
3.1.1. Гидрофобизированные силикагели.
3.1.2. Аминированные силикагели.
3.1.3. Немодифицированный силикагель.
3.2. Тетра(3,5-ди-т/?ет-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианин.
3.2.1. Гидрофобизированный силикагель.
3.2.2. Немодифицированный силикагель.
3.3. Окта-4,5-карбоксифталоцианин.
3.4. Октадецилсульфамоил-производные фталоцианина.
3.5. Обсуждение результатов.
Глава 4. Изучение механизма адсорбции фталоцианинов.
4.1. Модели Скотта - Кучеры и Снайдера - Сочевинского.
4.2. Изотермы адсорбции по данным ВЭЖХ.
4.3. Изотермы адсорбции по данным статического метода.
4.4. Обсуждение результатов.
Глава 5. Хроматографическое поведение замещенных порфиринов.
5.1. Связь удерживания и структуры соединений.
5.1.1. Гидрофобизированные силикагели.
5.1.2. Аминированный и немодифицированный силикагели.
5.2. Механизм удерживания.
5.3. Обсуждение результатов.
Глава 6. Разделение изомеров фталоцианинов и порфиринов.
6.1. Разделение структурных изомеров фталоцианинов.
6.2. Разделение атропизомеров и орто- и мета-изомеров дифенилзамещенных порфиринов.
Глава 7. Косвенное спектрофотометрическое детектирование фуллеренов.
Выводы.
Актуальность темы. При использовании фталоцианинов и их структурных аналогов в различных областях науки и техники нужны чистые соединения, не содержащие изомеров и каких-либо примесей. Обычно даже направленный синтез тетра- и октазамещенных фталоцианинов приводит к образованию ряда структурных изомеров.
Для выделения и очистки фталоцианинов (как и порфиринов) широко применяется препаративная хроматография. Определению примесей в ме-таллфталоцианинах посвящено необычайно мало работ и практически не используется метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Методом ВЭЖХ, несомненно, может быть не только проконтролирована степень разделения и очистки структурных изомеров, но прежде всего подобраны условия для их препаративного хроматографического разделения. Метод ВЭЖХ наиболее перспективен для идентификации изомеров, оценки устойчивости продуктов синтеза, определения примесей в сырых продуктах синтеза и в очищенном материале. Отметим, что до настоящего времени не проводилось исследований, которые связывали бы структуру фталоцианинов с их хроматографическим поведением.
Таким образом, исследование поведения фталоцианинов в различных системах в условиях ВЭЖХ актуально в двух аспектах: в теоретическом -установление связи между структурой соединений и их хроматографиче-скими свойствами и практическом - идентификация фталоцианинов по параметрам удерживания, разделение структурных изомеров, определение степени очистки и др. Актуальной также является разработка различных вариантов косвенного детектирования в ВЭЖХ, поиск новых модификаторов подвижных фаз, поглощающих в видимой области спектра. В связи с этим в настоящей работе для косвенного спектрофотометрического детектирования неэлектролитов предполагается использовать фталоцианины.
Цель работы. На основе изучения хроматографического поведения и адсорбции замещенных фталоцианинов и синтетических порфиринов в различных системах растворителей на различных сорбентах при комнатной и повышенной температурах установить закономерности удерживания фталоцианинов и их структурных аналогов; использовать метод ВЭЖХ для идентификации и количественного определения этих соединений; а также для разделения изомеров, образующихся при синтезе фталоцианинов и порфиринов. Конкретные задачи исследования:
- проследить влияние структуры лигандов и центрального атома металла на удерживание соединений;
- использовать ВЭЖХ для идентификации, оценки степени очистки и количественного определения соединений;
- подобрать условия для разделения и идентификации структурных изомеров ряда порфиринов и фталоцианинов;
- изучить механизм адсорбции фталоцианинов и порфиринов, проверить адекватность описания экспериментальных данных уравнениями Снайдера
- Сочевинского и Скотта - Куч еры;
- выбрать фталоцианины для использования в качестве модификаторов подвижных фаз для косвенного спектрофотометрического детектирования неэлектролитов.
Научная новизна. В условиях нормально- и обращенно-фазового вариантов ВЭЖХ систематически исследовано хроматографическое поведение ряда фталоцианинов (тетра-4-трем-бутилфталоцианин, тетра(3,5-ди-т/?ет-бутил-4-оксифенил)додекахлорфталоцианин, окта-4,5-карбоксифталоци-анин) и их комплексов с металлами ^п(П), Си(П), Со(П), N1(11), 1У^(П), Рс1(П), ЩШ), Ьи(1У), Бу(1У), ТЬ(1У), 8п(1У) и др.), а также некоторых ал-кил- и арилзамещенных порфиринов, азапорфиринов и их комплексов с Ъп(\\), Си(П) и Рс1(П). Найдены условия для разделения безметальных фталоцианинов и их металлокомплексов.
Установлены закономерности удерживания фталоцианинов и порфи-ринов с боковыми заместителями различной природы. Исследовано влияние температуры колонки на селективность разделения соединений.
Изучена адсорбция ряда соединений в статике и в условиях ВЭЖХ, рассчитаны изотермы адсорбции. Рассмотрена применимость классических моделей Снайдера - Сочевинского и Скотта - Кучеры для описания экспериментальных данных.
Практическая значимость. Полученные данные по хроматографиче-ским параметрам удерживания фталоцианинов и порфиринов позволили выбрать системы для разделения и количественного определения методом ВЭЖХ с высокой чувствительностью тетра-4-т/?<ш-бутилфталоцианина, его комплексов с цинком и никелем, а также 15-фенил-2,8Д2,18-тетраметил-3,7-диэтилпорфирина и его комплекса с цинком. Показана перспективность метода ВЭЖХ для качественной идентификации и количественной оценки содержания фталоцианинов в продуктах синтеза и в очищенном материале. Подобраны условия для разделения структурных изомеров тетра(4-нитро-5-фенокси)фталоцианата меди и атропизомеров 5,15-ди(фенил-2-метокси)-3,7,13,17-тетраметил-2,8,12,18-тетрабутилпорфи-рината цинка. Предложены хроматографические системы и найдены условия для косвенного спектрофотометрического детектирования в видимой области спектра фуллеренов Сбо и С70, показаны преимущества косвенного детектирования по сравнению с прямым ультрафиолетовым детектированием. Проанализирован экстракт из фуллереновой сажи, содержащий фул-лерены Сбо и С70.
Выводы
1. Систематически исследовано хроматографическое поведение тетра-4-т/?ет-бутилфталоцианина и его комплексов с металлами 2п(П), Си(П), Со(П), №(П), М§(П), Рс1(П), ЩШ), Ьи(1У), Оу(1У), ТЬ(1У), 8п(1У) на гид-рофобизированных, аминированных и немодифицированном силикагелях методом ВЭЖХ. Установлены закономерности удерживания этих соединений на различных сорбентах в зависимости от состава подвижной фазы, природы центрального атома металла, числа макроциклов в молекуле, температуры и длины колонки. Найдены условия для разделения лиганда и комплексов.
2. Сопоставлены хроматографические свойства замещенных фтало-цианинов и их комплексов с металлами. Показано, что хроматографические характеристики тетра(3,5-ди-от/?ет-бутил-4-оксифенил)додекахлорфтало-цианина, окта-4,5-карбоксифталоцианина и их комплексов с металлами хуже, чем у тетрафенилпорфиринатов и тетра-4-ш/)е/и-бутилфталоцианатов. Подтверждено, что центральный атом металла и ароматическая система макроцикла наиболее объемистых лигандов участие в связи адсорбат - адсорбент не принимают, поэтому влияние природы металла на удерживание выражено слабо. Найдены условия для разделения структурных изомеров ди- и триоктадецилсульфамоилпроизвод-ных фталоцианина.
3. В условиях обращенно- и нормально-фазовой ВЭЖХ изучено поведение алкил-, арил- и азазамещенных порфиринов, их комплексов с 2п(П), Си(П) и Рс1(И). Подтверждено, что удерживание синтетических порфиринов зависит от количества атомов углерода в боковых заместителях, расположения боковых заместителей и их природы, аза- и бензозамещения, наличия центрального атома металла. Показано, что для идентификации порфиринов с гидрофобными заместителями наиболее перспективны обращенно-фазовые сорбенты. Подобраны условия для разделения близких по структуре порфиринатов цинка, а также атропизомеров; орто- и мета-изомеров дифенилзамещенных порфиринов.
4. В условиях обращенной фазы исследована адсорбция некоторых фталоцианинов и порфиринов методом ВЭЖХ и статическим. Рассчитаны изотермы адсорбции из статических и хроматографических данных. Показано, что сочетание двух методов изучения адсорбции позволяет получать изотермы в более широком интервале концентраций. Найдено, что процессы адсорбции фталоцианинов в исследованных системах практически равновесны.
Установлено, что классические модели Скотта-Кучеры и Снайдера-Сочевинского применимы для описания удерживания порфиринов и фталоцианинов только в ограниченных областях концентраций модификатора (этилацетата). На гидрофобизированном силикагеле эти зависимости близки к линейным для наиболее гидрофобных соединений.
5. Найдены условия для идентификации и количественного определения тетра-4-т/?ет-бутилфталоцианина, его комплексов с цинком и никелем, а также 15-фенил-2,8,12,18-тетраметил-3,7-диэтилпорфирина и его комплекса с цинком методом ВЭЖХ. Показана возможность определения этих соединений с высокой чувствительностью со спектрофотометрическим детектированием в видимой (670 и 410 нм - фталоцианинов и порфиринов соответственно) и в ультрафиолетовой (336 нм - фталоцианинов) областях спектра.
6. Изучено хроматографическое поведение тетра-4-нитро-тетра-5-феноксифталоцианата меди в условиях обращенно- и нормально-фазовой ВЭЖХ. Установлено, что это соединение и ряд аналогичных октазамещен-ных фталоцианатов меди, содержат структурные изомеры, для разделения которых наиболее подходит система гексан - толуол (60:40) - Силасорб 600 (колонка 150x3,9 мм).
7. Предложены хроматографические системы и найдены условия для косвенного спектрофотометрического детектирования фуллеренов Сбо и С70 в видимой области спектра. Показаны преимущества косвенного детектирования по сравнению с прямым ультрафиолетовым детектированием. Проанализирован экстракт из фуллереновой сажи, содержащий фуллерены Сбо и С70.
1. McKeown N.B., Chambrier I., Cook M.J.// J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1. 1990. P. 1169.
2. Feucht C., Linßen T., Hanack M.// Chem. Ber. 1994. V. 127. P. 113.
3. Kliesch H., Weitemeyer A., Müller S., Wöhrle D.// Liebigs Ann. 1995. P. 1269.
4. Linßen T. G., Hanack M.// Chem. Ber. 1994. V. 127. P. 2051.
5. Leznoff C.C., McArthur C.R., Qin Y Л Can. J. Chem. 1993. V. 71. P. 1319.
6. Yang J., Rogers T.C., Van De Mark M.R.// J. Heterocyclic Chem. 1993. V. 30. P. 571.
7. Piechoki C., Simon J.// J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1985. P. 259.
8. Гуринович Г.П., Севченко A.H., Соловьев K.H. Спектроскопия хлорофилла и родственных соединений. Минск: Наука и техника, 1968.
9. Березин Б.Д. Координационные соединения порфиринов и фталоциани-на. М.: Наука, 1978.
10. Sommerauer M., Rager С., Hanack M.// J. Am. Chem. 1996. V. 118. P. 10085.
11. Hanack M., Meng D., Beck A., Sommerauer M., Subramanian L.R.// J. Chem. Soc. Chem. Commun. 1993. P. 58.
12. Гришина JI.E., Брыкина Г.Д., Шпигун O.A.// Журн. аналит. химии. 1995. Т. 50. №9. С. 902.
13. Oppenheimer L.E.//J. Chromatogr. Sei. 1981. V. 19. P. 266.
14. Schmid G., Sommerauer M., Hanack M.// Angew. Chem. 1993. V. 105. P. 1540.
15. Conneely A., Smyth W.F., McMullan G.// FEMS Microbiol. Lett. 1999. V. 179. P. 333.
16. Conneely A., Smyth W. F., McMullan G.// J. Porphyrins&Phthalocyanines. 1999. V. 3. P. 552.
17. Fisher Ch.-H.// J. Chromatogr. 1992. V. 592. P. 261.
18. Ayyangar N.R., Srinivasan K.V.// Colourage. 1990. V. 89. P. 34.
19. Schmid G., Sommerauer M., Geyer M. and Hanack M. Phthalocyanines Properties and Application. V. 4/ Ed. C.C. LeznofF, A.B.P. Lever. New York: VCH N.Y., 1996. P. 1.
20. Симон Ж., Андре Ж.-Ж. Молекулярные полупроводники. М.:Мир, 1988.
21. Борисенкова С.А.// Вестн. Моск. ун-та. Сер. 2, Химия. 1984. Т. 25. № 5. С. 427.
22. Suwinska Т., Gregorowicz Z.II Zecz. nauk. PS1. Chem. 1986. V. 114. P. 97. Цит. по РЖХим. 1987. 23Г371.
23. Stojakovic D.R., Rajic N.Z.// J. Serb. Chem. Soc. 1993. V. 58. P. 701. Цит. по РЖХим. 1994. 15Г347.
24. Slota R., Waclawek WM Chem. Anal. (Warsaw) 1993. V. 38. P. 619. Цит. по РЖХим. 1994. 15Г334.
25. Xu X.-J., Zhang H.-S., Zhang C.-Y., Cheng J.-K.// Anal. Chem. 1991. V. 63. P. 2532.
26. Shi Z.H., Fu C.G.// Talanta. 1997. V. 44. P. 593.
27. Igarashi S., Nakano M., Yotsuyanagi T.// Bunseki Kagaku. 1983. V. 32. P. 67.
28. Igarashi S., Hashimoto Т., Matsumoto Y., Yotsuyanagi T.// Bunseki Kagaku. 1983. V. 32. P. 591.
29. Igarashi S., Obara A., Adashi H., Yotsuyanagi T.// Bunseki Kagaku. 1986. V. 35. P. 829.
30. Saitoh K., Suzuki N.// Anal. Chim. Acta. 1985. V. 178. P. 169.
31. Zhao C., Huang D., Zhang Z., Tong Z., Li CM Chin. Pharm. J. 1995. V. 99. P. 8843. Цит. по РЖХим. 1996. 5Г172.
32. Cheng G„ Liu W. // Pittsburgh Conf. Presents PITTCON'96, Chicago, III., March 3-8, 1996: Book Abstr. Chicago (III.)., 1996. P. 418P.
33. Yan D., Zhang J., Schwedt G.//Chem. J. Chin. Univ. 1990. V. 11. P. 136. Цит. по РЖХим. 1991. 8Г167.
34. Креславский В.Д., Садовникова H.A., Оловянишникова Г.Д., Столовиц-кий Ю.М.// Журн. физ. химии. 1995. Т. 69. № 2. С. 326.
35. Цивадце А.Ю., Вариек A.A., Хуторский В.Е. Координационные соединения металлов с краун-лигандами. М.: Наука, 1991.
36. Хроматография. Практическое приложение метода. Т. 2/ Под ред. Хефтмана Э. М.: Мир, 1986.
37. Лазарева Е.Е., Брыкина Г.Д., Шпигун O.A. // Журн. аналит. химии. 1998. Т. 53. №3. С.230.
38. Брыкина Г.Д., Лазарева Е.Е., Уварова М.И., Шпигун O.A.// Журн. аналит. химии. 1997. Т. 52. № 10. С. 1073.
39. Лазарева Е.Е. Дис. . канд. хим. наук. М.: МГУ, 2000.
40. Carr P.W.// Pittsburgh Conf. Presents PITTCON'96, Chicago, III., March 38, 1996: Book Abstr. Chicago (III.)., 1996. P. 026.
41. Kibbey C.E., Meyerhoff M.E.//Anal. Chem. 1993. V. 65. P. 2189.
42. Chen S„ Meyerhoff MM Anal. Chem. 1998. V. 70. P. 2523.
43. Saito Y., Mifirne M., Odo J., Otsuki Y., Mitsuhashi M., Mori Y., Gassim A. E. H., Haginaka J.//Anal. Sei. 1991. V. 7. P. 805.
44. Mifime M., Shimomura Y., Saito Y., Onoda M., Iwado A., Motohashi N., Haginaka J.// Bull. Chem. Soc. Jpn. 1998. V. 71. P. 1825.
45. Mifime M., Mori Y., Onoda M., Iwado A., Motohashi N., Haginaka J., Saito YM Anal. Sei. 1998. V. 14. P. 1127.
46. Mifime M., Kanai Т., Urabe M., Iwado A., Haginaka J., Motohashi M., Saito YM Anal. Sei. 1999. V. 15. P. 581.
47. Kibbey C.E., Meyerhoff M.E.// J. Chromatogr. 1993. V. 641. P. 49.
48. Mifime M., Onoda M., Takatsuki Т., Kanai Т., Iwado A., Motohashi N., Haginaka J., Saito YM Chem. Pharm. Bull. 1999. V. 47. P. 346.
49. Kibbey C.E., Savina M.R., Parseghian B.K., Francis A.H., Meyerhoff M.E.// Anal. Chem. 1993. V. 65. P. 3717.
50. Xiao J., Savina M.R., Martin G.B., Francis H.A., Meyerhoff M.E.// J. Am. Chem. Soc. 1994. V. 116. P. 9341.
51. GumanovL.L., Korsounskii B.L.// Mendeleev Commun. 1997. P. 158.
52. Jinno K., Kohrikawa C., Saito Y., Haginaka J., Saito Y., Mifune M.II J. Microcolumn separation. 1996. V. 8(1). P. 13.
53. Xiao J., Meyerhoff M.E.//J. Chromatogr. A. 1995. V.715. P. 19.
54. Kele M., Compton R.N., Guiochon GM J. Chromatogr. A. 1997. V. 786. P. 31.
55. Gumanov L.L., Korsunsky B.L., Derkacheva V.M., Negrimovsky V.M., Luk'yanets E.A.//Mendeleev Commun. 1996. P. 1.
56. Xiao J., Kibbey C.E., Countant D.E., Martin G.B., Meyerhoff M.E.// J. Liq. Chrom. & Rel. Technol. 1996. V. 19 (17&18). P. 2901.
57. Rüdel U., Meyerhoff M.E.//Anal. Chim. Acta. 1999. V. 392. P. 191.
58. Xiao J., Meyerhoff M.E.//Anal. Chem. 1996. V. 68. P. 2818.
59. Biesaga M., Orska J., Fiertek D., Izdebski J., Trojanowicz M. // Fresenius J. Anal. Chem. 1999. V. 364. P. 160.
60. Biesaga M., Orska J., Trojanowicz MM Chem. Anal. (Warsaw) 1998. V. 43. P. 647.
61. Trojanowicz M., Martin G.B., Meyerhoff M.E.// Chem. Anal. (Warsaw) 1996. V. 41. P. 521.
62. Triska J., Vrchotova N., Safarik I., Safarikova MM J. Chromatogr. A. 1998. V. 793. P. 403.
63. Baba Y., Kanano Y.// Chem. Lett. 1994. P. 181.
64. Борисенкова C.A., Гиренко Е.Г. Успехи химии порфиринов. Т. 1/ Под ред. Голубчикова O.A. С-Пб: Изд-во НИИ Химии СП6ГУ,1997. С. 212.
65. Badr I. Н. А., Meyerhoff М.Е., Hassan S. S. МЛ Anal. Chim. Acta. 1996. V. 321. P. 11.
66. Zou H., Zhang Y., Hong M., Lui P.// J. Liquid Chromatogr. 1993. V. 16. P. 3445.
67. Zhang S., Sun W.L., Xian Y.Z., Zhang W., Jin L.T., Yamamoto K., Tao S.G., Jin J.Y.//Anal. Chim. Acta. 1999. V. 399. P. 213.
68. Ruiz M.A., Garcia-Moreno E., Barbas C., Pingarron J.M.// Electroanal. 1999. V. 11. P. 470.
69. Woodum Т., Sacks R.// Pittsburgh Conf. Anal. Chem. And Appl, Spectrosc. presents PITTCON'95, New Orleans, La, March 5-10, 1995: Book Abstr. [New Orleans (La)], 1995. P. 576.
70. Сибрина Г.В., Блохина C.B., Ольхович M.B., Боровков Н.Ю.// Журн. общей химии. 1997. Т. 67. № 3. С. 472.
71. Сибрина Г.В., Блохина С.В., Ольхович М.В., Боровков Н.Ю.// Журн. общей химии. 1997. Т. 67. № 3. С. 479.
72. Боровков Н.Ю., Сибрина Г.В., Блохина С.В., Ольхович М.В.// Журн. общей химии. 1997. Т. 67. № 3. С. 485.
73. Biesaga М., Pyrzynska К., Trojanowicz М.// Talanta. 2000. V. 51. Р. 209.
74. Новикова Н.А., Митрофанова А.Н., Некрасов Л.И.// Журн. физ. химии. 1990. Т. 64. №4. С. 1000.
75. Мамлеева Н.А.// Журн. физ. химии. 1990. Т. 64. № 3. С. 593.
76. Лазарева Е.Е., Коровин И.Ю., Брыкина Г.Д.// Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 2. Химия. 1998. Т. 39. № 2. С. 106.
77. Snyder L.R.//J. Chromatogr. 1974. V. 92. P. 223.
78. Практические работы по адсорбции и газовой хроматографии /Под ред. Киселева А.В. М.: МГУ, 1968. С. 265.
79. Березин Б.Д., Ениколопян Н.С. Металлопорфирины. М.:Наука, 1988. С. 135.
80. Никифоров Н.Ю., Альпер Г.А., Дуров В.А. Растворы неэлектролитов в жидкостях. М.:Наука, 1989. С. 140.
81. Томилова Л.Г., Талисманов С.С.//Коорд. химия. 1998. Т. 24. №1. С. 27.
82. Березин М.Б. Успехи химии порфиринов. Т. 1/ Под ред. Голубчикова O.A. С-Пб: Изд-во НИИ Химии СП6ГУД997. С. 246.
83. Томилова Л.Г. Реферат дис. . док. хим. наук. М.: МГУ, 1995.
84. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии/ Под ред. Хеншена А., Хупе К.-П., Лотшпайха Ф., Вельтера В. М.:Мир, 1988. С. 498.
85. Брыкина Г.Д., Васильева Л.Е., Шпигун O.A. и др. // Коорд. химия. 1994. Т. 20. №3. С. 226.
86. Милаева Е.Р., Чечулина И.Н., Бундель ЮТ.// Вестн. Моск. Ун-та. Сер.2. Химия. 1989. Т. 30. № 4. С. 385.
87. Правова И.В., Мамлеева H.A., Борисенкова С.А. // Журн. физ. химии. 1991. Т. 65. №7. С. 1878.
88. Стужин П.А., Хелевина О.Г. Успехи химии порфиринов. Т. 1/ Под ред. Голубчикова O.A. С-Пб: Изд-во НИИ Химии СП6ГУ,1997. С. 150.
89. Гришина Л.Е., Уварова М.И., Брыкина Т.Д.// Вестн. Моск. Ун-та. Сер.2. Химия. 1997. Т. 38. № 3. С. 165.
90. Агеев А.Н., Яшин Я.И.// Журн. физ. химии. 1994. Т. 68. № 10. С. 1749.
91. Агеев А.Н., Орлов В.И., Яшин Я.И.// Журн. физ. химии. 1994. Т. 68. № 10. С. 1873.
92. Snyder L.R., Poppe Н.// J. Phromatogr. 1980. V. 184. P. 363.
93. Ланин C.H., Никитин Ю.СЛ Журн. аналит. химии. 1991. Т. 46. № 8. С.1493.
94. Dorsey J.G., Cooper W.T.//Analyt. Chem. 1994. V. 66. № 17. P. 857A.
95. Чудук H.A., Эльтеков Ю.А.// Журн. Физ. химии. 1981. Т. 55. № 4. С. 1010.
96. Гришина Л.Е., Лазарева Е.Е., Брыкина Г.Д.// Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 2. Химия. 1997. Т. 38. № 1. С. 61.
97. Никитин Ю.С.ПЖурн. физ. хим. 1998. № 7. С. 1293.
98. Мозжелина Т.К., Серебренникова О.В., Бейко O.A., Красовская Л.И.// Нефтехимия. 1985. Т. 25. № 5. С. 692.
99. Брыкина Г.Д., Лазарева Е.Е., Уварова М.И., Шпигун O.A.// Журн. ана-лит. химии. 1997. Т. 52. № 10. С. 1067.
100. Трофименко Г.М., Семейкин A.C., Березин М.Б., Березин Б.Д.// Коорд. химия. 1996. Т. 22. № 6. С. 505.
101. Ланин С.Н., Ланина H.A., Никитин Ю.С.//Журн. физ. химии, 1995. Т. 69. №11. С. 2045.
102. Шишкина О.В., Майзлиш В.Е., Кудрик Е.В., Шапошников Г.П., Смирнов Р.П.// Журн. общей химии. 2000. Т. 70. №5. С. 815.
103. Шишкина О.В., Майзлиш В.Е., Шапошников Г.П., Смирнов Р.П.// Журн. общей химии. 2000. Т. 70. №6. С. 1002.
104. Sundararaman P.// Anal. Chem. 1985. V. 57. P. 2204.
105. Inoue H., Furuya К., Watanabe К., Tanaka К., Shirai T., Miyoshi E.// Anal. Sei. 1988. V. 4. P. 599.
106. Мамардашвили Н.Ж., Семейкин A.C., Голубчиков O.A.// Журн. орг. химии. 1993. Т. 29. 1 6. С. 1213.
107. Beesten R.F., Stitzel S.E., Rhea МАЛ J. Chem. Education. 1997. V. 74. 1 12. P. 1468.
108. Семейкин A.C. Успехи химии порфиринов. T. 1/ Под ред. Голубчикова O.A. С-Пб: Изд-во НИИ Химии СП6ГУД997. С. 52.
109. Hare J.P., Kroto H.W., Taylor R.//Chem. Phys. Let. 1991. V. 177. P. 394.
110. Ohta H., Saito Y., Jinno K., Nagashima H., Itoh K.//Chromatographia. 1994. V. 39. P. 453.
111. Lu В., Stefansson M., Westerlund D.// J.Chromatogr. A. 1995. V. 697. P. 317.
